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RBL-2H3-Zellen – Bedeutung von RBL-2H3 bei allergischen Reaktionen und in immunologischen Studien

Die RBL-2H3-Zelllinie ist eine aus Ratten gewonnene basophile Leukämiezelllinie, die in der immunologischen Forschung eingesetzt wird. Sie dient als Modellsystem zur Untersuchung der Physiologie, des Verhaltens und der Funktionen von Mastzellen. Diese Zellen werden außerdem zur Erforschung allergischer Reaktionen und immunologischer Prozesse sowie zur Prüfung und Entwicklung von Arzneimitteln verwendet.

📋 RBL-2H3-Zelllinie – Wissenswertes
Wachstumsmedium
Zur Kultivierung der RBL-2H3-Zellen wird EMEM-Medium verwendet, das 10 % FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/l NaHCO₃ und EBSS-Salz enthält. Das Medium sollte zwei- bis dreimal pro Woche gewechselt werden.
Verdopplungszeit
Die Verdopplungszeit der RBL-2H3-Mastzellen beträgt etwa 50–60 Stunden.
Wachstumsart
RBL-2H3 ist eine adhärente Zelllinie.
Sicherheitsstufe
BSL-2

RBL-2H3-Zellen: Herkunft und allgemeine Eigenschaften

Bevor Sie eine Basophilen-Zelllinie in Ihrer Forschung einsetzen, sollten Sie deren Herkunft und allgemeine Eigenschaften kennen. In diesem Abschnitt des Artikels erfahren Sie Grundlegendes über RBL-2H3-Zellen. Zum Beispiel: Was sind RBL-2H3-Mastzellen? Warum werden RBL-2H3-Zellen verwendet? Was sind RBL-2H3-Zellen bei der basophilen Leukämie der Ratte? Wie sieht die Morphologie der RBL-2H3-Zellen aus? Sind RBL-2H3-Zellen unsterblich?

  • RBL-2H3 sind basophile Leukämiezellen, die 1978 am Labor für Immunologie des National Institute of Dental Research aus Basophilen von Wistar-Ratten isoliert wurden.
  • RBL-2H3-Zellen besitzen c-kit-Rezeptor-Tyrosinkinase- und Mastzellprotease-II-Rezeptoren (RMCP-II), was sie zu einem potenziellen Mastzellmodell macht. Daher werden sie gemeinhin als Mastzellen bezeichnet, obwohl sie aus basophilen Zellen der Ratte stammen [1].
  • Bei Aktivierung setzen sie Histamin und andere Mediatoren frei und exprimieren hochaffine IgE-Rezeptoren.
  • RBL-2H3-Zellen weisen eine fibroblastenähnliche Morphologie auf.

Mikroskopische Darstellung eines Mastzell.

RBL-2H3-Zellen: Informationen zur Zellkultur

In diesem Abschnitt erfahren Sie einige wichtige Aspekte zur Kultivierung der RBL-2H3-Zelllinie. Sie erfahren: Wie lang ist die Verdopplungszeit der RBL-2H3-Zellen? Wie hoch ist die Aussaatdichte der RBL-2H3-Zellen? Wie lautet das Kultivierungsprotokoll für RBL-2H3-Zellen? Welches Einfriermedium wird für die RBL-2H3-Zelllinie verwendet?

Wichtige Punkte zur Kultivierung von RBL-2H3-Zellen

Verdopplungszeit der Population:

Die Verdopplungszeit der RBL-2H3-Mastzellen beträgt etwa 50–60 Stunden.

Adhärent oder in Suspension:

Die RBL-2H3 ist eine adhärente Zelllinie.

Subkultivierungsverhältnis:

Bei RBL-2H3-Zellen wird das Passagierungsverhältnis zwischen 1:2 und 1:4 gehalten. Adhärente Zellen werden mit einer magnesium- und kalziumfreien 1×-PBS-Lösung gewaschen. Es wird die Passagierungslösung Accutase hinzugefügt, und die Zellen werden 10 Minuten lang bei Raumtemperatur gehalten, damit sie sich vom Boden des Kulturgefäßes lösen. Frisches Medium wird hinzugefügt, und die Zellen werden zentrifugiert. Die geernteten Zellen werden vorsichtig in frischem Medium resuspendiert und in neue Flaschen mit Wachstumsmedium überführt.

Wachstumsmedium:

Zur Kultivierung der RBL-2H3-Zellen wird EMEM-Medium verwendet, das 10 % FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ und EBSS-Salz enthält. Das Medium sollte zwei- bis dreimal pro Woche ausgetauscht werden.

Wachstumsbedingungen:

RBL-2H3-Zellen werden in einem befeuchteten Inkubator bei einer Temperatur von 37 °C und unter Zufuhr von 5 % CO kultiviert.

Lagerung:

Die Zellen werden in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff oder bei einer Temperatur unter -150 °C in einem elektrischen Gefrierschrank gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen langfristig zu erhalten.

Einfrierverfahren und Medium:

Zum Einfrieren der RBL-2H3-Zellen im Langsamgefrierverfahren werden die Einfriermedien CM-1 oder CM-ACF verwendet. Kurz gesagt ermöglicht diese Methode eine Temperaturabsenkung um 1 °C pro Minute und schützt die Zellen vor einem Temperaturschock.

Auftauprozess:

RBL-2H3-Zellen werden etwa 60 Sekunden lang in einem voreingestellten Wasserbad (37 °C) aufgetaut. Anschließend werden die Zellen in frisches Kulturmedium gegeben und zentrifugiert. Dieser Schritt ist unerlässlich, um Bestandteile des Einfriermediums zu entfernen. Anschließend wird das Zellpellet in einem Wachstumsmedium resuspendiert und die Zellen werden zur Kultivierung in einen Kolben überführt.

Biosicherheitsstufe:

Die RBL-2H3-Zellen sollten in Laboren der Biosicherheitsstufe 1 gehalten werden.

Rbl 2h3 cells

Adhärente Monoschichten aus RBL-2H3-Zellen bei unterschiedlicher Konfluenz, 20- und 10-fache Vergrößerung.

Veröffentlicht: 2023 | Zuletzt überprüft: Mai 2026

Vorteile und Einschränkungen der Basophilen-Zelllinie RBL-2H3

RBL-2H3-Zellen werden häufig in der immunologischen Forschung eingesetzt. In diesem Abschnitt werden ihre wichtigsten Vorteile und Einschränkungen beschrieben.

Vorteile

  • Einfache Kultivierung: RBL-2H3-Zellen lassen sich in der Laborumgebung leicht kultivieren und erhalten. Dies ermöglicht kostengünstige und reproduzierbare Experimente, weshalb sie eine beliebte Wahl für erste Studien in der Immunologie sind.

Einschränkungen

  • Nicht-menschlicher Ursprung: Da RBL-2H3-Zellen aus Rattenbasophilen stammen, spiegeln sie menschliche biologische Prozesse möglicherweise nicht genau wider, was ihre Anwendbarkeit in human-spezifischen Forschungsstudien einschränken kann. Dies erfordert eine vorsichtige Interpretation der Daten, wenn Ergebnisse auf menschliche Systeme übertragen werden.
  • Vereinfachtes Mastzellmodell: Diese Zellen bieten zwar ein grundlegendes Modell zur Untersuchung von Mastzellfunktionen, spiegeln jedoch nicht vollständig die Komplexität der Mastzell-Interaktionen im menschlichen Immunsystem wider. Folglich können sie die vielschichtigen Rollen von Mastzellen bei Immunreaktionen oder Krankheitszuständen in vivo möglicherweise nicht angemessen abbilden.

Die RBL-2H3-Zelllinie: Ein Eckpfeiler der immunologischen Forschung

Basophilen- und Mastzellenforschung unter Verwendung der RBL-2H3-Zelllinie

Die von Rattus norvegicus stammende RBL-2H3-Zelllinie dient als wichtiges Modell zur Untersuchung der Biologie von Basophilen und Mastzellen. Diese Ratten-Mastzellen liefern wesentliche Erkenntnisse über die Freisetzung von Mastzellmediatoren, die für das Verständnis allergischer Erkrankungen wie der allergischen Rhinitis entscheidend sind. Anhand dieser Zellen untersuchen Forscher die Dynamik der Zellrezeptoren und die Bildung immunologischer Synapsen, die für die Reaktion des Immunsystems auf Allergene von zentraler Bedeutung sind. Eine interessante, im Jahr 2019 veröffentlichte Studie nutzte die RBL-2H3-Zelllinie und untersuchte die Mechanismen hinter pseudoallergischen Reaktionen, die durch die Injektion von Qingkailing ausgelöst wurden. Die Studie ergab, dass die PI3K-RAC1-Signalkaskade diese allergische Reaktion in den Zellen teilweise auslöst [2].

Dynamik immunologischer Synapsen in der Allergieforschung

RBL-2H3-Zellen werden in der immunologischen Forschung umfassend eingesetzt und eignen sich besonders gut zur Untersuchung der Dynamik immunologischer Synapsen. Dies trägt zur Aufklärung der Kommunikationsprozesse des Immunsystems bei und findet Anwendung bei der Untersuchung sowohl von peripheren Blut- als auch von peritonealen Mastzellen. Solche Forschungen sind für ein umfassendes Verständnis der Immunantwort sowohl im systemischen als auch im lokalisierten Kontext von entscheidender Bedeutung.

Wirkstoffscreening und Toxizitätsprüfungen

Beim Wirkstoff-Screening und bei Toxizitätstests wird die Reaktionsfähigkeit von RBL-Zellen auf verschiedene Reize genutzt, einschließlich der Untersuchung, wie H₂O₂ IgE-vermittelte Reaktionen hemmt. Diese Zellen spielen eine wesentliche Rolle bei der Entwicklung von Therapien für Erkrankungen wie Streptokokkeninfektionen, bei denen Streptokokken der Mitis-Gruppe die Mastzellaktivierung hemmen. Darüber hinaus bewerten Forscher mithilfe dieses RBL-2H3-Mastzellmodells die toxischen Wirkungen verschiedener Substanzen, darunter Chemikalien, Arzneimittel und Nanopartikel. So wurde beispielsweise in einer aktuellen Studie (2022) die Zytotoxizität von Polystyrol-Mikroplastik auf RBL-2H3-Zellen untersucht. Die Forscher fanden heraus, dass Mikroplastik die Organellen der RBL-2H3-Zellen schädigt und den Zelltod fördert [3]. Eine weitere Studie aus dem Jahr 2021 untersuchte das antiallergische und entzündungshemmende Potenzial eines Naturstoffs, Neferin, unter Verwendung des RBL-2H3-mc-Modells. Die Studie zeigte die guten antiallergischen und entzündungshemmenden Eigenschaften der Verbindung auf [4].

Fortschrittliche Methoden der immunologischen Messung

Die konsistente und messbare Freisetzung von Mediatoren aus RBL-2H3-Zellen macht diese ideal für die einfache Fluorimetrie geeignet und ermöglicht präzise und genaue Messungen, die für die Erforschung von Krankheiten und die Bewertung von Therapeutika entscheidend sind.

Die RBL-2H3-Zelllinie, die ihren Ursprung in Rattus norvegicus hat, ist sowohl in der Grundlagenforschung als auch in der angewandten Forschung auf dem Gebiet der Immunologie von unschätzbarem Wert. Sie bietet weitreichende Möglichkeiten, unser Wissen über immunologische Erkrankungen zu erweitern und deren Behandlung voranzutreiben.

Die Zelllinie RBL-2H3 für fortgeschrittene immunologische Forschung

RBL-2H3-Zellen: Forschungsarbeiten

Im Folgenden finden Sie einige spannende Forschungsveröffentlichungen zu den RBL-2H3-Mastzellen:

Hemmende Wirkung von Narirutin auf die Degranulation von RBL-2H3-Zellen

Diese Forschungsarbeit wurde in der Fachzeitschrift „Immunopharmacology and Immunotoxicology“ (2021) veröffentlicht. Die Studie legt nahe, dass Narirutin, ein Naturstoff, durch die Regulierung von NF-κB, MAPK und dem Tyrosinkinase-Signalweg eine hemmende Wirkung auf die Degranulation von RBL-2H3-Zellen ausübt.

Wirkungen von Apigenin auf RBL-2H3-, RAW264.7- und HaCaT-Zellen: antiallergische, entzündungshemmende und hautschützende Wirkungen

Diese im „International Journal of Molecular Sciences“ (2020) veröffentlichte Studie legte nahe, dass die Verbindung Apigenin allergische und entzündliche Reaktionen von RBL-2H3- und RAW264.7-Zellen signifikant unterdrückt. Daher könnte es als potenzielles Mittel zur Bekämpfung immunbedingter Erkrankungen dienen.

Entzündungshemmende und antiallergische Wirkungen von Saponarin und dessen Einfluss auf die Signalwege von RAW-264.7-, RBL-2H3- und HaCaT-Zellen

Diese Forschungsarbeit im „International Journal of Molecular Sciences“ (2021) untersuchte die antiallergischen und entzündungshemmenden Wirkungen des Naturstoffs Saponarin anhand verschiedener Zelllinien, darunter RBL-2H3.

Hemmende Wirkung von Extrakten und einigen reinen Inhaltsstoffen von Benchalokawichian, einem thailändischen pflanzlichen Heilmittel zur Behandlung allergischer Erkrankungen, auf die Freisetzung von β-Hexosaminidase aus RBL-2H3-Zellen

Diese Studie aus der Fachzeitschrift „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2014) ergab, dass Benchalokawichian-Extrakte und einige aktive Inhaltsstoffe potenzielle hemmende Wirkungen auf die Freisetzung von β-Hexosaminidase aus RBL-2H3-Zellen ausüben.

Peptide aus Spirulina maxima unterdrücken die Degranulation von Mastzellen durch Inaktivierung der Akt- und MAPK-Phosphorylierung in RBL-2H3-Zellen

Dieser Artikel wurde 2018 im „International Journal of Biological Macromolecules“ veröffentlicht. Die Studie kam zu dem Ergebnis, dass Spirulina maxima, ein Naturprodukt, die Degranulation von RBL-2H3-Zellen hemmt, indem es die Phosphorylierung von MAPKs und AKT verhindert.

Ressourcen zur RBL-2H3-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr

RBL-2H3 ist eine weit verbreitete Mastzelllinie. Die verfügbaren Ressourcen zu Kultivierungs- und Transfektionsprotokollen für RBL-2H3 werden hier aufgeführt:

  • RBL-2H3-Mastzellmodell: Dieser Forschungsartikel enthält Protokolle zur Aufrechterhaltung von RBL-2H3-Kulturen sowie zur Transfektion von RBL-2H3.

Hier finden Sie einige Ressourcen, die das Zellkulturprotokoll für RBL-2H3 erläutern:

  • RBL-2H3-Zellen: Diese Website ist hilfreich, um sich mit den Zellkulturprotokollen für die RBL-2H3-Zelllinie vertraut zu machen. Außerdem enthält sie Informationen zu RBL-2H3-Zellmedien und Kulturbedingungen.

Zelllinie RBL-2H3: Wichtige Fragen und Antworten für Forscher

Literaturverzeichnis

  1. Passante, E. und N. Frankish, Die RBL-2H3-Zelllinie: ihre Herkunft und Eignung als Modell für die Mastzelle. Inflamm Res, 2009. 58(11): S. 737–45.
  2. Li, Q. et al., Pseudoallergische Reaktion, ausgelöst durch eine Qingkailing-Injektion, teilweise über den PI3K-Rac1-Signalweg in RBL-2H3-Zellen. Toxicology Research, 2019. 8(3): S. 353–360.
  3. Liu, L. et al., Polystyrol-Mikro- (Nano-)Kunststoffe schädigen die Organellen von RBL-2H3-Zellen und fördern die Induktion der Apoptose durch MOAP-1. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: S. 129550.
  4. Chiu, K.-M. et al., Antiallergische und entzündungshemmende Wirkungen von Neferin auf RBL-2H3-Zellen. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): S. 10994.

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