KC-Zellen

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cryovial

Produktnummer: 300604

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Beschreibung	KC (Kc167) ist eine embryonale Zelllinie von Drosophila melanogaster, die aus einem weiblichen Embryo im Stadium des dorsalen Verschlusses gewonnen wurde und in Cellosaurus unter der Bezeichnung CVCL_Z833 registriert ist. Die Linie wurde ursprünglich etabliert und wird seitdem in der Drosophila-Zellbiologie, bei genetischen Screenings und in der funktionellen Genomik weit verbreitet eingesetzt. Kc167-Zellen wurden mit SV40 immortalisiert und wachsen semi-adhärent, wobei sie eine gemischte Population aus anhaftenden und lose schwebenden Zellen bilden. Sie gehören zu den am besten charakterisierten Drosophila-Zelllinien und eignen sich hervorragend für die RNAi-vermittelte Genstilllegung, was sie zu einem Eckpfeiler für genomweite RNAi-Screenings in der Biologie wirbelloser Tiere macht. KC-Zellen eignen sich für die Drosophila-Zellbiologie, genomweite RNAi- und CRISPR-Screenings, Untersuchungen zu Signaltransduktionswegen (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), die Forschung zur angeborenen Immunität sowie für vergleichende Studien zu evolutionär konservierten Signalwegen. Das vollständig sequenzierte und annotierte Drosophila-Genom in Verbindung mit umfangreichen öffentlichen Datenbanken für RNAi-Reagenzien (z. B. DRSC/TRiP) macht KC-Zellen besonders leistungsfähig für unvoreingenommene funktionelle Genomforschung. Aufgrund der SV40-Immortalisierung gilt die BSL-2-Einstufung. KC-Zellen werden in Schneider’s Drosophila-Medium kultiviert, das mit 2 mM Glutamin und 10 % FBS ergänzt ist. Entscheidend ist, dass Drosophila-Zelllinien bei 25 °C in Raumluft ohne CO₂ kultiviert werden (nicht bei 37 °C / 5 % CO₂ wie bei Säugetierzellen). Die Passagierung der Zellen erfolgt durch schonendes Resuspendieren und Verdünnen (halbadhärentes Wachstum). Das Medium wird alle 2–3 Tage erneuert oder die Zellen werden verdünnt.
Organismus	Drosophila melanogaster (Fruchtfliege)
Gewebe	Embryo
Krankheit	Normal
Metastasierender Ort	Embryo (Stadium des Rückenverschlusses)
Anwendungen	Drosophila-Zellbiologie; genomweite RNAi-Screenings; CRISPR-Screenings; Signaltransduktion (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); angeborene Immunität; funktionelle Genomik bei Wirbellosen
Synonyme	KC, K C

Alter	Phase des Rückenverschlusses
Geschlecht	Weiblich
Morphologie	halbadhärent, epithelartig
Zelltyp	Embryonale Zellen
Wachstumseigenschaften	halbhaftend

Zitat	KC (Cytion-Katalognummer 300604)
Biosicherheitsstufe	2
NCBI_TaxID	7227
CellosaurusAccession	CVCL_Z833
GVO-Status	GMO-S2: Diese Drosophila-Zelllinie enthält eine stabil integrierte SV40-Immortalisierungskassette. Eine BSL-2-Sicherheitsstufe ist erforderlich. Diese Einstufung gilt nur innerhalb Deutschlands und kann in anderen Ländern abweichen.

Virusanfälligkeit	SV40-immunisiert

Nährboden	Schneider-Drosophila-Medium + 2 mM Glutamin + 10 % fötales Rinderserum (FBS).
Supplemente	Das Medium mit 2 mM Glutamin und 10 % FBS ergänzen
Dissoziationsreagenz	Nicht erforderlich (teilweise anhaftend; vorsichtig resuspendieren)
Verdopplungszeit	ca. 24 bis 48 Stunden
Subkultivierung	Die Kultur vorsichtig pipettieren, um die halbadhärenten Zellen wieder in Suspension zu bringen. Ein geeignetes Volumen in ein neues Kolben überführen und frisches, vorgewärmtes Schneider-Medium hinzufügen. Auf eine Dichte von 5 × 10⁵ bis 1 × 10⁶ Zellen/ml verdünnen. Bei 25 °C in Umgebungsluft ohne CO₂ inkubieren.
Splitverhältnis	1 bis 3
Aussaatdichte	5 × 10⁵ bis 1 × 10⁶ Zellen/ml
Medienwechsel	Alle 2 bis 3 Tage
Einfriermedium	Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Auftauen und Kultivierung von Zellen	Vergewissern Sie sich, dass das Fläschchen bei der Lieferung tiefgefroren ist, da die Zellen auf Trockeneis versandt werden, um während des Transports optimale Temperaturen zu erhalten. Lagern Sie das Kryofläschchen nach Erhalt entweder sofort bei Temperaturen unter -150 °C, um die Unversehrtheit der Zellen zu gewährleisten, oder fahren Sie mit Schritt 3 fort, wenn eine sofortige Kultivierung erforderlich ist. Für eine sofortige Kultivierung tauen Sie das Fläschchen schnell auf, indem Sie es in ein 37°C warmes Wasserbad mit sauberem Wasser und einem antimikrobiellen Mittel eintauchen und 40-60 Sekunden lang vorsichtig schütteln, bis ein kleiner Eisklumpen zurückbleibt. Führen Sie alle weiteren Schritte unter sterilen Bedingungen in einer Abzugshaube durch und desinfizieren Sie das Kryo-Fläschchen vor dem Öffnen mit 70%igem Ethanol. Das desinfizierte Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension unter vorsichtigem Mischen in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen mit 8 ml Kulturmedium bei Raumtemperatur überführen. Zentrifugieren Sie das Gemisch 3 Minuten lang bei 300 x g, um die Zellen abzutrennen, und verwerfen Sie den Überstand mit dem restlichen Gefriermedium vorsichtig. Das Zellpellet vorsichtig in 10 ml frischem Kulturmedium resuspendieren. Bei adhärenten Zellen die Suspension auf zwei T25-Kulturflaschen aufteilen; bei Suspensionskulturen das gesamte Medium in eine T25-Flasche überführen, um eine effektive Zellinteraktion und ein effektives Wachstum zu fördern. Halten Sie sich an die festgelegten Subkulturprotokolle, um ein kontinuierliches Wachstum und die Aufrechterhaltung der Zelllinie zu gewährleisten und zuverlässige Versuchsergebnisse zu erzielen.
Inkubationsatmosphäre	25 °C, Umgebungsluft (kein CO₂ erforderlich).
Versandbedingungen	Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
Lagerungsbedingungen	Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Wenn Sie die Cytion-Zelllinien ausschließlich für interne Forschungszwecke an einem einzigen Forschungsstandort verwenden möchten, füllen Sie bitte unsere Materialübertragungsvereinbarung (MTA) aus, unterschreiben Sie sie und reichen Sie sie zusammen mit Ihrer Bestellung ein.

Für alle kommerziellen Anwendungen – einschließlich, aber nicht beschränkt auf Dienstleistungen gegen Entgelt, Qualitätskontrolltests, Produktfreigaben, diagnostische Anwendungen oder behördliche Studien – füllen Sie bitte das Formular zur beabsichtigten Verwendung aus, damit wir eine auf Ihr Projekt zugeschnittene Vereinbarung vorbereiten können.

Bitte beachten Sie: Die MTA gilt nur für bestimmte Zelllinien. Wenn dieser Hinweis und das MTA-Dokument auf einer Produktseite erscheinen, ist die Vereinbarung anwendbar. Für Zelllinien, die nicht unter die MTA fallen, wird kein Verweis auf die Vereinbarung angezeigt. Die MTA gilt nicht für Kunden in Amerika, China oder Taiwan. Bitte wenden Sie sich an unsere US-Niederlassung, um die entsprechende Vereinbarung zu erhalten.

KC-Zellen

Allgemeine Informationen

Merkmale

Regulatorische Daten

Biomolekulare Daten

Handhabung

Qualitätskontrolle und molekulare Analyse

Materialübertragungsvertrag