CTX-Zellen

CTX (auch als CTX0E03 bezeichnet) ist eine bedingt immortalisierte menschliche neurale Stammzelllinie, die aus dem kortikalen Neuroepithel eines menschlichen Fötus im ersten Trimester gewonnen wurde. Die Zelllinie wurde durch retrovirale Integration eines c-mycER^TAM-Fusions-Transgens erzeugt, das die Zellproliferation nur in Gegenwart von 4-Hydroxytamoxifen (4-OHT) antreibt. In Abwesenheit von 4-OHT und in mitogenfreiem Medium kommen CTX0E03-Zellen zu einem Wachstumsstillstand und differenzieren sich zu Neuronen und Astrozyten, wobei sie ihre multipotente Differenzierungsfähigkeit beibehalten. Die Zelllinie ist klonal, weist einen normalen menschlichen Karyotyp (46,XY) auf und wurde unter GMP-konformen Bedingungen für eine potenzielle klinische Anwendung entwickelt.

CTX0E03 wurde in präklinischen Modellen des ischämischen Schlaganfalls (MCAo-Rattenmodell) untersucht, wobei die implantierten Zellen eine signifikante Wiederherstellung der sensomotorischen Funktion förderten. Die Zelllinie befindet sich in klinischen Studien zur Schlaganfalltherapie. Sie wird zudem als In-vitro-Modell für die Biologie neuraler Stammzellen, die Differenzierung kortikaler Neuronen, die Alzheimer-Forschung (Abeta-Toxizitätsstudien) und das neuropharmakologische Screening eingesetzt. Das System der bedingten Immortalisierung macht CTX0E03 besonders geeignet für Sicherheits- und Wirksamkeitsstudien, da die Proliferation durch Entzug von 4-OHT vor der Transplantation ausgeschaltet werden kann.

CTX0E03 wird in DMEM/F12, ergänzt mit N2-Supplement, EGF (20 ng/ml) und FGF-2 (20 ng/ml) sowie 4-OHT (1 μM) auf Laminin-beschichteten Oberflächen bei 37 °C in 5 % CO₂ vermehrt. Zur Differenzierung werden die Wachstumsfaktoren und 4-OHT entzogen. Die Linie ist der Biosicherheitsstufe 1 zugeordnet (in Deutschland GVO-S1 aufgrund des integrierten c-mycERTAM-Transgens). Anwender sollten die in ihrem Rechtsgebiet geltenden GVO-Vorschriften einhalten.