Buňky Wilms3
800,00 €*
Produkty jsou dodávány zmrazené v suchém ledu v kryotrubkách. Každá kryotrubka obvykle obsahuje 3 × 10 6 buněk pro adhezivní linie nebo 5 × 106 buněk pro suspenzní linie (podrobnosti najdete v certifikátu analýzy šarže).
Obecné informace
| Popis | Buněčná linie Wilms3 byla vytvořena z primárního Wilmsova nádoru u dětského pacienta, který se vyznačoval somatickou mutací WT1. Na rozdíl od mnoha jiných buněčných linií Wilmsova nádoru je Wilms3 nositelem heterozygotní frameshift mutace v genu WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), která vede k produkci zkráceného proteinu WT1. Tato částečná ztráta funkce WT1 je spojena s rozvojem nádorů, které vykazují stromální nebo mezenchymální fenotyp. Mutace WT1 u Wilms3 však není homozygotní, což přispívá ke složitosti jejího studia, protože si zachovává určitou funkci WT1, která může ovlivňovat biologii nádoru odlišně ve srovnání s buněčnými liniemi s úplnou ztrátou WT1. Wilms3 nese také mutaci v genu CTNNB1, konkrétně postihující threonin 41 (p.T41A), který hraje kritickou roli v signální dráze Wnt. Tato mutace stabilizuje β-katenin, čímž brání jeho degradaci a vede ke konstitutivní aktivaci dráhy Wnt. Přetrvávající aktivace signalizace Wnt pohání buněčnou proliferaci a přispívá k tumorigenezi u Wilms3, což z něj činí klíčový model pro studium dopadu mutací CTNNB1 v kontextu částečně funkčního pozadí WT1. Fenotypově buňky Wilms3 vykazují morfologii podobnou mezenchymálnímu nádoru, exprimují vimentin a postrádají cytokeratin, což odpovídá stromálním charakteristikám pozorovaným v původním nádoru. Tyto buňky vykazují omezený diferenciační potenciál se schopností určité mezenchymální diferenciace za specifických podmínek. Proteomické analýzy Wilms3 odhalily aktivaci několika receptorových tyrozinkináz (RTK), včetně PDGFRβ a AXL, které podporují přežití a proliferaci buněk. Kromě toho jsou aktivovány navazující signální dráhy, jako jsou MAPK a PI3K/AKT, což posiluje maligní vlastnosti buněk Wilms3. Jedním z jedinečných aspektů Wilms3 je částečná funkčnost WT1, což poskytuje odlišný pohled na to, jak mutace WT1 přispívají k biologii Wilmsova nádoru, pokud mutace není úplná. Vzájemné působení signalizace WT1 a Wnt u Wilms3 nabízí cennou příležitost ke studiu diferencovaných rolí, které tyto dráhy hrají ve vývoji nádoru. Celkově Wilms3 slouží jako důležitý model pro zkoumání molekulárních mechanismů, které jsou základem Wilmsova nádoru v přítomnosti částečné ztráty WT1 a konstitutivní aktivace dráhy Wnt. |
|---|---|
| Organismus | Člověk |
| Tkáň | Ledviny |
| Nemoc | Wilmsův nádor |
| Aplikace | Model buněčné kultury in vitro. Biochemické studie |
Charakteristika
| Věk | 11-12 měsíců |
|---|---|
| Pohlaví | Muži |
| Etnická příslušnost | Kavkazský |
| Morfologie | Vřetenovitý tvar |
| Typ buňky | Wilmsovy buňky |
| Růstové vlastnosti | Adherentní |
Regulační údaje
| Citace | Wilms3 (katalogové číslo Cytion 300414) |
|---|---|
| Úroveň biologické bezpečnosti | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SF |
| Vkladatel | B. Royer-Pokora |
Biomolekulární data
| Mutační profil | Stav mutace WT1: homozygotní c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, stav mutace CTNNB1: divoký typ |
|---|
Zpracování
| Kultivační médium | Souprava MSCGM (od společnosti Lonza) |
|---|---|
| Disociační činidlo | Accutase |
| Subkultivace | Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium. |
| Zmrazovací médium | Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo. |
| Rozmrazování a kultivace buněk |
|
| Inkubační atmosféra | 37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra. |
| Povlak baňky | Žádný |
| Postup zmrazování | Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu. |
| Přepravní podmínky | Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu. |
| Podmínky skladování | Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku. |
Kontrola kvality / Genetický profil / HLA
| Sterilita | Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy. Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám. |
|---|---|
| Profil STR |
Amelogenin: x,y
CSF1PO: 11,12
D13S317: 12,13
D16S539: 9,11
D5S818: 9,9
D7S820: 10,11
TH01: 6,6
TPOX: 8,8
vWA: 16,17
D3S1358: 15,16
D21S11: 29,31
D18S51: 13,17
Penta E: 7,10
Penta D: 9,13
D8S1179: 10,11
FGA: 22,24
|
| Alely HLA |
A*: '03:01:01
B*: '35:01:01, '35:03:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:03:01, '11:04:01
DQA1*: '03:01:01, '05:05:01
DQB1*: '03:01:01, '03:02:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:03:02, '01:06:01
|
Certifikát o analýze (CoA)
| Číslo pozemku | Typ certifikátu | Datum | Katalogové číslo |
|---|---|---|---|
| 300414-221 | Certifikát o analýze | 23. May. 2025 | 300414 |
Dohoda o převodu materiálu
Pokud máte v úmyslu používat buněčné linie Cytion výhradně pro interní výzkum na jednom výzkumném pracovišti, vyplňte a podepište naši smlouvu o převodu materiálu (MTA) a přiložte ji k vaší objednávce.
Pro jakékoli komerční použití – včetně, ale nejen, práce za úplatu, testování kontroly kvality, uvolňování produktů, diagnostické použití nebo regulační studie – vyplňte prosím formulář zamýšleného použití, abychom mohli připravit vhodnou smlouvu přizpůsobenou vašemu projektu.
Upozornění: MTA se vztahuje pouze na určité buněčné linie. Pokud se toto oznámení a dokument MTA objeví na stránce produktu, smlouva je platná. U buněčných linií, na které se MTA nevztahuje, nebude odkaz na smlouvu zobrazen. MTA není platná pro zákazníky v Americe, Číně nebo na Tchaj-wanu. Chcete-li obdržet příslušnou smlouvu, kontaktujte naši americkou pobočku.