خلايا imWilms1
٨٠٠٫٠٠ €*
يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 6 خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 106 خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).
معلومات عامة
| الوصف | تم اشتقاق سلالة خلايا ويلمز1 في الأصل من ورم ويلمز الأولي، الذي تم الحصول عليه من مريض تم تشخيص إصابته بأورام الكلى الثنائية الكبيرة، وهو عرض مميز لورم ويلمز (ورم أرومي كلوي). يحتوي خط الخلية هذا على طفرة متماثلة الزيجوت في جين WT1 (ج.149 C>A، p.S50X)، مما يؤدي إلى إنتاج بروتين WT1 مبتور وغير وظيفي. يعتبر WT1 جينًا حاسمًا في نمو الكلى، وترتبط طفرته ارتباطًا وثيقًا بالتسبب في الإصابة بورم ويلمز، خاصةً في الأورام التي تظهر تمايزًا لحميًا. تُظهر خلايا ويلمز1 نمطاً نووياً مستقراً دون تشوهات كروموسومية كبيرة، وتتميز بنمط ظاهري متوسطي اللُّحْمَة (mesenchymal phenotype)، حيث تُظهر الفيمينتين بينما تفتقر إلى العلامات الظهارية مثل السيتوكراتين. يُظهر هذا الخط قدرة محدودة ولكن كبيرة على التمايز الوسيطة اللُّحمية بما في ذلك القدرة على التمايز إلى خلايا شبيهة بالعضلات في ظل ظروف محددة، مما يجعله نموذجاً مهماً لدراسة العواقب الجزيئية لطفرات WT1. وللتغلب على العمر الافتراضي المحدود لخلايا ويلمز1 الأولية، تم إنشاء خط خلايا imWilms1 عن طريق إدخال مستضد SV40 T الكبير ثلاثي الطفرات (U19dl89-97tsA58) في الخلايا الورمية الأصلية، مما يسهل عملية خلودها. ويسمح هذا التعديل لخلايا imWilms1 بالتكاثر إلى أجل غير مسمى مع الحفاظ على استقرار الكروموسومات، وبالتالي تقديم نموذج موثوق به للدراسات طويلة الأمد. تستمر خلايا imWilms1 غير الخالدة في إظهار نفس طفرة WT1 وتحتفظ بالخصائص الوسيطة لخط ويلمز1 الأصلي. وبالإضافة إلى خصائصه الوراثية والمظهرية، تم تحليل خط خلايا imWilms1 على نطاق واسع لمعرفة نشاط مسار إشاراته. وقد كشفت الدراسات البروتينية عن فسفرة وتفعيل العديد من مستقبلات التيروزين كيناز (RTKs)، بما في ذلك EGFR وPDGFRβ وAXL، مع تنشيط مسارات إشارات MAPK في نهاية المطاف. يؤكد التنشيط المستمر لهذه المسارات في خلايا imWilms1 على أهميتها لاستكشاف الاستراتيجيات العلاجية المستهدفة في ورم ويلمز. وبشكل عام، يُستخدم إيمويلمز1 كنموذج قوي وطويل الأمد لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء تطور ورم ويلمز وتطوره، خاصةً تلك التي تحركها طفرات WT1 ومسارات الإشارات الشاذة. |
|---|---|
| كائن حي | الإنسان |
| الأنسجة | الكلى |
| المرض | ورم ويلمز |
| المترادفات | IM-WT-1 |
الخصائص
| العمر | 10 أشهر |
|---|---|
| الجنس | أنثى |
| العرق | قوقازي |
| علم الصرف | على شكل مغزل |
| نوع الخلية | خلايا ويلمز |
| خصائص النمو | ملتزم |
البيانات التنظيمية
| اقتباس | إيمويلمز1 (كتالوج سيتيون رقم 300412) |
|---|---|
| مستوى السلامة البيولوجية | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| سيلوسوروسأكسيون | CVCL_A5SN |
| حالة الكائنات المعدلة وراثيًا | GMO-S1: يحتوي سلالة ورم ويلمز البشري imWilms1 على كاسيت SV40 T-antigen ثلاثي الطفرات الذي يتيح الخلود المشروط لأبحاث الورم الأرومي الكلوي. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى. |
البيانات الجزيئية الحيوية
| الملامح الطفرية | حالة الطفرة في WT1: متماثل الزيجوت c. 149 C>A, p.S50x، وLOTH: 11p11-11pter، وحالة الطفرة في CTNNB1: متغايرة الزيجوت TCT>TTT, p.S45F |
|---|
المناولة
| الوسط الثقافي | مجموعة MSCGM (من لونزا) |
|---|---|
| كاشف التفكك | أكوتاس |
| الاستزراع الفرعي | قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد. |
| تجديد السوائل | 1 إلى 2 مرات في الأسبوع |
| وسيط التجميد | كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد. |
| إذابة الخلايا وزراعتها |
|
| أجواء الاحتضان | 37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب. |
| طلاء القارورة | لا شيء |
| إجراء التجميد | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| شروط الشحن | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| ظروف التخزين | للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل. |
مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA
| العقم | يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي. |
|---|---|
| أليلات HLA |
A*: '03:01:01, '24:02:01
B*: '35:03:01, '38:01:01
C*: '12:03:01
DRB1*: '07:01:01, '14:54:01
DQA1*: '01:04:01, '02:01:01
DQB1*: '02:02:01, '05:03:01
DPB1*: '02:01:01:02ج، '04:02:01ج
E: '01:03:01, '01:03:02
|
شهادة التحليل (CoA)
| رقم القطعة | نوع الشهادة | التاريخ | رقم الكتالوج |
|---|---|---|---|
| 300412-221 | شهادة التحليل | 23. May. 2025 | 300412 |
| 300412-030624 | شهادة التحليل | 18. Aug. 2025 | 300412 |
اتفاقية نقل المواد
إذا كنت تنوي استخدام خطوط الخلايا Cytion حصريًا لأغراض البحث الداخلي في موقع بحثي واحد، يرجى ملء وتوقيع اتفاقية نقل المواد (MTA) الخاصة بنا وإرسالها مع طلبك.
لأي تطبيقات تجارية - بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الأعمال مقابل أجر، واختبارات مراقبة الجودة، وإطلاق المنتجات، والاستخدام التشخيصي، أو الدراسات التنظيمية - يرجى ملء نموذج الاستخدام المقصود حتى نتمكن من إعداد اتفاقية مناسبة ومصممة خصيصًا لمشروعك.
يرجى ملاحظة: تنطبق اتفاقية نقل المواد (MTA) على سلالات خلوية معينة فقط. إذا ظهر هذا الإشعار ووثيقة اتفاقية نقل المواد (MTA) على صفحة المنتج، فإن الاتفاقية تكون سارية. بالنسبة للسلالات الخلوية التي لا تشملها اتفاقية نقل المواد (MTA)، لن تظهر أي إشارة إلى الاتفاقية. اتفاقية نقل المواد (MTA) غير صالحة للعملاء في الأمريكتين أو الصين أو تايوان. يرجى الاتصال بكياننا في الولايات المتحدة للحصول على الاتفاقية المناسبة.