خلايا SVI

‏٨٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

لم تعد متوفرة

رقم المنتج: 400495

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث

الوصف	تم استنساخ خط الخلايا SVI من نواتج الكبيبات التي تم عزلها من الفئران المعدلة وراثياً H-2kb-tsA58. تحمل هذه الفئران متغيراً حساساً لدرجة الحرارة من مستضد SV40 T الكبير تحت سيطرة محفز H-2kb المحفز H-2kb المحفز لـ IFN-g. تتكاثر الخلايا عند درجة حرارة 33 درجة مئوية، وتتمايز عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. في الوقت الحاضر، تمت زراعة الخلايا بنجاح لأكثر من 40 ممرًا دون ملاحظة تغيرات في النمط الظاهري. تتشابه خلايا SVI إلى حد كبير مع خلايا E11 من حيث التشكل والتعبير عن عدة علامات. على سبيل المثال، يتم التعبير عن البودوسين و WT1 بدرجة أقل مقارنةً ب E11. التمايز: بدء عملية التمايز عن طريق وضع القارورة (القوارير) غير المملوءة في حاضنة عند درجة حرارة 38 درجة مئوية / 5٪ CO2 لمدة 14 يومًا على الأقل لإكمال التمايز. لا يلزم إضافة الإنترفيرون-جاما (INF-gamma).
كائن حي	الفأر
الأنسجة	الكلى

السلالة/النوع الفرعي	(CBA/Ca x C57BL/10) Tg(H2KbtsA58) Immort
العمر	للبالغين
الجنس	غير محدد
نوع الخلية	بودوسيت
خصائص النمو	ملتزم

اقتباس	SVI (الرقم الكتالوجي لسيتيون 400495)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	10090
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_5943
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا	GMO-S1: يحتوي هذا الخط الخلوي لخلايا البودوسيتات الفئران (SVI) على جين متحوّر SV40 كبير T-Antigen نشط مشروط كجزء من نموذج ImmortoMouse، مما يدعم الخلود الحساس لدرجة الحرارة. توجد التركيبة بشكل ثابت في الخلايا المشتقة من الخلايا البودوسيتة. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى.

التعبير البروتيني	WT1، وLmx1b، وLmx1b، وNephrin، وNepHI، وFAT، وP-cadherin، وCD2AP، وZO-I، وPodocalyxin، وPodoplanin، وSynpo، وPodocin، وTRPC6، وGAPDH.

الوسط الثقافي	RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
المكملات الغذائية	قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك	أكوتاس
الاستزراع الفرعي	قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
نسبة التقسيم	يُنصح باستخدام نسبة تتراوح بين 1:3 و1:5. وفي ظل ظروف التمايز، أي عند حضانة المزارع غير المتراصة حتى تصل إلى مرحلة التراص عند درجة حرارة 38 درجة مئوية، يتوقف تكاثر الخلايا خلال الأسبوعين الأولين، ويتوقف تمامًا بعد حوالي أربعة أسابيع
كثافة البذر	قم بتلقيح قوارير زراعة الخلايا T75 بـ 1x 10⁴ خلية/سم² (حوالي 60.000 خلية/مل، 12 مل من الوسط في قارورة T75 واحدة) من أجل عملية التكاثر. حافظ على الخلايا عند درجة حرارة 33 درجة مئوية / 5٪ ثاني _أكسيد الكربون، حتى تصل القارورة إلى حوالي 75٪ من التكاثر.
تجديد السوائل	3 مرات في الأسبوع
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	33 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
طلاء القارورة	لا شيء
إجراء التجميد	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
الملف التعريفي STR	أميلوجينينين: x،x

رقم القطعة	نوع الشهادة	التاريخ	رقم الكتالوج
400495-1221	شهادة التحليل	23. May. 2025	400495

يُرجى ملاحظة أن هذا الخط الخلوي غير متاح بموجب اتفاقية سايتون MTA القياسية، حيث يتطلب اتفاقية طرف ثالث و/أو يخضع للتفاوض مع المرخص الأصلي.

مدعوم من بايوز شاهد المزيد من التفاصيل عن بايوز

خلايا SVI

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث