خلايا ND7/23

إن وسيط التجميد CM-1 من Cytion هو وسيط حفظ بالتبريد متطور مصمم لضمان أعلى مستوى من قابلية بقاء الخلايا ووظائفها بعد ذوبان الجليد. يناسب هذا الوسيط متعدد الاستخدامات طيفاً واسعاً من أنواع الخلايا، بما في ذلك الخلايا البشرية والحيوانية على حد سواء، مما يجعله أداة أساسية للتطبيقات البحثية المتنوعة. صُمم وسيط التجميد CM-1 بمزيج متوازن بدقة من المواد الواقية بالتبريد والمغذيات الأساسية، مما يقلل من تكوين بلورات الجليد والإجهاد الخلوي أثناء عملية التجميد، وبالتالي يحافظ على سلامة الخلايا.
تشمل الميزات الرئيسية لوسط التجميد CM-1 ما يلي:

توافق واسع النطاق: فعال مع مجموعة واسعة من أنواع الخلايا، بما في ذلك الخلايا الأولية والخلايا الجذعية وخطوط الخلايا الراسخة.
قابلية عالية للحياة: مُحسَّن لتعظيم استعادة الخلايا بعد ذوبان الجليد وقابليتها للاستمرار، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
جاهز للاستخدام: مجهزة ومعقمة بشكل ملائم للاستخدام الفوري، مما يقلل من وقت التحضير وخطر التلوث.
استقرار محسّن: يحافظ على أداء ثابت في ظل ظروف الحفظ بالتبريد القياسية، مما يضمن نتائج قابلة للتكرار.
مدة صلاحية طويلة: CM-1 عبارة عن وسيط حفظ بالتبريد يحتوي على المصل وجاهز للاستخدام ويمكن تخزينه في الثلاجة لمدة تصل إلى عام واحد.


استخدام CM-1 لتجميد الخلايا

لاستخدام CM-1 لتجميد الخلايا الملتصقة والمعلقة على حد سواء، اتبع الخطوات التالية

بالنسبة للخلايا الملتصقة، اغسل الخلايا الملتصقة وفصلها عن ركيزة المزرعة. بالنسبة للخلايا المعلقة، انتقل مباشرةً إلى الخطوة التالية.
عد الخلايا للتأكد من أنها بالتركيز المناسب.
قم بالطرد المركزي للخلايا لتكويرها، ثم أعد تعليقها في وسط التجميد CM-1.
انقل الخلايا المعاد تعليقها إلى قوارير تجميد.
استخدم طريقة التجميد البطيء قبل نقل الخلايا إلى التخزين طويل الأمد





الطريقة
الوصف
الخطوات





❄️
التجميد اليدوي

طريقة خطوة بخطوة تنطوي على خفض تدريجي لدرجة الحرارة لضمان بقاء الخلايا

1️⃣ ضع الخلايا في وسط التجميد في مجمد درجة حرارته 4 درجات مئوية لمدة 40 دقيقة.
2️⃣ نقل إلى مجمد بدرجة حرارة -80 درجة مئوية لمدة 24 ساعة.
3️⃣ تخزين الخلايا في النيتروجين السائل لحفظها على المدى الطويل



❄️
استخدام السيد فروستي

جهاز مناسب يسمح بالتحكم في معدلات التجميد بدون طاقة كهربائية

1️⃣ تحضير الخلايا في قوارير التجميد بوسط التجميد.
2️⃣ وضع قوارير التجميد في حاوية السيد فروستي.
3️⃣ تخزينها في درجة حرارة -80 درجة مئوية تحت الصفر لمدة 24 ساعة قبل نقلها إلى النيتروجين السائل



❄️
المجمد ذو المعدل المتحكم فيه

مجمد عالي الدقة من شركة ثيرمو فيشر أو غيرها من الشركات المصنعة المصممة لخفض درجة الحرارة المتحكم فيها

1️⃣ برمجة الجهاز لخفض درجة الحرارة تدريجياً.
2️⃣ ضع الخلايا المحضرة في المجمد.
3️⃣ بعد دورة التجميد، انقل الخلايا إلى النيتروجين السائل









قم بتخزين القوارير المبردة في درجة حرارة أقل من -130 درجة مئوية أو في النيتروجين السائل لحفظها على المدى الطويل.


المكونات

يحتوي على FBS، DMSO، جلوكوز، أملاح
القدرة التخزينية: الأس الهيدروجيني = 7.2 إلى 7.6


يقدم وسط التجميد CM-1 من Cytion's Freeze Medium CM-1 حلاً موثوقاً للحفظ بالتبريد، مما يضمن قابلية عالية لحيوية الخلايا ووظائفها بعد ذوبان الجليد لمجموعة واسعة من التطبيقات البحثية.

DMEM (وسط النسر المعدل Dulbecco's Modified Eagle Medium) هو وسط قاعدي متعدد الاستخدامات ومستخدم على نطاق واسع مصمم لدعم نمو مجموعة متنوعة من خلايا الثدييات في الأبحاث البيولوجية. ويُستخدم كوسيط مثالي لزراعة الخلايا الليفية الأولية والخلايا العصبية والخلايا الدبقية وخلايا الخلايا الدبقية وخلايا الخلايا الجذعية المتشعبة وخلايا العضلات الملساء بالإضافة إلى خطوط الخلايا الشائعة مثل HeLa و293 وCos-7 وPC-12.
ما يميز DMEM عن الوسائط الأخرى هو تركيبته الفريدة. فهو يحتوي على زيادة مذهلة بمقدار أربعة أضعاف في تركيز الأحماض الأمينية والفيتامينات مقارنةً بوسيط النسر الأساسي الأدنى الأصلي. تم تطوير DMEM في البداية باستخدام جلوكوز منخفض (1 جم/لتر) وبيروفات الصوديوم، وكثيراً ما يستخدم DMEM بمستويات جلوكوز أعلى، إما مع أو بدون بيروفات الصوديوم. وتجدر الإشارة إلى أن DMEM لا يحتوي على بروتينات أو دهون أو عوامل نمو، مما يستلزم استخدام مكملات. ولتحقيق النمو الأمثل، يتمثل أحد الأساليب الشائعة في تكميل DMEM بمصل بقري جنيني (FBS) بنسبة 10%. بالإضافة إلى ذلك، يستخدم DMEM نظام مخزن بيكربونات الصوديوم العازل الذي يتطلب بيئة من 5-10% من ثاني أكسيد الكربون للحفاظ على درجة الحموضة الفسيولوجية.
يُعتبر وسط النسر المعدل (DMEM) من بين الوسائط المحددة لزراعة الخلايا والأنسجة، حيث يلبي احتياجات النمو لمختلف الأنماط الظاهرية للخلايا الملتصقة. وهو يتفوق على وسط النسر الأصلي، الذي تم تطويره في الخمسينيات من القرن الماضي لزراعة خلايا الدجاج، من خلال التركيبة التكميلية المحسنة المعروفة باسم تعديل ديلبيكو. ويؤدي هذا التعديل إلى رفع محتوى أحماض أمينية وفيتامينات مختارة إلى أربعة أضعاف مقارنةً بالوسط الأصلي.
في مجال زراعة الخلايا، يؤدي وسط DMEM دورًا حيويًا كوسيط نمو لأنواع مختلفة من الخلايا، بما في ذلك الخلايا الأولية والخلايا الجذعية والخلايا المتحولة. كما يستخدم الباحثون النسخة المعدلة من وسط DMEM في مجموعة واسعة من التطبيقات البحثية، مثل اكتشاف الأدوية وهندسة الأنسجة ودراسة مسارات إشارات الخلايا.

مراقبة الجودة

مصفاة معقمة ومعقمة


التخزين ومدة الصلاحية

يُحفظ في درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية، مع حمايته من الضوء.
بمجرد فتحه، يحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية ويستخدم خلال 6-8 أسابيع.


ظروف الشحن

درجة الحرارة المحيطة


الصيانة

يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجات مئوية في الظلام. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأنه يقلل من جودة المنتج.
لا تقم بتسخين الوسيط أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير منضبطة مثل أجهزة الميكروويف.
في حالة استخدام جزء فقط من الوسيط، يجب إزالة الكمية المطلوبة وتسخينه إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.


التركيب



الفئة
المكونات
التركيز (ملغم/لتر)


الأحماض الأمينية
الجلايسين
30.00



إل-أرجينين حمض الهيدروكلوريك
84.00



إل-سيستين 2 حمض الهيدروكلوريك
62.57



ل-جلوتامين
584.00



إل-هيستيدين H2OH2O
42.00



ل-إيسولوسين
105.00



ل-ليوسين
105.00



إل-ليسين حمض الهيدروكلوريك
146.00



ل-ميثيونين
30.00



ل-فينيل ألانين
66.00



ل-سيرين
42.00



ل-ثريونين
95.00



ل-تريبتوفان
16.00



ل-تيروزين 2 صوديوم 2H2O
103.79



ل-فالين
94.00


فيتامينات
كلوريد الكولين
4.00



د-بانتوثينات الكالسيوم
4.00



حمض الفوليك
4.00



ميو-إينوزيتول
7.20



نيكوتيناميد النيكوتيناميد
4.00



البيريدوكسال حمض الهيدروكلوريك
4.00



ريبوفلافين
0.40



ثيامين حمض الهيدروكلوريك
4.00


أملاح غير عضوية
CaCl2 2 H2O
265.00



Fe(NO3)3 3 9 H2O
0.10



كلوريد الكالسيوم
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



كلوريد الصوديوم
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 NaH2PO4 2H2O
141.73


مكونات أخرى
د-الجلوكوز
4500.00



ملح الصوديوم الفينول الأحمر الفينول
15.90



بيروفات الصوديوم
110.00

محلول فصل الخلايا Accutase مع EDTA والفينول الأحمر – 100 مل

Accutase هو محلول فصل الخلايا الجاهز للاستخدام والمصفى بشكل معقم، والمصمم كبديل لطيف للتريبسين/EDTA لفصل الخلايا الثديية الملتصقة عن الأواني البلاستيكية القياسية لزراعة الأنسجة والأسطح المطلية بطبقة لاصقة. وهو يجمع بين نشاط الإنزيمات البروتينية والكولاجينية في محلول ملحي متوازن لتوفير فصل فعال ومحكوم، مع الحفاظ على بروتينات سطح الخلية ودعم قابلية البقاء العالية بعد التمرير وإعادة الالتصاق السريع.

تعتمد تركيبة Accutase على محلول دولبيكو الفوسفاتي (DPBS) مع EDTA والفينول الأحمر كمؤشر بصري لدرجة الحموضة. الإنزيمات من أصل غير ثديي وغير بكتيري، مما يجعل Accutase مناسبًا بشكل خاص لأبحاث الخلايا الجذعية، وعمليات إنتاج اللقاحات، وأي تطبيق يجب فيه تقليل الملوثات المشتقة من الحيوانات أو الميكروبات إلى الحد الأدنى. يتوقف المحلول تلقائيًا عند 37 درجة مئوية، لذلك لا يلزم وجود كاشف معادل أو وسط يحتوي على مصل بعد الفصل – يمكن نقل الخلايا مباشرة إلى وسط جديد.

الميزات الرئيسية

سائل 1x جاهز للاستخدام ومصفى معقم – لا يحتاج إلى تخفيف أو إعادة تكوين
نشاط إنزيمي بروتيني وكولاجيني مدمج لفصل لطيف
تم توحيد كل دفعة وفقًا لنشاط انفصال محدد لضمان الاتساق بين الدفعات
إنزيمات غير حيوانية وغير بكتيرية المنشأ
يتم تثبيطه تلقائيًا عند 37 درجة مئوية – لا حاجة إلى محلول معادل
مركب في محلول PBS من Dulbecco مع EDTA
يحتوي على الفينول الأحمر كمؤشر بصري لدرجة الحموضة
درجة الحموضة 6.8 – 7.8


التطبيقات النموذجية
يقوم Accutase بفصل مجموعة واسعة من أنواع الخلايا الملتصقة والحساسة بلطف، بما في ذلك الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs)، والخلايا الجذعية البشرية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs)، والخلايا الجذعية العصبية، والخلايا العصبية الأولية، وخطوط الخلايا الملتصقة المزروعة بشكل روتيني مثل HeLa و HEK 293 و CHO و MDCK و Vero و NIH/3T3 و BHK-21 و A549. تشمل حالات الاستخدام النموذجية ما يلي:

الاستزراع الفرعي الروتيني وتمرير الخلايا الثديية الملتصقة
الفصل اللطيف للخلايا المفردة من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs) والخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs) والخطوط الحساسة الأخرى
تحضير العينات لتحليل التدفق الخلوي وتحليل FACS
تحليل علامات سطح الخلية حيث تهم سلامة الببتيد
اختبارات هجرة الخلايا وتكاثرها وموتها المبرمج
اختبارات السكون عن طريق حرمان المصل ودراسات نقل الجينات المسرطنة
اختبارات هجرة الخلايا السرطانية وخلايا القمة العصبية
توسيع نطاق الإنتاج في سير عمل المفاعلات الحيوية

بالنسبة للأعمال الروتينية، استخدم حوالي 10 مل من Accutase لكل 75 سم² من سطح المزرعة وقم بالتحضين لمدة 5-10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. يجب تحديد وقت التحضين الأمثل لكل خط خلوي ويجب ألا يتجاوز ساعة واحدة. قبل الإضافة، اشطف طبقة الخلايا بمحلول ملحي خالٍ من Ca2+/Mg2+ مثل DPBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم لإزالة بقايا المصل والكاتيونات ثنائية التكافؤ.

التعامل والتخزين
قم بتخزين الزجاجة غير المفتوحة مجمدة عند -15 درجة مئوية أو أقل. قم بإذابة الجليد إما في درجة حرارة الغرفة أو طوال الليل عند +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية. لا تقم بإذابة الجليد عن Accutase في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية، حيث أن درجات الحرارة المرتفعة تقلل من نشاط الإنزيم. بعد إذابة الجليد، يمكن تخزين المحلول لمدة تصل إلى شهرين عند +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية؛ لا تقم بالتخزين في درجة حرارة الغرفة. لا تقم بتسخين الكاشف مسبقًا إلى 37 درجة مئوية قبل الاستخدام – أضفه مباشرة إلى الخلايا المغسولة في درجة حرارة الغرفة. لضمان صلاحية طويلة الأمد، يوصى بتقسيم الكمية إلى أجزاء للاستخدام مرة واحدة لتجنب دورات التذويب المتكررة. اعمل دائمًا في ظروف معقمة.

الجودة
يتم تصنيعه وفقًا لمعايير جودة صارمة. يتم ترشيح كل دفعة من Accutase بشكل معقم واختبارها للتأكد من تعقيمها ودرجة الحموضة والمظهر ونشاط التفكك لضمان أداء متسق وقابل للتكرار من دفعة إلى أخرى.

مواصفات المنتج



المواصفات
التفاصيل



نوع المنتجكاشف انفصال الخلايا / التفكك
الشكلسائل معقم ومصفى، جاهز للاستخدام
الحجم100 مل
تركيز العمل1x (جاهز للاستخدام)
نشاط الإنزيمبروتينات وكولاجين
أصل الإنزيمغير ثديي وغير بكتيري
نظام المخزن المؤقتPBS دولبيكو مع EDTA
مؤشر الأس الهيدروجينيأحمر الفينول
نطاق الرقم الهيدروجيني6.8 – 7.8
المظهرمحلول شفاف، لونه أحمر باهت إلى برتقالي
درجة حرارة التخزين-15 درجة مئوية أو أقل
الاستقرار بعد الذوبانحتى شهرين عند درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجة مئوية
حجم الاستخدام الموصى به~10 مل لكل 75 سم² من سطح المزرعة
وقت الحضانة المعتاد5 – 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة
شروط الشحنمجمد على ثلج جاف
الاستخدام المقصودللاستخدام في الأبحاث والتصنيع فقط



التركيبة (التركيب لكل لتر)



المكون
التركيز (ملغم/لتر)




أملاح غير عضوية

كلوريد الصوديوم (NaCl)8000.00
فوسفات الهيدروجين ثنائي الصوديوم (Na2HPO4)1150.00
كلوريد البوتاسيوم (KCl)200.00
ثنائي هيدروجين فوسفات البوتاسيوم (KH2PO4)200.00

مكونات أخرى

EDTA · 4Na (EDTA رباعي الصوديوم)220.00
الفينول الأحمر3.00
مزيج إنزيمي خاص (نشاط بروتيني وكولاجيني)1x



Accutase هي علامة تجارية مسجلة لشركة Innovative Cell Technologies, Inc.

نظرة عامة على المنتج
الحجم: 100 مل التخزين: ≤-15 درجة مئوية التعقيم: مصفى معقم
محلول مضاد حيوي/محلول مضاد للفطريات (100x) هو محلول معقم وجاهز للاستخدام مصمم لتقليل مخاطر التلوث الميكروبي في زراعة الخلايا والتطبيقات المعملية ذات الصلة. يحتوي هذا المحلول 100x على تركيبة راسخة من البنسلين والستربتومايسين والأمفوتريسين ب
- مما يوفر نشاطًا مضادًا للميكروبات واسع الطيف ضد البكتيريا موجبة الجرام وسالبة الجرام والخمائر والفطريات الخيطية. هذه التركيبة مناسبة للاستخدام في مزارع الخلايا حقيقية النواة والوسائط البكتيرية والأنظمة الأخرى الحساسة للتلوث، مما يدعم العمليات المختبرية النظيفة والمتسقة.
التطبيق والفوائد تم تحسين هذا المحلول لبروتوكولات البحث الروتينية، ويستخدم هذا المحلول على نطاق واسع للحفاظ على ظروف معقمة في سير عمل مزارع الخلايا. يوفر أداءً موثوقًا في البيئات الحساسة للتلوث، مما يساعد الباحثين على تقليل مخاطر فرط النمو الميكروبي دون المساس بصحة الخلايا أو قابلية التكرار التجريبي. تلغي التركيبة المعقمة المفلترة الحاجة إلى خطوات إذابة إضافية، مما يدعم إعداد الوسائط بشكل مبسط ويقلل من التباين في الإجراءات المعملية اليومية.
الاستخدام والتوافق لتحقيق تركيزات عمل قياسية، قم بتخفيف المحلول بنسبة 1:100 في وسط الزرع الكامل. المنتج متوافق مع مجموعة كبيرة من خطوط خلايا الثدييات والوسائط القاعدية. مع توافر مخزون ثابت، يستفيد الباحثون من استمرارية التوريد التي يمكن الاعتماد عليها والتخطيط اللوجستي المبسط. يجب تخزين المحلول في درجة حرارة ≤ -15 درجة مئوية وحمايته من دورات التجميد والذوبان المتكررة للحفاظ على ثباته. للاستخدام البحثي فقط. ليس للاستخدام في الإجراءات التشخيصية أو العلاجية. ليس للاستخدام في البشر أو الحيوانات.

محلول المحلول الملحي المخزن بالفوسفات (PBS)
يُعد المحلول الملحي المخفوق بالفوسفات (PBS) محلولاً عازلاً يستخدم على نطاق واسع في الأبحاث البيولوجية والكيميائية. وهو يلعب دورًا حاسمًا في الحفاظ على توازن الأس الهيدروجيني والأسمولية أثناء الإجراءات التجريبية المختلفة، بما في ذلك معالجة الأنسجة وزراعة الخلايا. تتم صياغة محلول PBS الخاص بنا بدقة بمكونات عالية النقاء لضمان الاستقرار والموثوقية في كل تجربة. تحاكي الأسمولية وتركيزات الأيونات في محلول PBS الخاص بنا عن كثب تلك الموجودة في جسم الإنسان، مما يجعله متساوي التوتر وغير سام لمعظم الخلايا.

تركيب محلول PBS الخاص بنا
إن محلول PBS الخاص بنا عبارة عن مزيج معدّل الأس الهيدروجيني من مخازن فوسفاتية فائقة النقاء ومحاليل ملحية. بتركيز عمل 1X، يحتوي على:

8000 مجم/لتر كلوريد الصوديوم (NaCl)
200 مجم/لتر كلوريد البوتاسيوم (KCl)
1150 ملغم/لتر فوسفات الصوديوم ثنائي الفوسفات اللامائي (Na2HPO4)
200 ملغم/لتر فوسفات البوتاسيوم أحادي القاعدية اللامائية (KH2PO4)

يضمن هذا التركيب درجة حموضة مثالية وتوازن أيوني مثالي، ومناسب لمجموعة واسعة من التطبيقات البيولوجية.

تطبيقات محلول PBS الخاص بنا
يُعد محلول PBS الخاص بنا مثاليًا لمختلف التطبيقات في الأبحاث البيولوجية. خصائصه متساوية التوتر وغير السامة تجعله مناسبًا لتخفيف المواد وشطف حاويات الخلايا. تُعد محاليل PBS التي تحتوي على EDTA فعالة لفك ارتباط الخلايا الملتصقة والمتكتلة. ومع ذلك، لا ينبغي إضافة المعادن ثنائية التكافؤ مثل الزنك إلى PBS، حيث يمكن أن يتسبب ذلك في الترسيب. في مثل هذه الحالات، يوصى باستخدام مخازن Good's Buffers. بالإضافة إلى ذلك، يعد محلول PBS الخاص بنا بديلاً مقبولاً لوسط النقل الفيروسي لنقل وتخزين فيروسات الحمض النووي الريبي (RNA)، بما في ذلك فيروس SARS-CoV-2.

مراقبة الجودة

معقمة ومفلترة


التخزين ومدة الصلاحية

يُحفظ في درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +25 درجة مئوية، مع حمايته من الضوء.
بمجرد فتحه، يُخزن في درجة حرارة تتراوح بين درجتين مئويتين و25 درجة مئوية ويُستخدم خلال 24 شهراً.


ظروف الشحن

درجة الحرارة المحيطة


الصيانة

يُحفظ في الثلاجة في درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجات مئوية في الظلام. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، حيث يقلل من جودة المنتج.
لا تقم بتسخين الوسيط أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير منضبطة مثل أجهزة الميكروويف.
في حالة استخدام جزء فقط من الوسيط، يجب إزالة الكمية المطلوبة وتسخينه إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.

التركيب



الفئة
المكونات
التركيز (ملغم/لتر)


الأملاح
كلوريد البوتاسيوم
200



فوسفات البوتاسيوم أحادي القاعدي اللامائي
200



كلوريد الصوديوم
8000



فوسفات الصوديوم ثنائي فوسفات الصوديوم اللامائي
1150