خلايا MML-1

‏٨٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 300288

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

اتفاقية نقل المواد

الوصف	خط الخلايا MML-1 هو خط خلايا الورم الميلانيني المشتق من الورم الميلانيني الخبيث. ويُستخدم هذا الخط الخلوي في المقام الأول لدراسة بيولوجيا الورم الميلانيني وخاصةً دور الحويصلات خارج الخلية في التواصل بين الخلايا وتطور الورم. تُطلق خلايا MML-1 أنواعًا فرعية مختلفة من المركبات الخارجية، بما في ذلك الجسيمات الخارجية والحويصلات الدقيقة والأجسام المبرمجة، وكل منها يحمل حمض نووي ريبوزي متميز، مثل الحمض النووي الريبوزي الميكروي (miRNAs) وغيره من الحمض النووي الريبوزي غير المشفر. وقد أثبتت الدراسات التي أجريت باستخدام خلايا MML-1 أن الجسيمات الخارجية المنبعثة من هذه الخلايا تحتوي على حمض نووي رنا ريبوزي معين مثل miRNAs مثل miR-214-3p و miR-199a-3p و miR-155-5p، والتي ترتبط ارتباطًا وثيقًا بتطور الورم الميلانيني وانتشاره. يتم إثراء هذه miRNAs في الجسيمات الخارجية مقارنةً بأنواع أخرى من المركبات الخارجية وقد تم ربطها بمسارات مهمة مرتبطة بالورم الميلانيني مثل تنظيم مسار إشارات MAPK وتفاعلات البيئة الدقيقة للورم. ومن المثير للاهتمام أن المقارنات بين ملفات تعريف الحمض النووي الريبوزي المرسال من الجسيمات الخارجية المشتقة من MML-1 مع العينات السريرية للورم الميلانيني تظهر تداخلًا كبيرًا، مما يشير إلى الأهمية السريرية لهذا النموذج الخلوي في فهم تطور الورم الميلانيني. وبالإضافة إلى الحمض النووي الريبوزي النووي (miRNAs)، تطلق خلايا MML-1 أيضًا حمض نووي ريبوزي آخر غير مشفر مثل الحمض النووي الريبوزي النووي الصغير (snoRNAs) والحمض النووي الريبوزي الناقل المرتبط بالميتوكوندريا (mt-RNAs)، والتي تتوزع بشكل متباين بين الأنواع الفرعية للميلانينوما الخارجية. وتسلط هذه النتائج الضوء على فائدة خط الخلايا MML-1 في دراسة الآليات الجزيئية للورم الميلانيني وخاصة كيفية تواصل الخلايا السرطانية عبر المركبات الإلكترونية الخارجية وتأثيرها على بيئتها الدقيقة.
كائن حي	الإنسان
الأنسجة	البشرة
المرض	الورم الميلانيني
المترادفات	MML1

العمر	غير محدد
الجنس	غير محدد
علم الصرف	شبيه بالظهارة
خصائص النمو	ملتزم

اقتباس	MML-1 (كتالوج سيتيون رقم 300288)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	9606
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_6004

التعبير البروتيني	P53 إيجابي
الورم المولد للأورام	نعم، في الفئران العارية
إنزيم النسخ العكسي	سلبي
الملامح الطفرية	تم تحديد طفرة V600E من نوع V600E BRAF بالطرق القائمة على الحمض النووي (التسلسل، والتفاعل البوليمتري التكراري التسلسلي (RT-PCR) والطرق القائمة على البروتين (لطخة ويسترن بلوت).

الوسط الثقافي	RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
المكملات الغذائية	قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك	أكوتاس
الاستزراع الفرعي	قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر	1 × 10⁴ ^خلية/^سم2
تجديد السوائل	2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد	بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 10⁴ خلية/^سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
طلاء القارورة	لا شيء
إجراء التجميد	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

إذا كنت تنوي استخدام خطوط الخلايا Cytion حصريًا لأغراض البحث الداخلي في موقع بحثي واحد، يرجى ملء وتوقيع اتفاقية نقل المواد (MTA) الخاصة بنا وإرسالها مع طلبك.

لأي تطبيقات تجارية - بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الأعمال مقابل أجر، واختبارات مراقبة الجودة، وإطلاق المنتجات، والاستخدام التشخيصي، أو الدراسات التنظيمية - يرجى ملء نموذج الاستخدام المقصود حتى نتمكن من إعداد اتفاقية مناسبة ومصممة خصيصًا لمشروعك.

يرجى ملاحظة: تنطبق اتفاقية نقل المواد (MTA) على سلالات خلوية معينة فقط. إذا ظهر هذا الإشعار ووثيقة اتفاقية نقل المواد (MTA) على صفحة المنتج، فإن الاتفاقية تكون سارية. بالنسبة للسلالات الخلوية التي لا تشملها اتفاقية نقل المواد (MTA)، لن تظهر أي إشارة إلى الاتفاقية. اتفاقية نقل المواد (MTA) غير صالحة للعملاء في الأمريكتين أو الصين أو تايوان. يرجى الاتصال بكياننا في الولايات المتحدة للحصول على الاتفاقية المناسبة.

مدعوم من بايوز شاهد المزيد من التفاصيل عن بايوز

خلايا MML-1

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

اتفاقية نقل المواد