خلايا Hep-56.1D-56.1D
٨٠٠٫٠٠ €*
يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 6 خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 106 خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).
معلومات عامة
| الوصف | تم اشتقاق سلالة خلايا الورم الكبدي Hep-56.1D من ورم كبدي لدى الفأر، وتحديداً من سلالة الفأر C57BL/6J. ويتميز هذا الخط الخلوي بطفرة ملحوظة في الجين p53، والتي تم تحديدها في ممرات مختلفة أثناء التكاثر في المختبر. على وجه التحديد، يُظهر Hep-56.1D تحولاً من C:G إلى G:C في الكودون 132 من الإكسون 5، مما يؤدي إلى تغيير الحمض الأميني من السيستين إلى التربتوفان. تم الكشف عن هذه الطفرة في الممر رقم 17، مما يشير إلى وجود ميزة نمو انتقائية تمنحها الطفرة، مما يؤدي إلى هيمنتها في مجموعة الخلايا. يُظهر خط خلايا Hep-56.1D مورفولوجيا طلائية في الغالب، مما يعكس أصلها الكبدي. ويتسق هذا مع ملف بروتين الخيوط الوسيطة الذي يتضمن الكيراتين البسيط K8 و K18، بالإضافة إلى الفيميتين والكيراتين K19 بدرجات متفاوتة. يؤكد وجود هذه البروتينات الطبيعة الكبدية لخط الخلية وتصنيفه كخط ورم كبدي. لم يكشف التحليل الإضافي ل Hep-56.1D باستخدام بصمات الحمض النووي عن أي تشوهات هيكلية كبيرة، على الرغم من ملاحظة بعض التغيرات في الكثافة النسبية لنطاقات محددة مع زيادة أعداد الممرات. يشير هذا إلى الاستقرار الجيني مع وجود درجة من التباين على مدى فترات الاستنبات الممتدة. يؤسس تحليل طفرة p53 وأنماط التعبير البروتيني للخيوط الوسيطة معًا Hep-56.1D كنموذج قيّم لدراسة سرطان الخلايا الكبدية ودور طفرات p53 في نشأة أورام الكبد. |
|---|---|
| كائن حي | الفأر |
| الأنسجة | الكبد |
| المرض | سرطان الخلايا الكبدية |
| المترادفات | HEP-56.1D، 56.1D، 56.1D، 56.1D |
الخصائص
| السلالة/النوع الفرعي | C57BL/6J |
|---|---|
| العمر | للبالغين |
| الجنس | أنثى |
| علم الصرف | شبيه بالظهارة |
| خصائص النمو | ملتزم |
البيانات التنظيمية
| اقتباس | Hep-56.1D (كتالوج سيتيون رقم 400204) |
|---|---|
| مستوى السلامة البيولوجية | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| سيلوسوروسأكسيون | CVCL_5769 |
البيانات الجزيئية الحيوية
| التعبير البروتيني | كيراتين 8، كيراتين 18، فيمنتين. |
|---|---|
| الورم المولد للأورام | نعم، في فئران C57BL/6J. في الأسبوع الثالث، تتطور الأورام التي يبلغ قطرها حوالي 5-6 مم. |
| حالة الصبغة الصبغية | أنيوبلويد |
| الملامح الطفرية | P53mut، تحوّل C:G -+ G:C عند الكودون 132 من إكسون الفأر p53 5، والذي يتوافق مع تغيير الحمض الأميني من السيستين إلى التربتوفان. |
المناولة
| الوسط الثقافي | DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون) |
|---|---|
| المكملات الغذائية | قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS |
| كاشف التفكك | أكوتاس |
| مضاعفة الوقت | من 25 إلى 30 ساعة |
| الاستزراع الفرعي | قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد. |
| كثافة البذر | 1 إلى 2 × 104 خلية/سم2 خلال الثقافة الروتينية |
| تجديد السوائل | كل 3 إلى 4 أيام |
| التعافي بعد ذوبان الجليد | تعافت >90% من الخلايا من عملية التجميد خلال 24 إلى 48 ساعة |
| وسيط التجميد | كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد. |
| إذابة الخلايا وزراعتها |
|
| أجواء الاحتضان | 37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب. |
| طلاء القارورة | لا شيء |
| إجراء التجميد | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| شروط الشحن | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| ظروف التخزين | للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل. |
مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA
| العقم | يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي. |
|---|
شهادة التحليل (CoA)
| رقم القطعة | نوع الشهادة | التاريخ | رقم الكتالوج |
|---|---|---|---|
| 400204-821 | شهادة التحليل | 23. May. 2025 | 400204 |
اتفاقية نقل المواد
إذا كنت تنوي استخدام خطوط الخلايا Cytion حصريًا لأغراض البحث الداخلي في موقع بحثي واحد، يرجى ملء وتوقيع اتفاقية نقل المواد (MTA) الخاصة بنا وإرسالها مع طلبك.
لأي تطبيقات تجارية - بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الأعمال مقابل أجر، واختبارات مراقبة الجودة، وإطلاق المنتجات، والاستخدام التشخيصي، أو الدراسات التنظيمية - يرجى ملء نموذج الاستخدام المقصود حتى نتمكن من إعداد اتفاقية مناسبة ومصممة خصيصًا لمشروعك.
يرجى ملاحظة: تنطبق اتفاقية نقل المواد (MTA) على سلالات خلوية معينة فقط. إذا ظهر هذا الإشعار ووثيقة اتفاقية نقل المواد (MTA) على صفحة المنتج، فإن الاتفاقية تكون سارية. بالنسبة للسلالات الخلوية التي لا تشملها اتفاقية نقل المواد (MTA)، لن تظهر أي إشارة إلى الاتفاقية. اتفاقية نقل المواد (MTA) غير صالحة للعملاء في الأمريكتين أو الصين أو تايوان. يرجى الاتصال بكياننا في الولايات المتحدة للحصول على الاتفاقية المناسبة.