خلايا HK-CRISPR-mEGFP-Nup153

‏٨٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 300656

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث

الوصف	إن خط الخلايا HK-CRISPR-mEGFP-Nup153 هو نموذج خلية بشرية تم تصميمه هندسيًا لدراسة ديناميكيات مجمع المسام النووية (NPC). وباستخدام CRISPR-Cas9، يدمج هذا الخط الخلوي علامة البروتين الفلوري الأخضر المعزز أحادي اللون (mEGFP) في جين Nup153، وهو مكون أساسي في NPC. يسمح ذلك بتصور سلوك NPC في الوقت الحقيقي لسلوك NPC في الخلايا الحية. ويُعد هذا الخط الخلوي مفيداً لدراسة تجميع NPC وتفكيكه ودوره في نقل البلازما النووية وتصدير الحمض النووي الريبي المرسال وسلامة الغلاف النووي. يضمن التحرير الدقيق للجينوم باستخدام تقنية CRISPR نتائج موثوقة، مما يجعل هذا الخط الخلوي ذا قيمة لفهم وظائف الخلايا النخاعية متوسطة الخلايا في كل من الحالات الطبيعية والمرضية.
كائن حي	الإنسان
الأنسجة	باطن عنق الرحم
المرض	السرطان الغدي

العمر	30 سنة
الجنس	أنثى
العرق	أمريكي من أصل أفريقي
علم الصرف	خلايا تشبه الخلايا الظهارية ذات الشكل الحجري الفسيفسائي
خصائص النمو	ملتزم

اقتباس	HK-CRISPR-mEGFP-Nup153 (كتالوج سيتيون رقم 300656)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	9606
المودع	مختبر إلينبرغ (EMBL)
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا	GMO-S1: يحتوي خط HeLa Kyoto هذا على اندماج mEGFP مُعدّل وراثيًا باستخدام تقنية CRISPR في موضع Nup153 لتصوير المسام النووية المعقدة. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى.

التعبير البروتيني	Nup153، mEGFP-tag

الوسط الثقافي	DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
المكملات الغذائية	قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك	أكوتاس
الاستزراع الفرعي	قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
طلاء القارورة	للحصول على التعلق الأمثل والصلاحية المثلى بعد الذوبان، نوصي باستخدام قوارير أو أطباق مغطاة بالكولاجين.
إجراء التجميد	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

رقم القطعة	نوع الشهادة	التاريخ	رقم الكتالوج
300656-130524	شهادة التحليل	23. May. 2025	300656

يُرجى ملاحظة أن هذا الخط الخلوي غير متاح بموجب اتفاقية سايتون MTA القياسية، حيث يتطلب اتفاقية طرف ثالث و/أو يخضع للتفاوض مع المرخص الأصلي.

خلايا HK-CRISPR-mEGFP-Nup153

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث