خلايا HK-CRISPR-CAP-H2-mEGFP
٨٠٠٫٠٠ €*
يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 6 خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 106 خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).
معلومات عامة
| الوصف | إن خط خلايا HK-CRISPR-CAP-H2-mEGFP هو نموذج خلية هيلا كيوتو تم تطويره باستخدام تقنية CRISPR-Cas9. يدمج هذا الخط الخلوي mEGFP (البروتين المتوهج الأخضر المحسّن أحادي اللون) في جين CAP-H2، وهو جزء من مركب كوندنسين الثاني الذي يشارك في فصل الكروموسومات وتكثيفها أثناء الانقسام الفتيلي. وتسمح علامة mEGFP للباحثين بتتبع ديناميكيات كوندنسين 2 بصرياً أثناء انقسام الخلية. هذا الخط الخلوي مفيد لدراسة العمليات الانقسامية وبنية الكروموسوم وتنظيم الجينات. تتيح علامة mEGFP تصوير الخلايا الحية ومراقبة وظيفة بروتين CAP-H2 في الوقت الحقيقي. ويساعد هذا النموذج في دراسة الآليات الجزيئية لتطور دورة الخلية وسلامة الكروموسومات، مما يساعد في فهم الاضطرابات الوراثية وتطوير استراتيجيات علاجية. |
|---|---|
| كائن حي | الإنسان |
| الأنسجة | باطن عنق الرحم |
| المرض | السرطان الغدي |
| المترادفات | HK-CRISPR-CAP-H2-mEGFP #67, HK CRISPR CAP-H2-mEGFP |
الخصائص
| العمر | 30 سنة |
|---|---|
| الجنس | أنثى |
| العرق | أمريكي من أصل أفريقي |
| علم الصرف | خلايا تشبه الخلايا الظهارية ذات الشكل الحجري الفسيفسائي |
| خصائص النمو | ملتزم |
البيانات التنظيمية
| اقتباس | HK-CRISPR-CAP-H2-mEGFP (كتالوج سيتيون رقم 301569) |
|---|---|
| مستوى السلامة البيولوجية | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| سيلوسوروسأكسيون | CVCL_UR45 |
| المودع | مختبر إلينبرغ (EMBL) |
| حالة الكائنات المعدلة وراثيًا | GMO-S1: يحتوي خط HeLa Kyoto هذا على علامة mEGFP مدمجة بتقنية CRISPR في موضع CAP-H2 لدعم تحليل بنية الكروموسوم. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى. |
البيانات الجزيئية الحيوية
| المنتجات | EGFP (بروتين الفلورسنت الأخضر المحسن) |
|---|
المناولة
| الوسط الثقافي | DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون) |
|---|---|
| المكملات الغذائية | قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS |
| كاشف التفكك | أكوتاس |
| الاستزراع الفرعي | قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد. |
| تجديد السوائل | 2 إلى 3 مرات في الأسبوع |
| وسيط التجميد | كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد. |
| إذابة الخلايا وزراعتها |
|
| أجواء الاحتضان | 37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب. |
| طلاء القارورة | لا شيء |
| إجراء التجميد | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| شروط الشحن | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| ظروف التخزين | للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل. |
مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA
| العقم | يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي. |
|---|