خلايا E11

‏٨٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

لم تعد متوفرة

رقم المنتج: 400494

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث

الوصف	خط الخلايا E11 هو خط خلايا الفئران عالي التخصص الذي تم تطويره لإجراء دراسات متقدمة في وظيفة الخلايا الكبيبية وآليات أمراض الكلى. تعمل خلايا E11، المشتقة من كبيبات الفئران المعدلة وراثياً والمعدلة وراثياً للتعبير عن متغير حساس لدرجة الحرارة من مستضد SV40 الكبير، تحت تنظيم محفز H-2kb المحرض على إنزيم H-2kb. ويسهل هذا الإطار الوراثي الفريد من نوعه تكاثر الخلايا المشروط، الذي يعتمد على درجة الحرارة البيئية، وهو ما يتماشى مع التعبير المتحكم به لمستضد T. تتمثل إحدى السمات المميزة لخط الخلايا E11 في ثبات النمط الظاهري عبر الترحيل المكثف. وقد أثبتت خلايا E11، التي تحافظ على ثبات تعبيرها وخصائصها الخلوية عبر أكثر من 40 ممرًا، أنها لا تقدر بثمن للدراسات طويلة الأمد دون أن تواجه مشكلة شائعة تتمثل في انحراف النمط الظاهري الذي يظهر في العديد من خطوط الخلايا المستزرعة. ويعزز هذا الثبات من استخدامها في التجارب البيولوجية المتكررة والممتدة التي تتطلب سلوكًا خلويًا متسقًا. فيما يتعلق بالتعبير البروتيني، يُظهر خط خلايا E11 مظهرًا قويًا لا غنى عنه للدراسات الخاصة بالخلايا البودوسيتية. تعبر الخلايا باستمرار عن النيفرين، وهو عنصر أساسي في بنية الحجاب الحاجز الشقي في الخلايا البودوسية، إلى جانب مجموعة متنوعة من البروتينات الأخرى الخاصة بالخلايا البودوسية، مثل البودوسين وCD2AP وSynaptopodin. يسهّل هذا التعبير البروتيني الشامل دراسة بيولوجيا البودوسيتات في بيئة مخبرية خاضعة للتحكم في بيئة مخبرية تحاكي عن كثب الظروف في الجسم الحي. وتؤكد قدرة خلايا E11 على تشكيل اتصالات واسعة النطاق بين الخلايا الخلوية على ملاءمتها لنمذجة وظائف حاجز الترشيح الكلوي.
كائن حي	الفأر
الأنسجة	الكلى

السلالة/النوع الفرعي	(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
العمر	للبالغين
الجنس	غير محدد
نوع الخلية	بودوسيت
خصائص النمو	ملتزم

اقتباس	E11 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 400494)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	10090
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_5737
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا	الكائنات المعدلة وراثياً- S1: يحتوي هذا الخط من الخلايا البودوسيتة للفأر من نوع إيمورتو على تركيبة مستضد SV40 T الحساسة لدرجات الحرارة التي تتيح الخلود المشروط. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى.

التعبير البروتيني	WT1، وLmx1b، وLmx1b، وNephrin، وNepHI، وFAT، وP-cadherin، وCD2AP، وZO-I، وPodocalyxin، وPodoplanin، وSynpo، وPodocin، وTRPC6، وGAPDH.

الوسط الثقافي	RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
المكملات الغذائية	قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك	أكوتاس
الاستزراع الفرعي	قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر	قم بتلقيح قوارير زراعة الخلايا T75 بـ 1x 10⁴ خلية/سم² لعملية التكاثر. حافظ على الخلايا عند درجة حرارة 33 درجة مئوية / 5٪ ثاني _أكسيد الكرب_ون، حتى تصل القارورة إلى حوالي 75٪ من التكاثر.
تجديد السوائل	2 إلى 3 مرات في الأسبوع
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	33 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
طلاء القارورة	لا شيء
إجراء التجميد	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

رقم القطعة	نوع الشهادة	التاريخ	رقم الكتالوج
400494-1014SF	شهادة التحليل	23. May. 2025	400494

يُرجى ملاحظة أن هذا الخط الخلوي غير متاح بموجب اتفاقية سايتون MTA القياسية، حيث يتطلب اتفاقية طرف ثالث و/أو يخضع للتفاوض مع المرخص الأصلي.

مدعوم من بايوز شاهد المزيد من التفاصيل عن بايوز

خلايا E11

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث