خلايا CHO-IL2RA

‏١٬٩٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 305980

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

اتفاقية الطرف الثالث

الوصف	إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة لخطوط الخلايا مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الربحيين. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فيبلغ السعر حوالي 6,250 يورو. إذا كنت تمثل كيانًا تجاريًّا أو لم تكن متأكدًا من الفئة التي تنطبق عليك، يرجى الاتصال بنا. خلايا CHO-IL2RA هي خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) المُعاد تجميعها، والتي تم هندستها للتعبير بشكل مستقر عن مستقبلات الإنترلوكين-2 ألفا البشرية (IL-2Rα؛ CD25/IL2RA)، وهي وحدة فرعية لمستقبلات السيتوكين عالية الارتباط تشارك في تنظيم تنشيط الخلايا التائية والتوازن المناعي. يشكل CD25 جزءًا من مركب مستقبلات IL-2 الثلاثي مع IL-2Rβ (CD122) وسلسلة جاما المشتركة (CD132)، مما يتيح ارتباطًا عالي الترابط لإنترلوكين-2 وتفعيل مسارات إشارات JAK/STAT النهائية. من الناحية الفسيولوجية، يتم التعبير عن CD25 بدرجة عالية على الخلايا الليمفاوية التائية المنشطة والخلايا التائية التنظيمية (Tregs)، كما تم الإبلاغ عن تعبير شاذ في العديد من الأورام الخبيثة الدموية والاضطرابات الالتهابية. تُستخدم خلايا CHO-IL2RA على نطاق واسع في سير عمل علم المناعة وتطوير العلاجات لتوصيف الأجسام المضادة أحادية النسيلة المضادة لـ CD25، والعلاجات القائمة على السيتوكينات، والأجسام المضادة ثنائية النوعية، واستراتيجيات استهداف الخلايا المناعية المعدلة وراثيًا. يتيح نظام التعبير المؤتلف المستقر التقييم الكمي لارتباط الليجند، وشغل المستقبلات، وتقارب الأجسام المضادة، واستيعاب المستقبلات. تعد هذه الخلايا أيضًا ذات قيمة لتطوير اختبارات قياس التدفق الخلوي، واختبارات الفعالية، واختبارات الارتباط القائمة على الخلايا، وتطبيقات الفرز عالية الإنتاجية التي تنطوي على تعديل مسار IL-2. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن تدعم نماذج CHO-IL2RA الدراسات التي تبحث في الاستهداف الانتقائي للخلايا التائية المنشطة أو الآليات المرتبطة بالخلايا التائية التنظيمية في المناعة الذاتية، وزراعة الأعضاء، والعلاج المناعي للسرطان.
كائن حي	الهامستر الصيني
الأنسجة	المبيض
المرض	مبيض الهامستر الصيني، غير ورمي؛ مُعدَّل وراثيًّا للتعبير السطحي عن مستقبلات IL2RA (CD25)
التطبيقات	فحص الأجسام المضادة؛ تطوير العلاج الموجه لـ IL2RA؛ أبحاث بيولوجيا الخلايا التائية؛ أبحاث أمراض المناعة الذاتية؛ قياس الخلايا بالتدفق

العمر	للبالغين
الجنس	أنثى
علم الصرف	شبيه بالظهارة
نوع الخلية	الخلايا الظهارية
خصائص النمو	الالتصاق/التعليق

اقتباس	CHO-Il2RA (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305980)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	10029
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_A8W8
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا	GMO-S1: يحتوي خط الخلايا CHO هذا على كاسيت تعبير عن مستقبل IL2RA يدعم تحليلات وظائف المستقبلات. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى.

المستضدات السطحية	IL2RA (CD25)

الوسط الثقافي	للمزارع الملتصقة: DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a) للمزارع المعلقة وسط نمو CHO A (من InSCREENeX؛ رقم كتالوج InSCREENeX INS-ME-1039)
المكملات الغذائية	للمزارع الملتصقة: إضافة 5٪ FBS إلى الوسط. أضف الجينيتين (G418-Sulfat) للحصول على تركيز نهائي قدره 0.5 مجم/مللتر.
كاشف التفكك	للمزارع الملتصقة: التربسين-إدتا
مضاعفة الوقت	حوالي 14-16 ساعة
الاستزراع الفرعي	لمزرعة الخلايا الملتصقة الروتينية: اشفط وسط المزرعة القديم من الخلايا الملتصقة، واغسلها بمحلول PBS لإزالة أي وسط متبقي. بعد شفط PBS، أضف الكمية المناسبة من محلول التربسين/EDTA بناءً على حجم وعاء المزرعة (على سبيل المثال، 1 مل لقارورة T25، و3 مل لقارورة T75) واحتضانها في درجة حرارة الغرفة أو 37 درجة مئوية لمدة 5-10 دقائق، أو حتى تنفصل الخلايا. راقب الانفصال تحت المجهر، واضغط برفق على الوعاء إذا لزم الأمر لتحرير الخلايا. بمجرد الانفصال، أضف وسطاً كاملاً لتعطيل التريبسين/إيدتا، وأعد ترسيب الخلايا برفق وانقل كمية قليلة من معلق الخلايا إلى وعاء مزرعة جديد يحتوي على وسط جديد. ضع الوعاء في حاضنة مضبوطة على 37 درجة مئوية مع 5% من _ثاني أكسيد الكربون، وقم بتغيير الوسط كل 2-3 أيام.
نسبة التقسيم	من 1 إلى 5
كثافة البذر	2 إلى 5 × 10⁴ ^خلية/^سم2
تجديد السوائل	2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد	بعد الذوبان، قم بتقسيم الخلايا بنسبة 1:2 إلى 1:3 في قوارير T25 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق (للمزارع الملتصقة) لمدة 24 ساعة على الأقل.
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

يُرجى ملاحظة أن هذا الخط الخلوي غير متاح بموجب اتفاقية سايتون MTA القياسية، حيث يتطلب اتفاقية طرف ثالث و/أو يخضع للتفاوض مع المرخص الأصلي.

خلايا CHO-IL2RA

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

اتفاقية الطرف الثالث