HT22 细胞系
HT22是神经科学研究中常用的鼠神经元细胞系。它对研究神经退行性疾病和测试潜在的神经保护疗法或治疗方法很有价值。此外，HT22 细胞对谷氨酸敏感，因此可用于研究谷氨酸诱导的毒性或神经元损伤。
本文重点介绍了 HT22 细胞的重要方面，希望对您的研究工作有所帮助。它将主要讨论
1.HT22 细胞的一般属性和起源
本节将介绍HT22细胞的起源和一般特征。在开始对细胞系进行研究之前，了解这些信息很有必要。在此，您将了解到什么是 HT22 细胞？HT22 海马细胞的形态是什么？HT22 细胞的大小是多少？
HT22 是源自小鼠大脑海马区的连续细胞系。它是亲代HT-4细胞系的亚克隆，是通过温度敏感的多瘤病毒模拟病毒40（SV40）T抗原对小鼠神经元组织进行永生化而形成的。
这些细胞与成熟的海马细胞不同，它们缺乏谷氨酸和胆碱能受体，就像海马起源的成熟神经元一样。因此，它们不适合进行与记忆相关的研究[1]。
HT22 细胞具有上皮细胞样外观。
2.HT22 细胞系培养信息
HT22 细胞用于神经科学研究实验室。在培养这些细胞之前，研究人员需要了解必要的细胞培养信息，以便轻松高效地开展工作。本节涵盖培养 HT22 细胞的所有要点。您将了解什么是 HT22 细胞的倍增时间？如何培养 HT22 细胞？HT22 细胞培养方案是什么？什么是 HT22 细胞培养基？
培养 HT22 细胞的要点
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倍增时间： |
HT22 细胞的倍增时间约为 15 小时。 |
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粘附或悬浮： |
HT22 细胞是粘附的。 |
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亚培养比： |
HT22 海马细胞的亚培养比例为 1:3 至 1:6。简而言之，去除培养基，用 1 x PBS 冲洗粘附的细胞。向烧瓶中加入 Accutase 溶解液，然后在环境温度下培养细胞 8-10 分钟。然后加入新鲜的培养基，将细胞收集到小瓶中进行离心。将得到的细胞团仔细重悬，然后将细胞分装到培养瓶中进行生长。 |
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生长培养基： |
DMEM 培养基用于培养 HT22 细胞。培养基中添加 10% FBS、4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨酰胺、1.5 g/L NaHCO3 和 1.0 mM 丙酮酸钠，以优化细胞生长。 |
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生长条件： |
HT22 细胞培养物保存在温度为 37 °C、二氧化碳浓度为 5% 的加湿培养箱中。 |
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储存： |
冷冻的 HT22 细胞可长期保存在低于 -150 °C 的液氮气相或超低温电冰箱中。 |
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冷冻过程和培养基： |
HT22 细胞可在 CM-1 或 CM-ACF 培养基中采用缓慢冷冻法进行冷冻。这种方法每分钟仅使样本温度下降 1 °C，可保护细胞免受冲击，并有助于保持其活力。 |
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解冻过程： |
细胞在 37 °C 的水浴中解冻 40 至 60 秒，直到剩下一小块冰。然后向细胞中加入培养基，离心以去除冷冻培养基成分。重新悬浮细胞团，然后将细胞倒入装有培养基的新烧瓶中。之后，将细胞置于 37 °C 培养箱中培养至少 24 小时。 |
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生物安全等级： |
培养 HT22 细胞必须在生物安全 1 级实验室环境中进行。 |
3.HT22 细胞系的优缺点
HT22 海马细胞与其他神经元细胞系不同，具有一些优点和缺点。下面介绍该细胞系的一些显著优缺点。
优点
HT22 鼠神经元细胞系的优点是
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生长速度快
HT22 细胞的倍增时间为 15 小时，可快速高效地进行实验，有助于及时取得研究成果。
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永生化
HT22 是一种永生化细胞系，可确保长期持续生长。这提供了持续可用的细胞，减少了时间和成本，有利于长期实验并获得一致的结果。
缺点
HT22 细胞的缺点有
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源自小鼠
HT22 细胞系来源于小鼠大脑海马组织，可能无法完全代表人类神经元细胞生理和行为的复杂性，从而限制了其转化相关性。
4. HT22 细胞系的研究应用
HT22 细胞被广泛应用于神经生物学研究。本文将讨论该细胞系的一些有前景的应用：
- 神经科学研究： HT22 细胞被广泛用于神经退行性疾病（即阿尔茨海默病和帕金森病）的研究。它们被认为是研究与这些疾病相关的神经毒性和氧化应激机制的重要研究工具。2020 年进行的研究发现，PI3K/AKT/CREB 通路参与了 HT22 细胞中高血糖诱导的神经毒性[2]。同样，最近的一项研究提出，Nrf2/HO-1通路和NF- κB信号轴在HT22淀粉样β毒性中发挥重要作用[3]。
- 药物筛选： HT22 细胞被广泛用于药物测试和筛选。它们有助于研究人员确定具有神经保护作用的潜在治疗药物，以防治神经退行性疾病。2019 年进行的一项研究探讨了四氢姜黄素化合物在谷氨酸处理的 HT22 海马细胞中的神经保护潜力。其中，谷氨酸诱导 HT22 细胞氧化应激，并通过激活丝裂原活化蛋白激酶导致细胞死亡 [4]。
5.有关 HT22 细胞的研究论文
以下是一些以 HT22 细胞系为主题的有趣研究论文：
通过HT22细胞和阿尔茨海默病小鼠体内的抗氧化活性研究黄花苷的神经保护作用
这项发表在《国际分子医学杂志》（2019年）上的研究提出了黄花菜苷的神经保护潜力，黄花菜苷是从黄花菜中分离出来的一种化合物，可用于L-谷氨酸损伤的HT22细胞。
新型吲哚衍生物可预防氧化应激诱导的小鼠海马 HT22 细胞死亡
这篇发表在《神经药理学》（Neuropharmacology）（2018年）上的文章报告说，吲哚衍生物能防止氧化应激诱导的HT22细胞死亡。
人参皂苷Rb2抑制谷氨酸介导的氧化应激和HT22细胞的神经元细胞死亡
该研究论文发表于2019年的《人参研究杂志》（Journal of Ginseng Research）。该研究利用HT22细胞系探讨了天然产物人参皂苷Rb2的神经保护作用。研究发现，人参皂苷Rb2能有效降低谷氨酸诱导的小鼠海马细胞HT22的氧化应激和细胞死亡。
银纳米粒子通过PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导HT22细胞自噬和凋亡，从而诱导细胞毒性
这项发表在《生态毒理学与环境安全》（2021年）上的研究评估了银纳米颗粒在HT22细胞系中的细胞毒性潜力。
这篇研究文章发表于 2020 年的《神经再生研究》（Neural regeneration research）。文章提出铁前列素-1（一种铁突变抑制剂）能防止HT22海马细胞的氧化毒性。
6.HT22 细胞的资源：协议、视频等
一些有关 HT22 细胞的在线资源解释了其转染、分化和细胞培养方案：
- HT22 转染： 本文档包含在 24 孔和 96 孔细胞培养板中转染 HT22 的优化方案。
- HT22 细胞分化：本文将全面介绍 HT22 分化方案。
以下链接包含 HT22 细胞培养方案：
- HT22 细胞亚培养： 本链接将帮助您了解 HT22 细胞系的亚培养方案。此外，它还能帮助您学习诱导细胞神经毒性的方案。
- HT22 海马细胞：该网站包含大量有关 HT22 细胞倍增时间、培养基和细胞培养方案的有用信息。
参考文献
- He, M., et al.，Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons.Neural Regen Res, 2013.8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al.，鱼腥草素通过 PI3K/Akt/CREB 信号通路防止 HT22 细胞受高糖诱导的神经毒性影响。神经科学前沿》，2020 年。14: p. 241.
- Zhang，R.-l.，et al.，Protective effects of berberine against β-amyloid-induced neurotoxicity in HT22 cells via the Nrf2/HO-1 pathway.生物有机化学》，2023 年。133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al.,Neuroprotective effects of tetrahydrocurcumin against glutamate-induced oxidative stress in hippocampal HT22 cells.分子，2019.25(1): p. 144.