HT22细胞系
HT22是一种常用于神经科学研究的小鼠神经元细胞系。它在研究神经退行性疾病以及测试潜在的神经保护疗法或治疗方案方面具有重要价值。此外，HT22细胞对谷氨酸敏感，因此常被用于研究谷氨酸诱导的毒性或神经元损伤。
- 培养基
- HT22细胞的培养使用DMEM培养基。为实现最佳细胞生长，该培养基中添加了10%胎牛血清（FBS）、4.5 g/L葡萄糖、4 mM L-谷氨酰胺、1.5 g/L碳酸氢钠（NaHCO3）以及1.0 mM丙酮酸钠。
- 倍增时间
- HT22细胞的倍增时间约为15小时。
- 生长类型
- HT22细胞为贴壁细胞。
- 生物安全等级
- BSL-1
本文重点介绍了HT22细胞的关键特性，这些特性可助您开展研究工作。本文主要将探讨：
HT22细胞的一般特性与来源
本文这一部分将阐述HT22细胞的来源及其一般特征。在开始使用该细胞系进行研究之前，了解这些信息是必要的。在此，您将了解到：什么是HT22细胞？HT22海马细胞的形态特征如何？HT22细胞的大小是多少？
HT22是一种源自小鼠大脑海马区的连续细胞系。它是母系HT-4细胞系的亚克隆，通过利用温度敏感型多瘤病毒——猕猴病毒40（SV40）T抗原对小鼠神经组织进行永生化处理而建立。
这些细胞与成熟的海马细胞不同，因为它们缺乏谷氨酸和胆碱能受体，而源自海马的成熟神经元则具有这些受体。因此，它们不适用于与记忆相关的研究[1]。
HT22细胞具有上皮细胞样外观。
HT22细胞系培养信息
HT22细胞广泛应用于神经科学研究实验室。在培养这些细胞之前，研究人员会寻找必要的细胞培养信息，以确保工作顺利高效。本节涵盖了培养HT22细胞的所有关键要点。您将了解：HT22细胞的倍增时间是多少？如何培养HT22细胞？ HT22细胞培养方案是什么？HT22细胞培养基是什么？
HT22细胞培养要点
倍增时间：
HT22细胞的倍增时间约为15小时。
贴壁或悬浮培养：
HT22细胞为贴壁细胞。
传代倍数：
HT22海马细胞的传代倍数为1:3至1:6。简要步骤如下：移除培养基，用1×PBS冲洗贴壁细胞。 向培养瓶中加入Accutase解离液，在室温下孵育8至10分钟。随后加入新鲜培养基，将细胞收集至离心管中进行离心。将获得的细胞沉淀小心重悬，并将细胞分装至培养瓶中进行培养。
培养基：
HT22细胞采用DMEM培养基进行培养。为获得最佳细胞生长效果，该培养基中添加了10%胎牛血清（FBS）、4.5 g/L葡萄糖、4 mM L-谷氨酰胺、1.5 g/L碳酸氢钠（NaHCO3）以及1.0 mM丙酮酸钠。
培养条件：
HT22细胞培养置于加湿培养箱（37 °C）中，并保持5%的二氧化碳浓度。
储存：
冷冻的HT22细胞可在-150 °C以下的温度下长期保存，既可置于液氮气相中，也可存放在超低温电冻柜中。
冷冻过程与培养基：
HT22细胞可采用缓冻法，在CM-1或CM-ACF培养基中进行冷冻。该过程使样本温度每分钟仅下降1℃，可保护细胞免受冷冲击，并有助于维持其存活率。
解冻过程：
将细胞置于 37 °C 水浴中解冻 40 至 60 秒，直至仅剩一小块冰团。随后向细胞中加入培养基，并进行离心以去除冷冻培养基成分。将细胞沉淀重新悬浮，并将细胞倒入装有培养基的新培养瓶中。 随后，将细胞置于37 °C的培养箱中培养至少24小时。
生物安全等级：
培养HT22细胞必须在生物安全1级实验室环境中进行。
HT22细胞系的优缺点
HT22海马细胞与其他神经元细胞系相比，具有一些独特的优缺点。本文将列举该细胞系的一些显著优缺点。
优点
HT22小鼠神经元细胞系的优势包括：
-
生长速度快
HT22细胞的倍增时间仅为15小时，这使得实验能够快速高效地进行，并有助于及时获得研究成果。
-
永生化
HT22 是一种永生化细胞系，可确保长期持续生长。这保证了细胞供应的稳定性，节省了时间和成本，并有助于开展结果一致的长期实验。
缺点
HT22细胞的缺点包括：
-
小鼠来源
HT22细胞系源自小鼠脑海马组织，可能无法完全反映人类神经元细胞生理学和行为的复杂性，从而限制了其转化医学的相关性。
4. HT22细胞系的研究应用
HT22细胞在神经生物学研究中被广泛应用。本文本节将探讨该细胞系的一些有前景的应用：
- 神经科学研究：HT22细胞广泛应用于神经退行性疾病（如阿尔茨海默病和帕金森病）的研究。它们被视为研究这些疾病相关神经毒性和氧化应激机制的重要研究工具。 2020年的一项研究发现，PI3K/AKT/CREB通路参与了高血糖诱导的HT22细胞神经毒性[2]。 同样，一项最新研究提出，Nrf2/HO-1通路和NF-κB信号轴在HT22细胞的β-淀粉样蛋白毒性中起着重要作用[3]。
- 药物筛选：HT22细胞被广泛用于药物测试和筛选。它们有助于研究人员识别具有神经保护作用的潜在治疗药物，以对抗神经退行性疾病。 2019 年的一项研究探讨了四氢姜黄素化合物在谷氨酸处理的 HT22 海马细胞中的神经保护潜力。在此，谷氨酸在 HT22 细胞中诱导氧化应激，并通过激活丝裂原活化蛋白激酶导致细胞死亡 [4]。
5. 涉及HT22细胞的研究论文
以下是一些以HT22细胞系为研究对象的有趣论文：
通过抗氧化活性研究番红花素在HT22细胞及阿尔茨海默病小鼠中的神经保护作用
发表于《国际分子医学杂志》（2019年）的这项研究提出，从番红花（Crocus sativus L.）中分离出的化合物番红花素，在L-谷氨酸损伤的HT22细胞中具有神经保护潜力。
新型吲哚衍生物可预防小鼠海马HT22细胞中氧化应激诱导的细胞死亡
发表于《神经药理学》（2018年）的这篇论文报告称，吲哚衍生物可保护HT22细胞免受氧化应激诱导的细胞死亡。
人参皂苷Rb2可抑制谷氨酸介导的HT22细胞氧化应激及神经元细胞死亡
该研究论文发表于2019年的《人参研究杂志》。本研究利用HT22细胞系，探讨了天然产物人参皂苷Rb2的神经保护作用。 研究发现，人参皂苷Rb2能有效减轻谷氨酸在小鼠海马细胞HT22中诱发的氧化应激和细胞死亡。
银纳米颗粒通过PI3K/AKT/mTOR信号通路介导自噬和凋亡，在HT22细胞中诱导细胞毒性
发表于《生态毒理学与环境安全》（2021年）的这项研究评估了银纳米颗粒在HT22细胞系中的细胞毒性潜力。
该研究论文发表于2020年的《神经再生研究》期刊。研究提出，铁死亡抑制剂铁蛋白抑制剂-1可预防HT22海马细胞的氧化毒性。
HT22细胞相关资源：操作指南、视频及其他
部分关于HT22细胞的在线资源详细介绍了其转染、分化及细胞培养操作指南：
以下链接包含HT22细胞培养方案：
- HT22细胞传代：此链接将帮助您了解HT22细胞系的传代操作流程。此外，它还将协助您学习诱导细胞神经毒性的操作流程。
- HT22海马细胞：本网站包含大量关于HT22细胞倍增时间、培养基及细胞培养方案的有用信息。
参考文献
- He, M. 等，分化使HT22神经元易受兴奋性毒性影响。《神经再生研究》，2013年，8(14): 1297-306页。
- Zhang, S. 等，槲皮素通过PI3K/Akt/CREB信号通路预防HT22细胞受高葡萄糖诱导的神经毒性。《神经科学前沿》，2020年，14卷：第241页。
- 张，R.-l. 等，小檗碱通过Nrf2/HO-1通路对HT22细胞中β-淀粉样蛋白诱导的神经毒性具有保护作用。《生物有机化学》，2023. 133: 106-210.
- Park, C.-H. 等，四氢姜黄素对海马HT22细胞中谷氨酸诱导的氧化应激的神经保护作用。《分子》，2019年，25(1): 第144页。