BEWO 细胞系
BeWo是一种广泛应用于生物医学研究的人绒毛膜癌衍生细胞系。它是探索人类滋养细胞胎盘发育和合胞化复杂过程的重要体外模型。研究人员还利用这些细胞研究滋养层细胞的行为、激素分泌和物质在胎盘中的转运。此外，BeWo 细胞还可用于毒理学、感染和疾病传播研究。
本文涵盖了有关 BeWo 细胞的基本知识，可帮助您在研究中使用它们。内容包括
1.BeWo 细胞的一般特征和来源
事先了解细胞系的起源和一般特征对在研究中使用细胞系至关重要。本文的这一部分将探讨 BeWo 细胞系的起源、特征等。在这里，您将了解到什么是 BeWo 绒毛膜癌细胞系？什么是 BeWo 合胞化？BeWo 细胞来自哪里？BeWo 细胞的形态是怎样的？BeWo 的倍性如何？
- 胎盘细胞系 BeWo 起源于 1968 年一名男性胎儿胎盘的恶性妊娠绒毛膜癌[1]。因此，它是胎盘研究的宝贵模型。
- BeWo 细胞呈现上皮样形态。
- BeWo 细胞相对较小，在 20 到 30 µM 之间 [2]。
- BeWo细胞表现出稳定的核型。它们的干系数为低四倍体。BeWo 细胞的染色体模数为 86。染色体数目可从 71 到 178 不等。
- BeWo细胞能产生多种激素，即人绒毛膜促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素（hCG）和类固醇激素。
- BeWo 细胞表达分子标记，包括 CK 7、E-cadherin 和 VE-cadherin。
B30 亚系
B30 是 BeWo 细胞的亚系。它用于研究营养物质的吸收和运输。这是因为它们在多孔膜上生长旺盛。
BeWo 和 JEG-3
BeWo JEG-3 细胞系来源于绒毛膜癌，用于胎盘研究。BeWo 细胞产生的激素水平低于 JEG-3，如人绒毛膜促性腺激素（hCG）和雌二醇。
2.BeWo 细胞系培养信息
除非了解关键细节，否则细胞培养的维护可能会很棘手。例如BeWo 的倍增时间是多少？什么是 BeWo 细胞培养基？如何培养 BeWo 细胞系？
培养 BeWo 细胞的要点
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倍增时间： |
BeWo 细胞的群体倍增时间约为 30 小时。 |
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粘附或悬浮： |
BeWo 是一种粘附细胞系。 |
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细胞播种密度： |
建议 BeWo 细胞的播种密度为 1 x104 个细胞/平方厘米。播种时，去除细胞中的旧培养基，用 1 x PBS 冲洗细胞。然后加入 Accutase（传代溶液），在环境温度下培养细胞 8-10 分钟。然后，将分离的细胞加入培养基并离心。然后将收获的细胞重新悬浮并倒入新的烧瓶中。 |
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生长培养基： |
Ham's F12K 培养基含有 10% FBS、2.0 mM L-谷氨酰胺、2.0 mM 丙酮酸钠和 2.5 g/L NaHCO3，用于培养 BeWo 细胞。BeWo 细胞培养基应每周更换 2 至 3 次。 |
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生长条件： |
BeWo 细胞在温度为 37 摄氏度、二氧化碳浓度为 5%的加湿培养箱中培养。 |
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储存： |
冷冻的 BeWo 细胞储存在低于 -150°C 的超低温电冰箱中或液氮气相中。 |
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冷冻过程和介质： |
建议在 CM-1 或 CM-ACF 冷冻培养基中冷冻 BeWo 细胞。细胞冷冻采用慢速冷冻法。这种方法每分钟只允许温度下降 1 度，从而防止细胞受到任何冲击，保护细胞的活力。 |
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解冻过程： |
将冷冻细胞浸入预设的 37°C 水浴中 40 至 60 秒，直到留下小冰团为止。然后，加入新鲜的生长培养基，离心细胞以除去冷冻培养基中的成分。收集到的细胞颗粒重新悬浮并分配到培养瓶中进行生长。 |
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生物安全等级： |
处理和维护 BeWo 细胞培养物需要 1 级生物安全实验室。 |
3.BeWo 细胞系的优缺点
BeWo 细胞表现出独特的特性，并具有特定的优点和缺点。在本节中，我们将探讨其中一些值得注意的问题。
优点
BeWo 绒毛膜癌细胞系的主要优点有
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体外胎盘细胞模型
BeWo 细胞提供了一个研究滋养层细胞行为和胎盘合胞化的体外模型，复制了在体内难以观察到的过程。
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激素分泌
BeWo 细胞能分泌激素，如 hCG 和胎盘泌乳素，因此对激素调节研究和生殖生物学研究很有价值。
缺点
BeWo 滋养层细胞的缺点是
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癌症细胞系
BeWo 细胞来源于绒毛膜癌，这是一种胎盘肿瘤。这种来源可能无法完全代表正常的胎盘细胞功能。
4.BeWo 细胞的研究应用
BeWo 细胞系被广泛用于胎盘研究。以下是该细胞系的一些具体应用：
- 胎盘和妊娠相关研究： BeWo 细胞在胎盘和妊娠相关研究中举足轻重。例如，研究人员利用这些细胞来研究药物、营养物质和毒素等物质通过胎盘屏障的运输。此外，他们还研究激素的产生和调节，包括人绒毛膜促性腺激素（hCG）、胎盘泌乳素和类固醇激素。这对于了解孕期激素变化非常重要。2018年进行的研究调查了溴化阻燃剂（BFR）对人类滋养细胞系（BeWo）中磺基转移酶活性的影响。这种酶参与调节甲状腺激素的细胞内水平[3]。
- 感染与疾病研究： BeWo 细胞还可用于研究病原体与胎盘细胞之间的相互作用。这项研究对于了解可从母体传染给胎儿的疾病以及制定保护胎儿健康的策略非常有价值。此外，这种细胞系还有助于研究人员调查怀孕期间出现的并发症，如子痫前期。例如，Michalina Bralewska 在 2023 年利用 BeWo 滋养层细胞模型进行的一项研究发现，嗜铬粒蛋白 A（CgA）和由其衍生的多肽 catestatin（CST）可能在错综复杂的子痫前期（PE）发病过程中发挥作用[4]。在此基础上，另一项研究利用 BeWo 绒毛膜癌细胞系探讨了三色黄质的抗癌潜力。该研究还通过对实验前后的蛋白质组进行比较分析，努力发现生物标志物[5]。
5.有关 BeWo 细胞的研究论文
以下是一些以 BeWo 滋养层细胞为主题的重要研究论文。
AMPK信号调节人滋养层细胞系BeWo的丝裂吞噬和线粒体ATP生成
这项发表在《生物科学前沿-标志》（Frontiers in Bioscience-Landmark，2022年）上的研究提出，AMPK信号通过FUNDC1和PRKN促进的有丝分裂途径激活BeWo滋养层细胞的有丝分裂。因此，有丝分裂有助于维持 ATP 的产生和线粒体膜电位。
尼泊金乙酯通过Caspase-3途径诱导人胎盘BeWo细胞凋亡
这篇文章发表在《动物细胞与系统》（2020）上。该研究提出，苯甲酸乙酯通过调节 Caspase 3 途径介导 BeWo 细胞凋亡。
通过定量蛋白质组学表征人类胎盘组织和细胞系（BeWo、JEG-3、JAR 和 HTR-8/SVneo）的异生物和类固醇处置潜力
这项发表在《药物代谢与处置》（2023 年）上的研究利用胎盘细胞系（包括 BeWo、JAR、JEG-3 和 HTR-8/SVneo）来研究细胞中的异种生物素和类固醇沉积。
人胎盘中的凋亡素和凋亡素受体：滋养层细胞JEG-3和BeWo的表达、信号通路及细胞增殖和细胞周期调控
这篇发表在《国际分子医学杂志》（2020年）上的研究文章提出，APJ受体的配体Apelin通过APJ和ERK1/2、stat3和AMPK信号传导促进BeWo细胞增殖。因此，它可能是调节胎盘发育的重要脂肪因子。
Epilepsia》（2021年）上的这项研究探讨了胎儿营养素和抗癫痫药物对人源性滋养细胞系BeWo中胆碱转运体的影响。
6.BeWo 细胞系的资源：协议、视频等
以下是一些有关 BeWo 细胞的在线资源：
- 体外转染：该视频将帮助您学习粘附细胞的体外质粒 DNA 转染方案。
以下链接包含 BeWo 细胞的细胞培养信息：
- BeWo 细胞：本网站包含有关 BeWo 细胞系的基本细胞培养信息。其中包括有关细胞培养基和培养条件的信息。网站还提供了亚培养和处理低温保存及增殖培养物的方案。
参考文献
- Weber, M., et al.,Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines.胎盘》，2021 年。103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al.,Characteristics of trophoblasts in long-term culture.实验生物学与医学公报》，2017 年。164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton,Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo.Chemosphere, 2018.197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz,Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment.国际分子科学杂志》，2023 年。24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al.，BeWo 细胞系添加药物 trichosanthin 的比较蛋白质组学分析。分子, 2022.27(5): p. 1603.