BEWO 细胞
一般信息
| 说明 | BeWo细胞是一种来源于胎儿男性胎盘恶性妊娠绒毛膜癌的细胞系,已成为研究胎盘的一种广泛使用的体外模型。 在胎盘发育过程中,人类滋养层细胞合子化阶段的细胞-细胞融合是最重要但最不为人所知的事件之一。由于很难在体内胎盘中研究这一过程,BeWo 细胞被用作模拟体内胎盘绒毛滋养层细胞合胞化的细胞培养模型。 这些细胞具有上皮样表型和粘附性。BeWo 细胞的 b30 亚克隆由于生长在可渗透的膜上,对研究营养摄取和运输特别有用。 CK 7 和 E-cadherin 是 BeWo 细胞表达的分子标记。在 BeWo 细胞中发现了 VE-粘连蛋白,并在使用福斯克林处理后得到增强。这些细胞还表达角蛋白,G6PD B 同工酶也呈阳性。BeWo 细胞的核型为模数=86,范围在 71 到 178 之间,干系数为低四倍体。 核型在干系数内相对稳定。BeWo 细胞会分泌各种激素,包括人绒毛膜促性腺激素(hCG)、人绒毛膜体液调节素(胎盘泌乳素)以及雌酮、雌三醇和雌二醇等类固醇激素。 然而,BeWo 细胞分泌的 β-hCG 和雌二醇水平低于 JEG-3 等其他绒毛膜癌衍生细胞系。经福斯可林处理后,BeWo 细胞分泌的 β-hCG 增加到与其他绒毛膜癌衍生细胞系相似的水平。此外,佛司可林处理还能提高 BeWo 细胞分泌的孕酮水平。 总之,BeWo 细胞是一种广泛用于研究胎盘发育和人类滋养细胞合胞化过程的体外模型。它们表现出上皮样表型,表达各种分子标记,并分泌多种激素,包括 hCG、胎盘泌乳素和类固醇激素。总之,BeWo 细胞是研究胎盘发育复杂过程的重要工具。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胎盘 |
| 疾病 | 绒毛膜癌 |
| 转移部位 | 大脑 |
| 同义词 | BeWo, Be Wo, Be-Wo |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | BEWO(Cytion 目录号 300123) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0044 |
生物分子数据
| 同工酶 | G6PD、B |
|---|---|
| 病毒易感性 | 脊髓灰质炎病毒 3,水泡性口炎(印第安纳州) |
| 逆转录酶 | 阴性 |
| 产品 | 孕酮、人绒毛膜促性腺激素(胎盘泌乳素)、雌激素、雌酮、雌三醇、雌二醇、角蛋白 |
处理
| 培养基 | Ham's F12K 培养基,w:2.0 mM L-谷氨酰胺,w:2.0 mM 丙酮酸钠,w:2.5 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820608a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 建议的接种密度为1×10⁴个细胞/平方厘米。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 为了在解冻后获得最佳附着力和存活率,我们建议使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板。 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '01:01:01, '11:01:01
B*: '08:13, '35:01:01
C*: '04:01:01, '07:01:01
DRB1*: '01:03:01, '03:01:01
DQA1*: '01:01:01, '05:01:01
DQB1*: '02:01:01, '05:01:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:01:01
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300123-010425 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300123 |
| 300123-1022 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300123 |
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