神经-2a 细胞系
Neuro-2a是一种小鼠驱动的神经细胞系，广泛用于神经科学研究。这些细胞主要用于研究神经发育、分化、神经毒性、细胞信号通路和轴突生长。此外，它们还可用于药物开发和筛选。
本文重点介绍 Neuro-2a 神经母细胞瘤细胞的重要方面，希望对您在开始使用该细胞前有所帮助。主要包括
1.神经-2a 细胞的一般属性和起源
这部分文章将介绍神经-2a 细胞系的背景和基本特征，这是在使用该细胞系之前必须了解的。在这里，您将了解到什么是 Neuro-2a 细胞系？神经-2a 细胞系的起源是什么？什么是神经-2a 细胞分化？神经-2a 细胞的大小是多少？神经-2a 细胞的形态是怎样的？
- 神经-2a细胞源自白化小鼠（A品系）的自发性肿瘤（神经母细胞瘤）。该细胞系由 R.J. Klebe 和 F.H. Ruddle 建立。
- Neuro-2a 神经母细胞瘤细胞具有神经元和变形干细胞形态。
- Neuro-2a 细胞大小为 12 微米高 [1]。
- 神经-2a细胞的染色体数目从59到193不等，正常数目为95。这些神经母细胞瘤细胞的核型在94至98条染色体范围内不稳定。
2.神经-2a 细胞系培养信息
神经-2a 细胞广泛应用于神经科学研究实验室。在使用这些细胞之前，您应该了解以下必要的细胞培养信息。这可能会帮助您轻松应对。你将知道什么是神经-2a 细胞培养基？如何培养 Neuro-2a 细胞？神经-2a 细胞的倍增时间是多少？神经-2a 细胞的播种密度是多少？神经-2a 细胞培养方案是什么？神经-2a 细胞培养基是什么？
神经-2a 细胞培养要点
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倍增时间： |
Neuro-2a 细胞的倍增时间约为 70 小时。 |
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粘附或悬浮： |
Neuro-2a 是一种粘附细胞系。 |
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播种密度： |
神经-2a 细胞系的最佳细胞播种密度为 1 x104 个细胞/平方厘米。播种时，用无镁和钙的磷酸盐缓冲盐水（1x）清洗细胞。然后加入传代溶液（Accutase），在环境温度下培养细胞 8-10 分钟。细胞解离后，加入新鲜培养基，离心细胞。小心重悬收获的细胞团，然后将细胞倒入培养皿中进行生长。 |
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生长培养基： |
EMEM 用于培养 Neuro-2a 细胞。培养基中含有 10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺、1.5 g/L NaHCO3、EBSS、1 mM 丙酮酸钠和 NEAA，可促进细胞理想生长。培养基应每周更换 1 至 2 次。 |
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生长条件： |
Neuro-2a 培养物在 37°C 的加湿培养箱中培养，培养箱连接 5%的二氧化碳。 |
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储存： |
细胞应长期保存在温度低于 -150°C 的超低温电冰箱或液氮气相中。 |
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冷冻过程和培养基： |
CM-1 或 CM-ACF 培养基用于冷冻神经-2a 细胞。细胞通过缓慢的冷冻过程进行冷冻，每分钟仅允许温度下降 1 °C。这样可以保护细胞免受冲击，保持其活力。 |
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解冻过程： |
解冻冷冻培养物时，将小瓶放入 37 °C 水浴中 40 至 60 秒，直到只剩下一小块冰为止。然后加入培养基，对细胞进行离心。这一步骤有助于去除冷冻培养基成分。然后重新悬浮细胞团，并将细胞转移到装有培养基的新烧瓶中。然后，将细胞置于 37 °C 的培养箱中至少培养 24 小时。 |
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生物安全等级： |
处理和维护神经-2a 培养物必须在生物安全 1 级实验室环境中进行。 |
3.神经-2a 细胞系的优缺点
Neuro-2a 细胞具有一些优缺点，有别于其他神经元细胞系。下面列出了这些细胞的一些显著优缺点。
优点
Neuro-2a 小鼠神经母细胞瘤细胞系的优点有
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易于维护：
神经-2a细胞系与复杂的细胞培养程序无关。它们易于在研究实验室中培养和维护。
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体外神经元细胞模型：
Neuro-2a 是一种方便的神经元细胞模型，被研究人员广泛用于神经元发育和分化研究。
缺点
Neuro-2a 细胞的缺点是
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小鼠来源：
神经-2a源自小鼠，研究人员在将基于小鼠的研究结果推断为人类健康和疾病时应谨慎行事，因为小鼠和人类的生物学特性可能存在显著差异。
4.神经-2a 细胞系的研究应用
神经-2a细胞在神经科学研究领域有许多应用。这里将讨论该细胞系的几种有前景的用途：
- 神经发育： Neuro-2a 是一种体外神经元细胞模型，广泛用于研究神经元发育及相关过程，如分化、轴突生长和突触形成。2020 年进行的一项研究利用 Neuro-2a 细胞探讨了 microRNA-124 在维甲酸诱导的神经元细胞分化中的作用[2]。另一项研究调查了神经母细胞瘤细胞系（N2A）中神经 2a 视黄酸受体伽马（RARG）和 miRNA-124 的表达。该研究提出，miR-124 以 RARG 为靶标，抑制了神经元的生长 [3]。
- 神经毒性： Neuro-2a 还可用于评估药物、化学品或环境因素对神经细胞的毒性作用。例如，Zhihong Yin 及其合作者利用 Neuro-2a 细胞研究了环境化学物质双酚 A（BPA）的神经毒性。他们观察到，双酚 A 会破坏神经细胞的细胞和突触完整性，从而抑制神经细胞的分化和增殖 [4]。
- 药物筛选： 神经-2a 细胞还被用于评估多种药物、化合物和天然产品的治疗活性。例如，一项研究利用神经-2a 细胞研究了银杏叶植物提取物的抗氧化潜力。此外，该研究还提出，银杏叶提取物可降低 Aβ 的聚集，是治疗阿尔茨海默病的潜在药物[5]。
5.有关神经-2a 细胞的研究论文
以下是一些介绍神经-2a 细胞系的有趣研究论文。
从胡椒中提取的胡椒碱类烷酰胺诱导神经-2a细胞中的BDNF启动子并促进神经元生长
这项发表在《天然药物杂志》（Journal of Natural Medicines）2018年刊上的研究调查了从白胡椒（P. nigrum）中分离出的烷酰胺对Neuro-2a神经细胞的治疗作用。
这项发表在 2020 年《生物化学与生物物理学报》（Acta Biochimica et Biophysica Sinica）上的研究提出，Nkx2.1 基因通过调节 Shh 信号级联在小鼠大脑发育过程中发挥着重要作用。
暴露于双酚 A 会诱发神经毒性，导致神经-2a 细胞突触和细胞骨架功能障碍
这篇文章发表于《毒理学与工业健康》（2023年），提出一种环境化学物质双酚A会引发神经-2a细胞的神经毒性，并破坏其突触和细胞骨架功能障碍。
这篇发表在《制药》（Pharmaceuticals）（2021年）上的论文提出，一种药物 hexarelin 能调节神经母细胞瘤细胞（Neuro-2a）中的 PI3K/AKT 和 MAPK 级联，抑制过氧化氢诱导的神经-2a 细胞凋亡。
欧当归乙醇提取物可抑制小胶质细胞的神经炎症并促进神经-2a细胞的神经元生长
这篇发表在《循证补充与替代医学》（Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine）（2021年）上的研究论文提出，当归果实提取物能抑制神经-2a细胞的神经炎症，因此对神经炎症性疾病有益。
6.神经-2a 细胞的资源：协议、视频等
以下是有关神经-2a 细胞的在线资源。其中包括神经-2a 细胞培养和转染方案。
- Neuro-2a 转染方案： Neuro-2a 是一种合适的转染宿主。本链接将为您提供有关该细胞系转染方案的指导。Neuro 2a 的转染效率因试剂而异。
以下链接包含 Neuro-2a 细胞培养方案。
- Neuro-2a 细胞培养方案：该链接将帮助您了解神经 2a 细胞亚培养方案。
- 神经 2a 细胞：该网站包含有关神经-2a 细胞培养基、播种密度以及亚培养和处理低温保存和增殖培养物方案的全面知识。
参考文献
- Lulevich, V. 等人，单细胞力学为探测淀粉样蛋白-β肽与神经细胞的相互作用提供了一种灵敏的定量方法。Proc Natl Acad Sci U S A, 2010.107(31): p. 13872-7.
- You, Q., et al., Roleof miR-124 in the regulation of retinoic acid-induced Neuro-2A cell differentiation.Neural Regen Res, 2020.15(6): p. 1133-1139.
- Su, X., et al.,Retinoic acid receptor gamma is targeted by microRNA-124 and inhibits neurite outgrowth.神经药理学》，2020 年。163: p. 107657.
- Yin, Z., et al.,Bisphenol-A exposure induced neurotoxicity and associated with synapse and cytoskeleton in Neuro-2a cells.体外毒理学》，2020 年。67: p. 104911.
- Chen, L., et al.,Gingko biloba extract (EGb) inhibits oxidative stress in neuro 2A cells overexpressing APPsw.BioMed research international, 2019. 2019.