HEK293 细胞
有关 HEK293 细胞的基本事实
| 说明 | HEK293 细胞系是 20 世纪 70 年代由乌得勒支大学的亚历克斯-范德艾布(Alex van der Eb)从人类胚胎肾细胞中提取的一种永生上皮细胞系,由于其显著的多功能性和易于遗传操作的特点,已成为分子生物学和生物技术应用领域的重要实验模型。 对 HEK293 细胞系的改造涉及整合腺病毒 5 DNA 的特定片段,将腺病毒 E1A 和 E1B 基因嵌入细胞基因组。腺病毒 DNA 修饰使细胞系能够高效地吸收外来 DNA,这就是所谓的高转染效率。将病毒 DNA 整合到 HEK293 细胞基因组中可实现细胞永生化,并通过促进外源 DNA 的稳定整合和表达(这一过程被称为稳定转染),大大提高了这些细胞在生物技术应用中的效用。这种能力可使外来基因在细胞内持续存在并发挥功能,使 HEK293 成为遗传研究和生物技术的宝贵工具。 因此,HEK293 细胞已成为生物技术中生产重组蛋白(包括重要的治疗蛋白)的基本资源,也是生成病毒载体(尤其是腺病毒和慢病毒载体)的强大宿主细胞。HEK 293 细胞在制药业中举足轻重,可用于高通量筛选试验、针对与单基因疾病相关的特定基因的基因疗法的生产以及腺病毒感染研究。 在工业生物技术领域,HEK293 人体细胞系的用途扩展到重组酶的生产、病毒载体(如腺病毒载体)的生产、蛋白质的生产和生物传感器的开发。在评估化学品对细胞生物学的影响(包括对典型肾细胞的影响和基因疗法的潜力)时,HEK 细胞系的应用使毒理学研究受益匪浅。HEK293 长生细胞系能高效地产生原生蛋白质,这突出表明了它在医学研究中的重要作用,包括癌症研究和探索基因疗法的基础。 HEK293 细胞为研究细胞生物学和感兴趣的蛋白质提供了一个独特的平台,在研究和工业应用的多功能性和实用性方面超越了其他细胞系。相比之下,HEK293 的变种 HEK293T 细胞经过改良后可提高转染效率,HEK293F 细胞可用于悬浮培养以促进大规模蛋白质生产,而其他哺乳动物细胞系,如源自猴肾组织的 Vero 细胞,主要用于疫苗开发和病毒研究。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肾脏 |
| 应用 | 转染宿主 |
| 同义词 | Hek293、HEK-293、HEK/293、HEK 293、HEK,293、293、293 HEK、293 Ad5、人胚胎肾脏 293 |
HEK 293 的规格
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
文件
| 引用 | HEK293(Cytion 目录号 300192) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0045 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HEK293胚胎肾源细胞系因转化过程含有腺病毒-5 E1A/E1B序列,但不释放传染性病毒,从而具备高增殖能力。该基因修饰在胚胎肾细胞中稳定存在。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能存在差异。 |
HEK-293 细胞的基因组学
| 表达的受体 | Vitronectin |
|---|---|
| 蛋白质表达 | CEA 阴性,p53 阳性 |
| 致肿瘤性 | 裸鼠 |
| 病毒易感性 | 用腺病毒 5 DNA 进行转化 腺病毒 5 DNA |
| 倍性状态 | 30% 的 HEK293 细胞具有 64 条模式染色体的低倍体核型。4.2%的细胞具有更高的倍性。 |
人类细胞系 293 的培养指南
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 30 小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合层。 |
| 流体更新 | 每周 2 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量保证
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '03:01:01
B*: '07:02:01
C*: '07:02:01
DRB1*: '15:01:01
DQA1*: '01:02:01
DQB1*: '06:02:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:03:02
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300192-021123 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300192 |
| 300192-060922 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300192 |
| 300192-251124 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300192 |
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