HEK293-FAP 细胞
一般信息
| 说明 | 免责声明:所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构,价格约为 6,250 欧元 HEK293-FAP细胞系是一种稳定的重组HEK293细胞系,经过工程改造可高水平表达成纤维细胞激活蛋白(FAP),每细胞表达量约为123,000个分子。该细胞系采用inscreenex的着陆点技术开发,确保FAP基因在特定且经过预验证的基因组位点上实现精确且可重复的整合。 FAP(又称Seprase或DPPIV)是一种丝氨酸蛋白酶,参与细胞外基质的重塑,在伤口愈合、组织修复和纤维化等过程中尤为重要。此外,FAP在许多上皮癌的基质中高度上调,使其成为肿瘤学研究的重要靶点,也是癌症相关成纤维细胞的潜在生物标志物。 通过流式细胞术结合靶向特异性抗体,证实了该细胞系中 FAP 的表达,确保了整个细胞群中受体密度的稳定性和可靠性。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胎儿肾脏 |
| 疾病 | 转染/永生化;无致瘤性(HEK293背景) |
| 应用 | 针对FAP的抗体及免疫疗法研发;肿瘤基质生物学;癌相关成纤维细胞(CAF)研究;抗体药物偶联物(ADC)和双特异性抗体工程;肿瘤学筛选 |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 细胞类型 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | HEK293-FAP (Cytion 目录号 305419) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_6G23 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该 HEK293 衍生物含有成纤维细胞活化蛋白 (FAP) 表达构建体,用于受体功能研究。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 表达的受体 | 纤维蛋白磷酸酶(Seprase 或 DPPIV) |
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处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS、1 mM 丙酮酸钠、10 mM HEPES 和 1% NEAA。加入基因素(G418-硫酸酯),使最终浓度达到 1 mg/mL。 |
| 解离试剂 | 胰蛋白酶-EDTA |
| 加倍时间 | 约24-36小时 |
| 亚培养 | 常规粘附细胞培养:吸出粘附细胞中的旧培养基,并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后,根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液(如 T25 烧瓶 1 毫升,T75 烧瓶 3 毫升),室温或 37°C 孵育直至细胞分离(5-10 分钟)。在显微镜下观察分离情况,必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后,加入完全培养基以灭活胰蛋白酶/EDTA,轻轻重悬细胞,然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中,每 2-3 天更换一次培养基。 |
| 分割比率 | 1 到 5 |
| 播种密度 | 2至4×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中,让细胞从冷冻过程中恢复并附着至少 24 小时。 为了在解冻细胞后获得最佳的附着力和存活率,我们建议在冷冻恢复后使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板进行首次播种。随后的细胞常规培养不需要胶原涂层。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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