NCI-H1299细胞：NCI-H1299肺癌细胞的研究及其临床意义
NCI-H1299 是一种永生化的人类非小细胞肺癌细胞系，广泛应用于免疫肿瘤学、癌症及药物研发领域。 此外，研究人员利用这些细胞来探究药物敏感性、潜在的信号传导通路以及与肺癌相关的分子机制。此外，这些细胞还被用于研究 SARS-CoV-2 等病毒感染。
- 培养基
- RPM1 1640 是 NCI-H1299 细胞的理想培养基。 该培养基中添加了 10% 胎牛血清、4500 mg/L 葡萄糖、2.0 mM L-谷氨酰胺、1 mM 丙酮酸钠、1500 mg/L NaHCO₃ 以及 10 mM HEPES。 培养基应每周更换 2 至 3 次。
- 倍增时间
- NCI-H1299细胞的倍增时间在22-30小时之间。
- 生长类型
- NCI-H1299 是一种贴壁细胞系。
- 生物安全等级
- BSL-1
- 可从以下处获取
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NCI-H1299细胞的一般特征与来源
了解细胞系的首要事项是其来源和一般特征，因为这些信息有助于您规划其在研究中的应用。本文这一部分将帮助您了解有关 NCI-H1299 来源和特征的一些重要信息。例如，NCI-H1299 肺癌细胞是什么？ NCI-H1299属于哪种细胞？NCI-H1299细胞的大小是多少？A549与NCI-H1299有何区别？
- NCI-H1299细胞系源自一名43岁白人男性癌症患者的肺部淋巴结转移灶。
- 这些细胞具有p53基因的纯合性部分缺失；因此，它们不表达p53蛋白。NCI-H1299细胞缺乏p53蛋白表达，这促成了H1299肺癌细胞的增殖倾向。
- 除 p53 外，据报道，这些永生化细胞还具有 NCI-H1299 KRAS 突变，该突变导致了其生长、增殖、迁移和侵袭特性。
- NCI-H1299 的核型接近二倍体。
- NCI-H1299细胞具有上皮细胞样形态。
- 这些细胞呈扁平状，厚度小于 5 µm。
NCI-H1299 和 A549
NCI-H1299和A549均为非小细胞肺癌细胞系。 与 A549 相比，NCI-H1299 细胞更具侵袭性且更敏感。两者具有相对相似的突变，例如 KRAS。然而，与 NCI-H1299 细胞不同，A549 细胞表达 P53 基因。
培养信息
若不了解该细胞系的所有关键信息，维持其培养并非易事，这些信息包括：NCI-H1299的倍增时间是多少？NCI-H1299的接种密度是多少？ NCI-H1299细胞培养基是什么？如何培养NCI-H1299细胞系？本节将帮助您了解有关NCI-H1299细胞培养的所有这些问题的答案。
NCI-H1299细胞培养的关键要点
倍增时间：
NCI-H1299细胞的倍增时间在22-30小时之间。
贴壁型还是悬浮型：
NCI-H1299 属于贴壁型细胞系。
传代倍数：
NCI-H1299细胞建议以1:3至1:6的比例进行传代。接种时，先用1×PBS洗涤贴壁细胞，然后在室温下用Accutase传代溶液孵育8至10分钟。 将脱附的细胞加入新鲜培养基中并离心。随后将细胞沉淀重新悬浮，并将细胞倾入装有生长培养基的新培养瓶中。
生长培养基：
RPM1 1640 是 NCI-H1299 细胞的理想培养基。 该培养基需补充10%胎牛血清、4500 mg/L葡萄糖、2.0 mM L-谷氨酰胺、1 mM丙酮酸钠、1500 mg/L NaHCO₃以及10 mM HEPES。 培养基应每周更换2至3次。
培养条件：
NCI-H1299肺癌细胞培养需置于37°C、5% CO₂浓度的加湿培养箱中进行。
保存：
NCI-H1299细胞系可长期保存在液氮的蒸汽相中，或保存在温度低于-150°C的超低温冷冻柜中。
冷冻过程与培养基：
CM-1 或 CM-ACF 是 NCI-H1299 细胞的冷冻培养基。为保护细胞存活率，采用缓慢冷冻法进行冷冻，该方法要求温度每分钟仅下降 1 度。
解冻过程：
将冷冻的 NCI-H1299 细胞置于预热至 37 摄氏度的水浴中快速振荡 40 至 60 秒，直至仅剩一小块冰晶。 将新鲜培养基加入解冻后的细胞中，可直接在新的培养瓶中培养，或进行离心处理。若选择直接培养，则需在培养24小时后更换培养基。离心处理有助于去除冷冻培养基中的成分。随后，将收获的细胞用新鲜培养基重悬，并分装至新的培养瓶中进行培养。
生物安全等级：
处理 NCI-H1299 细胞培养需在 1 级生物安全实验室中进行。
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NCI-H1299细胞的优缺点
与其他人类癌细胞系一样，NCI-H1299也具有一些与特定优缺点相关的显著特征。本文总结了其中几项重要的特征。
优点
NCI-H1299非小细胞肺癌细胞系的主要优点包括：
-
体外肺癌模型
NCI-H1299细胞系源自肺癌的淋巴结转移灶，因此具有相对相似的特性。因此，这些细胞可作为体外模型，用于研究肺癌生物学、细胞和分子机制，以及筛选和测试潜在的治疗药物。
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易于培养
NCI-H1299细胞在研究实验室中易于培养和维持，无需繁琐的细胞培养要求和操作流程。
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NCI-H1299 的 p53 和 KRAS 突变
NCI-H1299细胞缺乏p53基因表达，这使得细胞能够旺盛增殖。此外，它们还携带KRAS突变，该突变促进了细胞的生长、增殖、侵袭和迁移。基于这些特点，研究人员利用H1299细胞来探究与KRAS和p53突变相关的分子机制。
缺点
NCI-H1299细胞的缺点包括：
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组织特异性
NCI-H1299源自肺组织。因此，其应用范围主要局限于肺癌研究。它可能无法充分代表其他癌症类型的异质性和一般特征。
NCI-H1299细胞的研究应用
NCI-H1299细胞系在肺癌研究中得到广泛应用。本文将介绍该细胞系的几项有前景的应用。
- 癌症生物学：NCI-H1299细胞是研究癌症发生、进展及相关细胞和分子机制的绝佳研究工具。这些细胞携带特定的突变，使研究人员能够探索相关的癌细胞行为、信号传导通路和基因表达谱。 多项研究已利用 NCI-H1299 非小细胞肺癌细胞系来研究肺癌生物学。例如，2018 年的一项研究利用 NCI-H1299 细胞探究了参与肺癌细胞凋亡的信号通路。 研究人员发现，PI3K/AKT通路促进细胞增殖，而抑制该通路可导致癌细胞死亡[1]。同样，另一项研究则探讨了NCI-H1299上皮-间质转化（EMT）的机制。 该研究提出，一种名为SPARC（酸性、富含半胱氨酸的分泌蛋白）的细胞外蛋白参与了NCI-H1299细胞的EMT和迁移过程，从而促进了细胞的肿瘤发生——SPARC蛋白作为TGF-β1信号传导的介质发挥作用[2]。
- 药物发现与筛选：NCI-H1299作为一种人肺癌细胞系，被广泛用于评估潜在药物的毒性和疗效。此外，研究人员还利用该细胞系探究抗肿瘤药物的作用机制。 相关研究还利用这些细胞来识别潜在的药物靶点和耐药机制。例如，沈晓云及其同事开展的研究探讨了天然化合物布鲁西因D（BD）的抗癌潜力。研究结果表明，BD能显著抑制NCI-H1299细胞的增殖、侵袭和迁移。 因此，它可被视为治疗非小细胞肺癌的一种潜在辅助疗法[3]。同样，另一项研究评估了黄藜芦醇单独使用以及与顺铂化疗药物联合使用对NCI-H1299肺癌细胞的细胞毒性作用[4]。
以NCI-H1299细胞为研究对象的科研论文
以下列出了关于NCI-H1299肺癌细胞系的一些重要且被引用次数最多的研究论文。
通过提高活性氧（ROS）水平诱导吲哚-3-甲醇处理的H1299肺癌细胞凋亡
该文章发表于《人类与实验毒理学》（Human and Experimental Toxicology）期刊（2021年）。研究提出，吲哚-3-甲醇通过升高活性氧（ROS）水平诱导H1299细胞凋亡。
咖啡酸与紫杉醇联合使用具有协同抗癌活性，可增强非小细胞肺癌H1299细胞在体外和体内的凋亡
该研究于2018年发表在《细胞生理学与生物化学》期刊上。研究结果表明，咖啡酸与紫杉醇的联合应用在非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299中具有协同抗癌作用。
Tubeimoside-1对NCI-H1299细胞的抗肿瘤作用是通过microRNA-126-5p诱导VEGF-A/VEGFR-2/ERK信号通路的失活介导的
该研究论文发表于《分子医学报告》（2018）。该研究评估了三萜皂苷管蕊苷-1在NCI-H1299细胞系中的抗肿瘤效应及其潜在机制。
Pristimerin 可诱导 H1299 肺癌细胞凋亡并抑制其增殖与迁移
这篇发表于《癌症杂志》（2020年）的文章提出，天然化合物普里斯蒂梅林可抑制NCI-H1299细胞的增殖和迁移。
这项发表于《医学肿瘤学》（2019年）的研究探讨了VIPR1基因过表达对NCI-H1299腺癌细胞系的潜在影响。
NCI-H1299细胞系相关资源：实验方案、视频等
以下是一些关于 NCI-H1299 细胞的在线资源。
- NCI-H1299转染：本视频将讲解NCI-H1299细胞系的瞬时转染操作流程。
- 贴壁细胞系的传代：本视频将帮助您了解贴壁细胞的一般传代操作流程。
以下链接包含 NCI-H1299 细胞的细胞培养信息。
- NCI-H1299细胞系：此链接可帮助您了解NCI-H1299细胞的传代和转染操作规程。
有关 NCI-H1299 细胞系的常见问题
参考文献
- Gu, J. 等，EGCG通过抑制PI3K/Akt信号通路诱导肺癌细胞凋亡的研究。《欧洲医学与药理科学评论》，2018年，22(14)：第4557-4563页。
- Sun, W. 等，SPARC作为TGF-β1的介导因子，促进A549和H1299肺癌细胞的上皮-间质转化。《Biofactors》，2018年，44(5)：第453-464页。
- 沈，X.-Y. 等，布鲁塞因D治疗非小细胞肺癌H1299细胞机制的研究。《世界中医杂志》，2020年，6(4)：第500页。
- Long, B. 等，黄酮醇及其与顺铂联合应用对人转移性肺癌H1299细胞的细胞毒性作用。《医学与医学研究进展》，2019年，30(9)：第1-15页。