RAW 264.7 細胞系在巨噬細胞與免疫學研究中的應用
RAW 264.7 細胞系作為小鼠巨噬細胞的可靠體外模型，在免疫學研究領域中扮演著至關重要的角色。該細胞系源自一隻雄性 BALB/c 小鼠，經由阿貝爾森小鼠白血病病毒轉化後，形成了一種巨噬細胞樣細胞系。 由於其功能穩定性，以及兼具吞噬作用與胞飲作用的固有能力，RAW 264.7 細胞對於研究宿主與病原體之間的相互作用至關重要，因而成為免疫學研究領域的基石 [1,2]。
- 培養基
- 請參閱產品頁面
- 倍增時間
- 請參閱產品頁面
- 生長類型
- 附著型
- 生物安全等級
- BSL-1
形態特徵與生長行為
經觀察，RAW 264.7 細胞呈現半附著生長型態，傾向形成紡錘狀的附著細胞以及球狀的懸浮活細胞，細胞直徑介於 10 至 20 µm 之間。 這種多形性特質以及對培養條件的適應能力，使 RAW 264.7 細胞成為實驗操作與觀察的萬用工具。
免疫功能與抗原呈遞
作為抗原呈遞細胞，RAW 264.7 細胞在免疫系統中扮演著關鍵角色。其功能不僅限於簡單的病原體識別，更延伸至抗原的處理與向 T 細胞的呈遞，從而協調全面的免疫反應。此動態過程有助於更深入地理解免疫系統如何識別並中和外來物質。
巨噬細胞極化：M0、M1 與 M2 範式
RAW 264.7 細胞在其基礎狀態下作為 M0 巨噬細胞，具備極其卓越的分極能力，可分化為促炎性 M1 或抗炎性 M2 表型。 這種極化能力為研究人員提供了一個模型，用以研究各種細胞因子和環境因素對巨噬細胞功能及免疫反應的影響與作用 [3,4]。
破骨細胞生成與骨重塑
儘管 RAW 264.7 細胞本身並非破骨細胞，但在研究破骨細胞生成（即破骨細胞形成過程）方面卻發揮了關鍵作用。這些細胞有助於探索破骨細胞的基因表達及其對受體活化的反應。 這項研究對於理解骨質疏鬆症等疾病的病理生理學具有深遠意義，其中骨重塑失調正是這些疾病的顯著特徵。
關於 RAW 264.7 的細胞培養資訊
在開始實驗之前，您必須了解關於這個強大細胞系的一些基本資訊。您知道 RAW 264.7 細胞的倍增時間是多少嗎？ 這些細胞的接種密度是多少？它們屬於貼壁細胞嗎？此外，RAW 264.7 的最佳生長條件是什麼？繼續閱讀，您將找到操作這條非凡細胞系所需的所有答案！
細胞培養資訊
RAW 264.7 細胞系
細胞倍增時間
11 至 30 小時
貼壁或懸浮
主要為貼壁型，並含有部分懸浮細胞群
接種密度
4 × 10⁴ 細胞/cm²
建議培養基
RPMI 1640 培養基，添加 10% 胎牛血清及 L-谷氨醯胺（2.5 mM）
最佳生長條件
含 5% 二氧化碳、溫度 37°C 的加濕培養箱
培養基更換
每週 2 至 3 次
儲存
液態氮的氣相中
CM-1 或 CM-ACF
冷凍過程
緩慢冷凍
解凍過程
在 37°C 水浴中快速攪拌
生物安全等級
建議使用 BSL-2 級實驗室
不同融合度的鼠源 RAW 264.7 巨噬細胞。
RAW 264.7 感光元件的優缺點
優點
- 培養簡便：RAW 264.7 細胞系在實驗室中易於培養與維護，無需任何複雜的要求。
- 特性明確：RAW 264.7 是一條特性明確的細胞系，這意味著其表型與功能特徵均十分穩定。
- 巨噬細胞的體外模型：由於 RAW 264.7 細胞屬於巨噬細胞，因此展現出吞噬作用和胞飲作用等巨噬細胞特有的基本功能。因此，它們常被用作巨噬細胞的體外模型。
- 分化為破骨細胞：RAW 264.7 細胞可透過特定分子因子分化為破骨細胞。這些分化後的細胞能夠執行骨重塑，其功能與破骨細胞相似。
缺點
- 對原代巨噬細胞的代表性不足：作為轉化細胞系，RAW 264.7 可能無法準確反映原代巨噬細胞的特徵，且在基因表達、表型及功能方面可能存在某些差異。
- 藥物篩選的限制：RAW 264.7 細胞可能不適用於所有類型的藥物篩選試驗，且其對某些藥物的反應可能與原代巨噬細胞不同。
- 細胞黏附力強：RAW 264.7 細胞會強烈黏附於培養瓶表面，有時較難剝離。
RAW 264.7 細胞在巨噬細胞模擬與免疫學研究中的應用
建模細胞免疫反應
RAW 264.7 細胞系反映了真實巨噬細胞的功能，是研究細胞對病原體和免疫刺激反應的關鍵模型。 一項突顯此方面的研究評估了熱滅活乳酸菌對這些細胞的免疫調節和抗氧化作用，為免疫系統調節提供了重要發現 [5 ]。
與此相輔相成的是，2019 年進行的一項研究闡明了 RAW 264.7 細胞接觸西伯利亞玉竹（Polygonatum sibiricum）多醣所產生的免疫學影響。 該研究得出結論，這些化合物透過激活 NF-κB/MAPK 訊號傳導途徑來觸發免疫反應，從而提供了深入的分子層面理解 [6]。
破骨細胞生成研究
RAW 264.7 細胞作為破骨細胞分化研究的替代模型，有助於闡明破骨細胞的行為及分化途徑。此類研究拓展了我們對骨吸收機制及骨質疏鬆症病理機制的認識。研究人員常運用先進的成像技術，以監測細胞內的變化並分析這些細胞內的血紅素代謝。
深入理解破骨細胞生成之分子機制
儘管 RAW 264.7 細胞的主要作用是作為巨噬細胞模型，但也常被用於體外破骨細胞生成研究。 透過誘導這些細胞展現破骨細胞樣特徵，研究人員得以深入了解分化過程及破骨細胞前體的行為；不過，在進行此類研究時，務必考量該細胞系的固有特性與來源。
天然產物生物活性篩選
天然產物的生物活性篩選是 RAW 264.7 細胞另一項擅長的應用領域。例如，一項韓國研究利用該細胞系探究某種草藥混合物的免疫刺激特性，便展現了該細胞系在識別天然物質中生物活性化合物方面的有效性 [ 7 ]。
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使用 RAW 264.7 細胞的研究論文
關於小鼠巨噬細胞系 RAW 264.7 的研究文獻眾多：
- 西伯利亞玉竹（Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute）所含的多醣，可透過 NF-κB/MAPK 訊號傳導路徑在 RAW 264.7 細胞系中誘導免疫反應： 本研究提出，從西伯利亞玉竹（Polygonatum sibiricum）植物中提取的多醣，可透過調節 NF-κB/MAPK 訊號傳導級聯反應，在小鼠巨噬細胞系 RAW 264.7 中觸發免疫反應。
- Tinospora crispa 萃取物及其主要化合物對 RAW 264.7 巨噬細胞免疫功能的免疫調節作用： 這篇發表於《國際免疫藥理學》（International Immunopharmacology）期刊的文章指出，Tinospora crispa 植物萃取物及其主要成分對 RAW 264.7 巨噬細胞系具有免疫調節及免疫刺激作用。
- 熱滅活乳酸菌透過誘導型一氧化氮合酶與環氧化酶-2 抑制 RAW 264.7 細胞中一氧化氮的生成： 本研究提出，由於熱滅活乳酸菌具備免疫調節與抗氧化特性，因此有望應用於益生菌產品的合成。研究人員利用 RAW 264.7 細胞來研究這些生物活性。
- 中草藥配方對 RAW 264.7 巨噬細胞免疫反應增強作用的研究：本研究採用 RAW 264.7 細胞，探討名為 KM1608 之中草藥配方的免疫刺激作用。研究結果顯示，KM1608 具有作為潛在免疫反應增強劑的潛力。
- 對哥倫比亞傳統醫學所用植物的篩選揭示了角果葫蘆（Physalis angulata）花萼的抗炎潛力：這篇發表於《沙烏地生物科學期刊》（Saudi Journal of Biological Sciences）的論文，利用脂多醣（LPS）刺激的 RAW 264.7 細胞，探究了 10 種哥倫比亞常見傳統藥用植物的抗炎潛力。
RAW 264.7 細胞：資源、操作指南、影片及其他資訊
RAW 264.7 細胞常被用於轉染研究。以下資源說明了針對 RAW 264.7 細胞系所採用的各種轉染方法。
- RAW 264.7 細胞轉染：本網站將提供使用 Lipofectamine 試劑轉染 RAW 264.7 巨噬細胞的操作流程。
- 轉染操作流程：這篇已發表的文章詳述了 RAW 264.7 細胞的轉染操作流程。
- RAW 264.7 細胞的高效轉染方法：本文件介紹了另一種運用 RAW 264.7 細胞的實用轉染方法。
與 RAW 264.7 細胞系相關的影片
- RAW 264.7 細胞培養：本影片說明 RAW 264.7 細胞的傳代操作流程。
- 轉染方法：本影片介紹將報告基因轉染至 RAW 264.7 細胞的過程。
關於 RAW 264.7 細胞系的必讀常見問題：深入探討巨噬細胞模擬與破骨細胞生成研究
RAW 264.7 細胞系源自一隻雄性 BALB/c 小鼠因阿貝爾森鼠白血病病毒（A-MuLV）誘發之腫瘤所產生的腹水。
RAW 264.7 細胞之所以被用作巨噬細胞的模型，是因為它們能夠執行吞噬作用和胞飲作用等關鍵功能，這些功能正是先天免疫反應的體現。
是的，雖然 RAW 264.7 細胞並非破骨細胞，但可用於研究破骨細胞生成過程及破骨細胞相關基因的表達，這有助於我們了解骨骼健康以及骨質疏鬆症等疾病。
RAW 264.7 細胞會透過模仿巨噬細胞的反應來回應微生物刺激，因此非常適合用於研究宿主與病原體之間的相互作用，以及細胞對各種生物系統的反應。
RAW 264.7 細胞中的細胞因子產生，對於理解發炎過程以及參與免疫反應的細胞訊號傳導路徑（例如 NF-κB/MAPK 路徑）至關重要。
不，RAW 264.7 細胞並非原代細胞；它們是一種永生化細胞系。所謂原代細胞，是指直接從活體組織中取出的細胞，在培養環境中的壽命有限。
RAW 264.7 細胞在能支持其生長的特定培養基中進行培養，並在受控的溫度與氣壓條件下維持，以確保其功能穩定性，供實驗使用。
RAW 264.7 細胞在基礎狀態（M0）下，可根據培養過程中所接觸的刺激，被極化為呈現 M1 型的促炎特性或 M2 型的抗炎特性。
是的，RAW 264.7 細胞常被用來評估天然產物（包括植物來源化合物）的生物活性，以探究其潛在的免疫調節或治療效果。
典型的標記物包括 F4/80 和 CD11b，這些標記物通常用於確認 RAW 264.7 細胞的巨噬細胞樣表型，此外還有其功能性標記物，例如抗酸磷酸酶和吞噬活性。
參考文獻
- Taciak, B. 等，透過連續傳代評估 RAW 264.7 細胞系的表型與功能穩定性。《PLoS One》，2018 年，13(6)：頁 e0198943。
- Wang, S. 等，炎症性巨噬細胞透過調節 Notch 訊號傳導路徑，阻斷骨細胞的成熟與礦化。《Molecular Medicine》，2022 年，28(1)：第 102 頁。
- Orekhov, A.N.等人，單核細胞分化與巨噬細胞極化。《Vessel Plus》，2019年，第3期：第10頁。
- Khabipov, A. 等，胰臟癌細胞對 RAW 264.7 巨噬細胞的極化作用——研究促腫瘤巨噬細胞的模型。《抗癌研究》，2019 年，39(6)：第 2871-2882 頁。
- Kang, C.-H. 等，熱滅活乳酸菌透過 RAW 264.7 細胞中的誘導型一氧化氮合酶與環氧化酶-2 抑制一氧化氮的產生。《益生菌與抗菌蛋白》，2021。 13(6)：第 1530-1538 頁。
- 張，J.等人，來自西伯利亞玉竹（Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute）的多醣透過NF-κB/MAPK途徑在RAW264.7細胞系中誘導免疫反應。 《RSC Advances》，2019年。9(31)：第17988-17994頁。
- Trinh, T.A.等人，中草藥配方對RAW 264.7巨噬細胞免疫反應增強之影響。《Biomolecules》，2020年，第10卷第3期：第424頁。