發佈日期：2023 年 | 最後審閱日期：2026 年 5 月

細胞庫最佳實務綜合指南

細胞培養管理概覽

有效管理細胞培養對於維持其完整性，以供研究及治療應用至關重要。細胞系的持續或長期培養可能導致各種併發症，例如：

• 微生物污染：開放式培養容易受到各種微生物感染，進而改變細胞的行為與存活能力。
• 特性改變：關鍵的細胞特性（例如抗原表達或抗體產生）可能會隨時間流逝而喪失。
• 基因變異：已知核型不穩定的細胞系可能發生基因組不穩定性，導致實驗結果不可靠。
• 壽命限制：某些細胞類型在進入衰老並停止增殖之前，其分裂次數是有限的。
• 交叉污染風險：長期培養會增加某一細胞系污染另一細胞系的風險，導致數據失準。
• 資源密集性：長期培養需要更多耗材並增加人力成本，導致成本顯著上升。

細胞庫的策略性做法

細胞庫系統是一種旨在減輕上述風險的策略性方法。建議採用的主細胞庫系統包含以下步驟：

1. 初始隔離：新取得的細胞培養物應在嚴格的隔離條件下進行隔離與處理，以防止實驗室污染。
2. 建立代表庫：經過初步培養擴增後，應將少量安瓿（3-5 支）進行冷凍保存，作為緊急備援的「代表庫」。
3. 主細胞庫建立：從代表株安瓿擴增培養物，以建立主細胞庫，其包含較多安瓿（10–20 支或更多，視預估用量而定）。
4. 嚴格的品質控制：從主細胞庫中抽取一部分樣本進行徹底的品質控制測試，包括評估細胞存活率、確認無微生物污染物，並視情況進行病毒檢測及真偽鑑定。
5. 工作細胞庫的建立：隨後從主細胞庫中取出一部分，用以建立工作細胞庫，此為進行活躍研究與應用的主要來源。

詳細的品質控制規範

品質控制是維護細胞庫的關鍵環節，其內容涵蓋：

• 存活率與計數檢測：確保細胞存活且數量充足。
• 微生物篩檢：定期檢測細菌、真菌及支原體，以防止細胞培養受污染。
• 鑑定程序：透過 DNA 指紋分析等方法確認細胞系的身份。

儲存與使用建議

適當的儲存條件如下：

• 專用儲存設施：使用專為儲存細胞庫而設計的設施，例如液氮槽或電動冷凍櫃，以防止交叉污染並確保長期存活率。

一致性與品質保證：

• 細胞材料的一致性：細胞庫系統可確保所有用於實驗的材料均來自一致的來源。
• 受控傳代次數：透過使用傳代次數在受控範圍內的細胞，可將實驗變異性降至最低。
• 即時培養實務：僅在必要時進行細胞培養，有助於保留細胞系的原始特性，並降低維持連續培養所產生的相關成本。