Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026

Entendendo o “número de passagem”

O conceito de “número de passagem” é fundamental na cultura celular e se refere ao número de vezes que uma linhagem celular foi subcultivada ou transferida para um meio de crescimento novo após seu reativamento inicial a partir da criopreservação ou do recebimento de um banco de células de referência. Essa métrica é essencial para rastrear a linhagem e o histórico de uma cultura celular.

Visão geral do processo

Na prática rotineira de cultura celular, quando as células atingem uma determinada densidade, elas são transferidas para um novo meio a fim de sustentar o crescimento e evitar a superconfluência. Cada uma dessas transferências é registrada como uma passagem.
Tradicionalmente, quando recebíamos uma linhagem celular, por exemplo, na passagem 60 do depositante, continuávamos a partir desse número de passagem, incrementando-o a cada subcultura. Essa prática, embora mantivesse uma continuidade histórica, muitas vezes levava a números elevados de passagem desde o início. Dado o uso extensivo e, muitas vezes, de décadas de certas linhagens celulares, como a linhagem HeLa estabelecida em 1951, não é viável determinar o número total de passagens desde o início da linhagem.
Para aumentar a clareza e a qualidade em nossos processos de cultura celular, revisamos essa abordagem no início de 2023. Agora, quando iniciamos uma cultura a partir de um novo frasco, independentemente do número de passagem do depositante, reiniciamos a contagem a partir da primeira passagem para cada lote fabricado.

Fundamentação

A passagem é um procedimento vital para garantir a saúde e a utilidade das culturas celulares para pesquisa. Quando as células se proliferam excessivamente, elas sofrem inibição de contato, reduzindo sua taxa de proliferação, o que pode afetar negativamente os resultados experimentais. Para mitigar esses problemas, a Cytion implementa controles rigorosos sobre as densidades celulares nas quais a subcultura ocorre, mantendo assim baixos números de passagem durante a fabricação de suas linhagens celulares. Essa precaução ajuda a prevenir os efeitos adversos do excesso de passagens, como anomalias morfológicas, alterações na taxa de crescimento e deriva genética, que podem fazer com que as células se diferenciem significativamente de seu estado original. Períodos prolongados de subcultura também podem aumentar o risco de contaminação microbiana.

Nosso Compromisso

Garantimos que as células fornecidas aos pesquisadores sejam o mais próximo possível da composição genética e das características fenotípicas originais, aumentando a confiabilidade dos dados experimentais. Além disso, ao documentar meticulosamente cada passagem, a Cytion contribui para a rastreabilidade e a reprodutibilidade da pesquisa, um compromisso que reflete os altos padrões de prática em cultura celular. Os pesquisadores são incentivados a manter registros precisos dos números de passagem, tanto nos recipientes de cultura quanto em seus cadernos de laboratório, como referência para a saúde e o histórico de suas culturas celulares.

Dicas e erros comuns

Seguir o protocolo correto é essencial, mas compreender as armadilhas comuns pode ser igualmente importante. Os procedimentos de cultura celular são sensíveis a pequenos desvios na técnica, no tempo e na qualidade dos reagentes. As dicas a seguir refletem as melhores práticas recomendadas pela equipe científica da Cytion com base em ampla experiência em cultura celular.

Sempre pré-aqueça os reagentes a 37 °C antes do uso para minimizar o choque térmico nas células.
Trabalhe com rapidez, mas com cuidado — minimize o tempo que as células passam fora da incubadora.
Use reagentes certificados e testados quanto à presença de micoplasma para evitar contaminações que possam comprometer os resultados experimentais.
Documente cada etapa, incluindo o número de passagem, a data e as observações da morfologia celular.
Valide seu protocolo com um pequeno experimento piloto antes de ampliar a escala, para evitar o desperdício de reagentes caros.

Reagentes recomendados da Cytion

A Cytion oferece uma linha de reagentes para cultura celular validados, projetados especificamente para apoiar este protocolo. Todos os reagentes são testados quanto ao desempenho com linhagens celulares comumente utilizadas e estão disponíveis com documentação completa. Acesse cytion.com/Media-Reagents para conhecer o portfólio completo.