Células U87MG – Pesquisa sobre glioblastoma utilizando as células U87MG e seu impacto nos estudos sobre câncer cerebral
A U-87 MG, linha celular primária de glioblastoma humano, é amplamente utilizada em pesquisas biológicas. Em particular, essas células são empregadas nos campos da neurociência e da imuno-oncologia.
- Meio de crescimento
- A linha celular U-87 MG é cultivada em EMEM (meio essencial mínimo de Eagle) suplementado com 1,0 g/L de L-glicose, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃, 1% de NEAA, 1 mM de piruvato de sódio e 10% de solução de FBS. O meio deve ser renovado a cada 2 a 3 dias.
- Tempo de duplicação
- As células U 87 MG apresentam um tempo de duplicação populacional que varia de 18 a 38 horas.
- Tipo de crescimento
- A U 87 MG é uma linhagem celular aderente. As células possuem formato alongado e crescem em monocamadas.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomende a U-87 MG
- Características gerais e origem da linhagem celular U-87 MG
- Informações sobre o cultivo das células U-87 MG
- Vantagens e desvantagens das células U-87 MG
- Aplicações de pesquisa com as células U-87 MG
- Encomende hoje mesmo sua linha celular de glioma U-87 MG
- Linha celular U-87 MG: Publicações de pesquisa
- Recursos para as células U-87 MG: protocolos, vídeos e muito mais
- Informações sobre a pesquisa com o glioma U-87 MG: perguntas frequentes
- Referências
- Perguntas frequentes
Características gerais e origem da linhagem celular U-87 MG
Esta seção abordará a origem e as características gerais da linhagem celular U-87 MG. Você aprenderá: O que são as células U-87 MG? De onde vêm as células U-87? Qual é a forma completa de U-87 MG? Qual é o tamanho das células U-87? Qual é a morfologia da linhagem celular U-87?
- A linhagem celular U87 é uma linhagem de glioblastoma, mais especificamente de astrocitoma. Ela foi estabelecida em 1966 na Universidade de Uppsala. As células foram obtidas de um homem caucasiano de 44 anos que sofria de glioblastoma. Essa linha celular é formalmente chamada de U 87 MG, sigla para Uppsala 87 Malignant Glioma.
- As células U 87 MG apresentam morfologia semelhante à das células epiteliais.
- O diâmetro das células U 87 MG varia entre 12 e 14 µm.
- Essa linhagem celular de glioblastoma humano é hipodiplóide e possui um número modal de cromossomos de 44 em aproximadamente 48% da população celular. No entanto, também existem ploidiões mais elevados em 5,9% da população celular.
Informações sobre o cultivo de células U-87 MG
Antes de trabalhar com células U 87 MG, você deve conhecer os seguintes pontos-chave para a cultura dessas células de glioblastoma. Em particular, você deve saber: Qual é o tempo de duplicação populacional das células U 87 MG? Que meio é utilizado para a cultura das células U87? Qual é a densidade de semeadura da linhagem celular U-87 MG?
Pontos-chave para a cultura de células U-87 MG
Tempo de duplicação populacional:
As células U 87 MG apresentam um tempo de duplicação populacional que varia de 18 a 38 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A U 87 MG é uma linha celular aderente. As células possuem formato alongado e crescem em monocamadas.
Densidade de semeadura:
Recomenda-se que a linha celular de glioblastoma U 87 MG seja semeada a uma densidade celular de 1 x 10⁴ células/cm². As células U 87 aderentes são lavadas com PBS 1x e incubadas com solução de Accutase. Em seguida, as células dissociadas são centrifugadas e recuperadas. As células são cuidadosamente ressuspensas e adicionadas a novos frascos contendo meio de crescimento.
Meio de crescimento:
A linhagem celular U 87 MG é cultivada em EMEM (meio essencial mínimo de Eagle) suplementado com 1,0 g/L de L-glicose, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃, 1% de NEAA, 1 mM de piruvato de sódio e 10% de solução de FBS. O meio deve ser renovado a cada 2 a 3 dias.
Condições de crescimento:
As células U-87 MG requerem uma incubadora umidificada com suprimento de 5% de CO₂ e temperatura de 37 °C para um crescimento ideal.
Armazenamento:
As células U87 são mantidas na fase de vapor de nitrogênio líquido ou a temperatura inferior a -150 °C para preservar a viabilidade máxima das células de glioblastoma.
Processo de congelamento e meio:
Os meios de congelamento CM-1 ou CM-ACF são adequados para o congelamento das células U87 MG. Recomenda-se um processo de congelamento lento, pois evita que as células sofram qualquer choque e protege a viabilidade celular.
Processo de descongelamento:
Os frascos congelados da linhagem celular U-87 MG são descongelados em banho-maria a 37 °C. As células recebem meio de crescimento, são ressuspensas e transferidas para novos frascos de cultura. Alternativamente, as células U87 podem ser centrifugadas para remoção do meio de congelamento e, em seguida, cultivadas.
Nível de biossegurança:
É necessário o nível de biossegurança 1 para o manuseio de culturas de células U-87 MG.
Vantagens e desvantagens das células U-87 MG
Quando pensamos em uma linhagem celular, a primeira coisa que nos vem à mente é: quais são as vantagens de usar células U-87 MG? Quais são as desvantagens das células U-87?
Vantagens
As linhagens celulares U-87 MG são amplamente utilizadas em pesquisas. Algumas vantagens associadas a essa linhagem celular são:
Vantagens
- Fácil de cultivar: as células U-87 MG são fáceis de manter em cultura. Elas não exigem requisitos de cultura celular exigentes ou complicados.
- Homogeneidade: a U-87 MG é uma linha celular homogênea. A maioria das células de uma população possui a mesma composição genética e, portanto, compartilha características semelhantes. Essas células são utilizadas para o estudo de processos celulares, triagem de medicamentos e testes.
- Bem caracterizada: essa linha celular de glioblastoma é bem caracterizada quanto às características de crescimento, morfologia e expressão gênica, o que a torna uma valiosa ferramenta de pesquisa.
Desvantagens
- Aplicabilidade limitada: A U-87 MG é uma linhagem celular de glioblastoma; portanto, suas aplicações limitam-se principalmente ao estudo de glioblastomas e dos mecanismos moleculares subjacentes. Ela pode não ser adequada para a investigação de outros tipos de câncer.
Aplicações de pesquisa com células U-87 MG
A linhagem celular de glioblastoma U87MG é amplamente utilizada em estudos sobre câncer, particularmente na pesquisa do glioblastoma. Algumas das aplicações de pesquisa das células U 87 MG são:
- Pesquisa em biologia do câncer: A linhagem celular U-87 é utilizada para estudar o crescimento e o desenvolvimento do câncer, os mecanismos moleculares subjacentes, as vias de sinalização e o microambiente tumoral. Um estudo publicado em 2020 utilizou um modelo in vitro de glioblastoma, a linhagem celular U-87 MG, para investigar o gene BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) como alvo terapêutico. Os resultados mostraram que o gene BMAL1 inibe a proliferação, a migração e a invasão das células do glioblastoma ao suprimir a expressão gênica da ciclina B1, da metaloproteinase-9 e da fosfo-AKT [1]. Outra pesquisa realizada em 2019 utilizou a linhagem celular U87 e investigou que a regulação negativa da expressão do fator de transcrição LITAF (fator de necrose tumoral alfa induzido por lipopolissacarídeo) pode aumentar a radiossensibilidade das células de glioma por meio da regulação positiva da via FOXO-1. O LITAF também é conhecido como gene 7 induzido por p53 (PIG7) [2].
- Descoberta e desenvolvimento de medicamentos: as células U-87 MG podem ser utilizadas para fins de triagem e testes de medicamentos, permitindo que os pesquisadores identifiquem novos medicamentos anticâncer em potencial e avaliem sua eficácia e toxicidade. Uma pesquisa utilizou a linhagem celular de glioblastoma U-87 MG para avaliar o potencial anticâncer e antioxidante do extrato de Inula helenium (L.) [3]. Da mesma forma, outra publicação mencionou o uso da linhagem celular U-87 para testar o efeito citotóxico e apoptótico de extratos vegetais [4]. Além disso, uma pesquisa publicada em 2018 estudou o efeito citotóxico de alcalóides sesquiterpênicos extraídos de plantas do gênero Nuphar em linhagens celulares U-87 MG sensíveis e resistentes a medicamentos [5].
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Linha celular U-87 MG: Publicações científicas
Aqui estão algumas publicações de pesquisa de destaque que abordam a linha celular U-87 MG.
Este artigo, publicado na revista *Neuroreport* em 2018, propôs que a hipóxia poderia aumentar a migração e a invasão das células do glioblastoma humano por meio da regulação da via de sinalização PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Este estudo foi publicado na revista Frontiers in Pharmacology em 2020. Os resultados da pesquisa indicam que um flavonóide, o eriodictiol, exerce efeitos anticâncer na linhagem celular U87 e suprime a proliferação celular e a metástase. O composto exerce suas propriedades antitumorais por meio da modulação da via PI3K/Akt/NF-κB.
Esta pesquisa publicada na revista *Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine* (2018) sugere que uma fórmula fitoterápica chinesa chamada pílula Xihuang pode induzir a apoptose em células U87 ao atuar na cascata Akt/mTOR/FOXO1 ativada por ROS.
O LITAF aumenta a radiossensibilidade de células de glioma humano por meio da via FoxO1
Este artigo científico foi publicado na revista *Cellular and Molecular Neurobiology* em 2019. O estudo propôs que um fator de transcrição, o LITAF, regula negativamente e aumenta a radiossensibilidade das células de glioma ao regular a via de sinalização FOXO-1.
Este artigo foi publicado na revista *Biointerface Research in Applied Chemistry* (2019). Os pesquisadores utilizaram células U87MG para investigar o efeito citotóxico das nanopartículas de PLGA carregadas com curcumina.
Recursos para células U-87 MG: protocolos, vídeos e muito mais
A linhagem celular de glioblastoma U87MG é utilizada em muitos laboratórios de pesquisa sobre câncer. Alguns recursos relacionados a essa linhagem celular são:
- Transfecção da linhagem celular U87: Este documento descreve um protocolo de transfecção para células U87MG.
- Transfecção da linhagem celular U 87 MG: este vídeo é um tutorial que explica, passo a passo, o protocolo de transfecção das células U87.
O recurso com o protocolo de cultura celular das células U87 está listado abaixo:
- Células U87 MG: Este link contém informações básicas sobre a linhagem celular U87 MG. Inclui protocolos resumidos de divisão, congelamento e descongelamento de células.
As linhagens celulares de glioma, como as células de glioblastoma U87, são células cultivadas derivadas de gliomas humanos, amplamente utilizadas na pesquisa sobre o câncer para estudar a biologia tumoral, a genética e as respostas aos medicamentos. Elas servem como modelos para compreender o comportamento tumoral e testar estratégias terapêuticas.
Uma linhagem celular isogênica refere-se a células derivadas de uma única célula, garantindo uniformidade genética. Na pesquisa sobre gliomas, as linhagens isogênicas fornecem um modelo consistente para o estudo de alterações genéticas e seus impactos no crescimento tumoral e na resposta aos tratamentos.
O perfil de DNA das linhagens celulares de glioma é fundamental para identificar alterações genéticas, compreender a evolução do tumor e desenvolver terapias direcionadas. Ele auxilia na classificação dos tumores com base em marcadores genéticos, como as mutações no gene IDH1.
O soro presente nos meios de cultura celular fornece fatores de crescimento, hormônios e nutrientes essenciais às células de glioma. No entanto, sua composição pode afetar a reprodutibilidade experimental, razão pela qual condições sem soro ou com soro definido são cada vez mais utilizadas.
A citotoxicidade celular em linhagens de células de glioma é avaliada por meio de ensaios como a citometria de fluxo, que mede a saúde, a viabilidade e a morte celular após o tratamento com medicamentos ou células imunológicas, como as células natural killer (NK).
A citotoxicidade das células NK desempenha um papel fundamental na pesquisa sobre o tratamento do glioma, uma vez que essas células são capazes de reconhecer e destruir células tumorais sem necessidade de sensibilização prévia. O estudo das interações entre as células NK e as células do glioma contribui para o desenvolvimento de estratégias destinadas a potencializar a eliminação do tumor mediada pelas células NK.
O tumor de origem fornece informações sobre o ambiente biológico original e as características do tumor. Compreender isso ajuda a correlacionar os resultados dos estudos com linhagens celulares com o comportamento real do tumor e o prognóstico do paciente.
A microscopia eletrônica permite a visualização detalhada das estruturas celulares e subcelulares em linhagens celulares de glioma, o que é fundamental para a análise da morfologia celular, do estado das organelas e das alterações decorrentes dos tratamentos.
O ligante do NKG2D é expresso nas células tumorais e se liga ao receptor NKG2D nas células NK, desencadeando uma resposta citotóxica. O estudo dessa interação ajuda a compreender e, potencialmente, potencializar as respostas imunológicas contra o glioma.
Os modelos de cultura celular em 3D reproduzem com maior precisão o microambiente tumoral, proporcionando uma compreensão mais profunda do crescimento, da migração e da resistência aos medicamentos do glioma. Essa técnica é fundamental para a realização de estudos translacionais em oncologia mais relevantes.
Referências
- Gwon, D.H., et al., O BMAL1 suprime a proliferação, a migração e a invasão das células U87MG por meio da regulação negativa da ciclina B1, da fosfo-AKT e da metaloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF aumenta a radiossensibilidade de células de glioma humano por meio da via FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., Atividades antioxidantes e anticancerígenas do extrato de Inula helenium (L.) na linhagem celular humana de glioblastoma U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh e A. Ghasempour, Citotoxicidade e indução de apoptose em células de câncer de mama, câncer de pele e glioblastoma por extratos vegetais. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Citotoxicidade de alcalóides sesquiterpênicos de plantas do gênero Nuphar em linhas celulares sensíveis e resistentes a medicamentos. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.