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Células THP-1 reveladas: pesquisa pioneira sobre leucemia

A linhagem celular THP-1, conhecida como Tohoku Hospital Pediatrics-1, é uma cultura espontaneamente imortalizada de células de leucemia monocítica humana. Ela serve como um modelo versátil no estudo da biologia dos monócitos, das atividades dos macrófagos e de seus papéis no câncer e na imunoterapia. A linhagem celular de leucemia humana THP-1 reflete as propriedades fisiológicas e funcionais dos monócitos do sangue periférico, tornando-a um recurso inestimável para a investigação de antígenos de diferenciação de monócitos e dos aspectos mais amplos da fisiologia dos monócitos. Este artigo oferece uma visão geral fundamental da linhagem celular THP-1.

📋 Linha celular THP-1 — Informações rápidas
Meio de crescimento
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Tempo de duplicação
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Tipo de crescimento
Adere
Nível de biossegurança
BSL-1

Informações gerais e origem da linhagem celular THP-1

Para quem está começando a trabalhar com a linha celular THP-1, é essencial compreender suas características básicas. Abordaremos sua definição, origem, morfologia, tamanho e propriedades genômicas.

Linha celular THP-1: A THP-1 é uma linha celular de leucemia monocítica humana derivada do sangue periférico de um paciente de 1 ano de idade diagnosticado com leucemia monocítica aguda (subtipo M5) em 1980.

Morfologia: As células THP-1 apresentam uma morfologia celular redonda, grande e singular.

Tamanho celular: Essas células são relativamente grandes, com um diâmetro médio superior a 21 µm.

Genoma e ploidia: A THP-1 é uma linhagem celular quase diploide; a análise do cariótipo revela um número diploide de cromossomos (n = 46).

Ilustração em 3D com precisão médica, representando um número excessivo de glóbulos brancos devido à leucemia.

Cultivo da linhagem celular de leucemia humana THP-1

O conhecimento adequado das características de uma linhagem celular simplifica seu processo de cultura. Esta seção fornece detalhes essenciais para a cultura e manutenção da linhagem celular THP-1, incluindo tempo de duplicação, meios de cultura, propriedades de aderência, densidade de semeadura, condições de crescimento, armazenamento e os processos de congelamento e descongelamento.

Tempo de duplicação: O tempo de duplicação das células THP-1 é de aproximadamente 35 horas, embora possa variar de 19 a 50 horas, dependendo das condições de cultura.

Aderência: As células THP-1 crescem em suspensão, mas podem se diferenciar em células aderentes semelhantes a macrófagos sob certas condições.

Densidade de semeadura: A densidade ideal de semeadura varia de 1,0 × 10⁵ a 1,5 × 10⁶ células viáveis/mL. Isso é obtido pela diluição das células de uma cultura já em crescimento até a densidade desejada.

Meio de crescimento: O meio recomendado é o RPMI 1640 suplementado com 10% de FBS, 1 mM de piruvato de sódio e 2,5 mM de L-glutamina.

Condições de crescimento: As células devem ser cultivadas em uma incubadora umidificada com suprimento de 5% de CO₂ a 37 °C.

Armazenamento: Para preservação de longo prazo, as células devem ser armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C para manter a viabilidade.

Processo de congelamento: Utilize os meios CM-1 ou CM-ACF para um método de congelamento lento, com redução de 1 °C na temperatura por minuto.

Processo de descongelamento: Agite rapidamente por 40 a 60 segundos em um banho-maria a 37 °C contendo um agente antimicrobiano e, em seguida, transfira para frascos com meio de crescimento.

Nível de biossegurança: As células THP-1 devem ser manuseadas em laboratórios de nível de biossegurança 1.

Esta descrição simplificada e cientificamente precisa fornece informações essenciais sobre a linhagem celular THP-1, auxiliando os pesquisadores em seu trabalho com essa valiosa ferramenta de pesquisa.

THP 1 cells at high and low confluency

Células THP-1 em alta e baixa confluência.

Explorando a biologia dos macrófagos com a linhagem celular THP-1: insights sobre diferenciação, função e dinâmica imunológica

Células THP-1 como modelo para a diferenciação de macrófagos e análise de suas funções

No que diz respeito às células THP-1, a diferenciação e as funções dos macrófagos assumem um significado único. As células THP-1 são uma linhagem de monócitos de leucemia humana comumente utilizada como modelo para estudar a biologia dos monócitos e macrófagos in vitro. Elas têm a capacidade de se diferenciar em células semelhantes a macrófagos quando tratadas com 12-miristato-13-acetato de forbol (PMA), imitando a transição pela qual os monócitos periféricos passam para se tornarem macrófagos no organismo. Após a diferenciação, os macrófagos derivados de THP-1 podem ser polarizados em macrófagos M1 ou M2 por meio de estímulos específicos, refletindo os estados pró-inflamatórios associados ao tipo M1 ou os estados anti-inflamatórios e de reparo tecidual associados ao tipo M2.

Esses macrófagos THP-1 diferenciados mantêm funções essenciais, como fagocitose, apresentação de antígenos e produção de citocinas, tornando-os um sistema in vitro inestimável para investigar os mecanismos moleculares e celulares subjacentes às respostas dos macrófagos a diversos sinais. Estudos utilizando células THP-1 proporcionaram insights sobre as atividades dos macrófagos, incluindo respostas a agentes infecciosos, interações com células cancerosas e o papel dos macrófagos na imunorregulação e na inflamação. As células THP-1 também servem como uma ferramenta poderosa para a triagem de potenciais compostos terapêuticos capazes de modular a atividade dos macrófagos e para a exploração dos aspectos imunológicos do envolvimento dos macrófagos na patogênese e na resolução de doenças.

Explorando a polarização e as atividades dos macrófagos com THP-1

As células THP-1 são fundamentais no estudo da polarização dos macrófagos humanos, um processo crucial para a compreensão das respostas imunológicas na saúde e na doença. Ao diferenciar as células THP-1 em macrófagos M0, M1 e M2, os pesquisadores podem examinar a ativação clássica dos macrófagos (M1), associada a respostas pró-inflamatórias, e a polarização dos macrófagos M2, que está ligada a processos anti-inflamatórios ou de cicatrização. Esse modelo de polarização de macrófagos permite uma compreensão mais profunda das funções desempenhadas pelos macrófagos em diversos contextos, incluindo o desenvolvimento de tumores e a resposta das células cancerosas às terapias.

THP-1 na pesquisa sobre o câncer: da apoptose à quimiorresistência

A linhagem celular THP-1 desempenha um papel fundamental no estudo da apoptose de células cancerosas e dos mecanismos subjacentes às respostas das células tumorais aos tratamentos. Ensaios que utilizam células THP-1, como os ensaios ADCP direcionados a células cancerosas específicas, ajudam a elucidar as interações entre macrófagos e células tumorais, incluindo células HepG2. Além disso, a investigação da atividade das caspasas nas células THP-1 contribui para nossa compreensão da apoptose, um processo crítico na progressão e no tratamento do câncer. O impacto de agentes quimioterápicos, como o etoposídeo, nas células THP-1 oferece insights sobre o papel dessas células na quimiorresistência, enfatizando ainda mais sua relevância na pesquisa sobre o câncer.

Células THP-1 e imunoterapia: direcionamento e resposta

No campo da imunoterapia, as células THP-1 são utilizadas para modelar a interação entre células imunes e o câncer, investigando como os macrófagos podem ser aproveitados para atacar células cancerosas, como as células Raji. O estudo da expressão de mRNA e proteínas nas células THP-1 auxilia na compreensão das complexas vias de sinalização envolvidas na resposta imunológica e do potencial para intervenção terapêutica. Essa pesquisa é fundamental para o desenvolvimento de estratégias que manipulem as atividades dos macrófagos com o objetivo de melhorar os resultados imunoterapêuticos.

A linhagem celular THP-1, por meio de sua capacidade de imitar monócitos periféricos e sofrer polarização macrofágica, tornou-se um pilar no estudo da leucemia humana, da biologia dos macrófagos e de suas implicações no câncer e na imunoterapia. Sua versatilidade e relevância em diversos ensaios a tornam uma ferramenta essencial para aprofundar nossa compreensão do papel do sistema imunológico na saúde e na doença.

Conheça nossa coleção de linhas celulares THP-1

Aplicações de pesquisa das células THP-1

Antes de trabalhar com qualquer linhagem celular, é preciso conhecer suas aplicações em pesquisa e entender como utilizar essas células em seu estudo. Aqui, mencionamos algumas aplicações de destaque da linhagem celular THP-1 na pesquisa.

A linha celular THP-1 é amplamente utilizada em pesquisas de imunologia, pois é capaz de se diferenciar em várias células imunológicas. Aqui estão alguns exemplos de estudos que utilizaram células THP-1:

  • Um estudo de 2018 utilizou células THP-1 para derivar macrófagos e investigar vias inflamatórias e mecanismos relacionados. Os pesquisadores descobriram que uma proteína chamada proteína de ligação à apolipoproteína A-1 (AIBP) poderia interromper as vias inflamatórias ao se ligar à apoA-1 e estabilizar o transportador A1 da cassete de ligação ao ATP (ABCA1) [3].
  • Outro estudo utilizou células THP-1 para desenvolver células semelhantes a monócitos e investigar os efeitos do ácido docosahexaenóico (DHA), um neuroprotetor, nessas células no contexto da doença de Alzheimer. O estudo explorou possíveis mecanismos subjacentes à interação da proteína beta-amilóide (Aβ) [4].
  • Macrófagos derivados da linhagem celular THP-1 foram utilizados em outro estudo para investigar o potencial promotor de tumores dos exossomos secretados por células de adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) [5].

Publicações que destacam as células THP-1 na pesquisa científica

Há uma grande quantidade de estudos sobre as células THP-1. Aqui, listamos alguns exemplos relevantes:

Recursos para a linhagem celular THP-1

Esta seção abordará todos os recursos online disponíveis sobre as células THP-1. Isso ajudará significativamente você a aprender os protocolos de cultura, diferenciação e transfecção.

Protocolos de cultura celular

Estes são alguns recursos que explicam os protocolos de cultura e manuseio das células THP-1.

  • Protocolo de cultura e diferenciação: este documento contém informações detalhadas e abrangentes sobre meios de cultura celular, subcultura, congelamento e descongelamento, além de protocolos de diferenciação dessas células.
  • Subcultivo de células THP-1: Este documento apresenta um protocolo de subcultivo para células THP-1.

Protocolos de transfecção

Vídeos relacionados às células THP-1

A THP-1 é uma linhagem celular amplamente cultivada. Há muitos recursos em vídeo disponíveis que explicam o manuseio e o cultivo dessa linhagem celular:

Esperamos que este artigo contenha informações adequadas sobre a cultura, a diferenciação, as vantagens e as aplicações em pesquisa das células THP-1. Se você planeja utilizar este modelo celular in vitro de leucemia mieloide aguda em sua pesquisa, considere fazer seu pedido conosco.

Perguntas frequentes sobre a linha celular THP-1

As células THP-1 são uma linhagem celular monocítica humana derivada de um paciente com leucemia monocítica aguda. Elas são amplamente utilizadas em pesquisas para estudar as funções dos monócitos/macrófagos, os mecanismos de imunidade e inflamação e a leucemia monocítica.

Os macrófagos THP-1 são formas diferenciadas dos monócitos THP-1. Quando tratadas com certos agentes, como o 12-miristato-13-acetato de forbol (PMA), as células THP-1 se diferenciam em macrófagos, tornando-as modelos úteis para o estudo da biologia e da função dos macrófagos.

Na pesquisa, as células THP-1 são utilizadas para estudar diversos aspectos da biologia dos monócitos/macrófagos, incluindo diferenciação, ativação, resposta a infecções e o papel dos macrófagos em processos patológicos, como o câncer e a inflamação.

Sim, as células THP-1 são utilizadas na pesquisa sobre o câncer para estudar o microambiente tumoral, especialmente o papel dos macrófagos associados ao tumor (TAMs), e para avaliar possíveis terapias anticâncer direcionadas às células monocíticas.
Os monócitos THP-1 correspondem ao estado indiferenciado das células THP-1. Eles se assemelham aos monócitos humanos primários e podem ser utilizados para estudar as funções dos monócitos e sua diferenciação em macrófagos ou células dendríticas.
A diferenciação das células THP-1 em macrófagos é comumente obtida por meio do tratamento das células com PMA. O processo envolve alterações na morfologia celular, nas propriedades de aderência e nas capacidades funcionais, simulando a transição de monócitos para macrófagos.
A cultura de células THP-1 envolve a manutenção das células em meios de cultura adequados, normalmente RPMI-1640 suplementado com FBS e antibióticos, sob condições controladas. É essencial o monitoramento regular quanto à contaminação, densidade celular e estado de diferenciação.
A linhagem celular THP-1 caracteriza-se por sua capacidade de se diferenciar em células semelhantes a macrófagos, expressar diversos marcadores de superfície, como CD11b e CD14, após a diferenciação, e por ser utilizada no estudo de respostas imunológicas e vias de sinalização em monócitos/macrófagos.
Tanto a linhagem celular THP-1 quanto a U937 são utilizadas como modelos para a leucemia mieloide aguda (LMA), mas diferem em origem e maturidade. As células THP-1 provêm do sangue de um paciente com LMA e representam um estágio inicial do desenvolvimento celular, enquanto as células U937, derivadas de um estágio mais maduro, têm origem tecidual [2].
Células THP-1 diferenciadas são aquelas que foram tratadas com agentes como o 12-miristato-13-acetato de forbol (PMA) para induzir sua transformação de monócitos em células semelhantes a macrófagos. Esse processo de diferenciação permite o estudo das funções dos macrófagos, como a fagocitose e a produção de citocinas.
As células THP-1 podem ser diferenciadas em macrófagos m0, que são macrófagos indiferenciados e em repouso. Após estimulação adicional, esses macrófagos m0 podem ser polarizados em macrófagos m1, que são pró-inflamatórios e desempenham um papel na resposta imune Th1, ou em macrófagos m2, que estão associados a respostas anti-inflamatórias e à reparação tecidual.
Sim, as células THP-1 expressam o CD14, um co-receptor para a detecção do lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano, que é comumente utilizado como marcador da linhagem dos monócitos e macrófagos.
As células THP-1 são diferenciadas em macrófagos por meio da adição de PMA ao meio de cultura, o que ativa a proteína quinase C, levando à aderência celular e à diferenciação em células semelhantes a macrófagos.

Referências

  1. Chanput, W., J.J. Mes e H.J. Wichers, Linha celular THP-1: um modelo celular in vitro para abordagem de modulação imunológica. International immunopharmacology, 2014. 23(1): p. 37-45.
  2. Chanput, W., V. Peters e H. Wichers, Células THP-1 e U937. O impacto dos bioativos alimentares na saúde: modelos in vitro e ex vivo, 2015: p. 147-159.
  3. Zhang, M., et al., A proteína de ligação à apolipoproteína A-1 inibe as vias de sinalização inflamatória ao se ligar à apolipoproteína A-1 em macrófagos THP-1. Circulation Journal, 2018. 82(5): p. 1396-1404.
  4. Yuan, S., et al., O DHA atenua a necroptose induzida por Aβ por meio da via de sinalização RIPK1/RIPK3 em monócitos THP-1. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2020. 126: p. 110102.
  5. Linton, S.S., et al., Efeitos promotores de tumor dos exossomos de células de câncer pancreático em macrófagos derivados de THP-1. PLoS One, 2018. 13(11): p. e0206759.


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