Células SiHa – Lançando luz sobre a pesquisa do câncer do colo do útero
As células SiHa são células de câncer cervical amplamente utilizadas na pesquisa biomédica. Elas são excelentes hospedeiras para transfecção e, portanto, adequadas para estudos de expressão gênica. Devido à sua origem humana e à sua relevância para o câncer cervical, essas células são empregadas principalmente em estudos de biologia do câncer, virologia e desenvolvimento de medicamentos.
- Meio de crescimento
- O meio mínimo essencial de Eagle (EMEM), contendo 10% de soro fetal bovino (FBS), 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e a solução salina balanceada de Earle (EBSS), é utilizado para o crescimento ideal das células SiHa. O meio é substituído de 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação das células SiHa é de aproximadamente 17 horas.
- Tipo de crescimento
- A SiHa é uma linhagem celular aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomendar SiHa
Características gerais e origem das células SiHa
Compreender a origem e as características gerais de uma linhagem celular é fundamental, pois isso influencia seu uso em sua pesquisa. Nesta seção do artigo, você aprenderá sobre a origem da linhagem celular SiHa, suas características distintivas e muito mais: O que é a linhagem celular cancerosa SiHa? O que são as células SiHa HPV? Qual é a origem da linha celular SiHa? Qual é a morfologia da SiHa?
- A SiHa, linha celular de carcinoma cervical, foi derivada de fragmentos de uma biópsia uterina primária de uma mulher asiática (55 anos) com câncer de células escamosas [1].
- A linha celular SiHa apresenta um cariótipo hipertriploide. A maioria das células possui um número médio de cromossomos entre 69 e 72. No entanto, cerca de 24% das células apresentam um número modal de cromossomos igual a 71.
- As células SiHa são positivas para o papilomavírus humano tipo 16. Elas apresentam integração de cerca de 1 a 2 cópias do genoma do HPV por célula [2].
- Essas células de câncer cervical apresentam morfologia epitelial.
Linha celular SiHa: Informações sobre o cultivo
Manter uma cultura de linha celular não é fácil até que você conheça todos os pontos-chave para sua cultura. Você deve saber: Qual é o tempo de duplicação das células SiHa? Qual é o meio de cultura das células SiHa? Como se cultiva a linha celular SiHa?
Pontos-chave para a cultura de células SiHa
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação das células SiHa é de aproximadamente 17 horas.
Aderentes ou em suspensão:
A SiHa é uma linha celular aderente.
Proporção de subcultivo:
A proporção de subcultivo para as células SiHa é de 1:2 a 1:4. Para a passagem, as células aderentes são lavadas com PBS 1x. Adiciona-se a solução de Accutase e as células são incubadas por 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. Em seguida, adiciona-se o meio de cultura e as células são centrifugadas. O sedimento celular é ressuspenso e as células são transferidas para um novo frasco para cultura.
Meio de crescimento:
O meio mínimo essencial de Eagle (EMEM), contendo 10% de FBS, 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e a Solução Salina Equilibrada de Earle (EBSS), é utilizado para o crescimento ideal das células SiHa. O meio é substituído de 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células SiHa são mantidas em uma incubadora umidificada a 37 °C com um suprimento de 5% de CO₂.
Armazenamento:
Os frascos congelados da linhagem celular SiHa de câncer cervical são armazenados a temperaturas inferiores a -150 °C em um freezer elétrico ou na fase de vapor de nitrogênio líquido para um período mais longo.
Processo de congelamento e meio:
O meio de congelamento CM-1 ou CM-ACF é utilizado para o congelamento das células SiHa. As células são congeladas por meio de um método de congelamento lento, que permite apenas uma redução de 1 °C por minuto, a fim de proteger a viabilidade das células.
Processo de descongelamento:
As células congeladas são mantidas por 40 a 60 segundos em um banho-maria a 37 °C até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Em seguida, é adicionado meio de crescimento fresco, e as células são centrifugadas para remover os componentes do meio de congelamento. O sedimento celular é ressuspenso, e as células são transferidas para um frasco de cultura para crescimento.
Nível de biossegurança:
É necessário um laboratório de nível 1 de biossegurança para manusear e manter culturas de células SiHa.
Vantagens e desvantagens da linhagem celular SiHa
Assim como outras linhagens celulares de carcinoma humano, a SiHa também possui algumas características distintas associadas a certas vantagens e desvantagens. A seguir, discutimos algumas das mais significativas.
Vantagens da linha celular SiHa de câncer cervical
- Modelo de câncer cervical
- Derivada do carcinoma espinocelular do colo do útero.
- Utilizada para estudar os mecanismos, o crescimento e o desenvolvimento do câncer cervical.
- Expressa os genes p53+ e pRB+, relacionados ao reparo do DNA, à regulação do ciclo celular e à supressão tumoral.
- Potencial tumorigênico
- As células SiHa são tumorigênicas e podem induzir tumores epidermoides de grau III, pouco diferenciados, em camundongos nude.
- Utilizadas para pesquisa in vivo sobre câncer e testes de tratamentos anticâncer.
Desvantagens das células SiHa
- Taxa de proliferação
- As células SiHa proliferam rapidamente, levando ao crescimento excessivo.
- Exigem passagens frequentes, o que aumenta o risco de instabilidade genética, o que pode afetar o comportamento celular ao longo do tempo.
Aplicações das células SiHa na pesquisa
A linhagem celular SiHa é amplamente utilizada na pesquisa sobre o câncer cervical. Algumas aplicações específicas dessa linhagem celular são discutidas a seguir.
- Estudos relacionados ao papilomavírus humano (HPV): As células SiHa são positivas para o HPV 16; portanto, são recursos valiosos para o estudo da infecção pelo papilomavírus humano, seus mecanismos moleculares e seu papel no desenvolvimento e na progressão do câncer cervical. Os pesquisadores também utilizam essas células para investigar a replicação viral, a integração e seu impacto nos processos das células-hospedeiras. Um estudo realizado em 2020 utilizou a linhagem celular SiHa para examinar o papel das oncoproteínas E6/E7 do HPV no desenvolvimento do câncer cervical, atuando sobre elas com a tecnologia CRISPR. Os resultados revelaram que a supressão dos genes E6/E7 causou inibição do crescimento das células SiHa e apoptose. Portanto, esses genes virais podem servir como alvos farmacológicos cruciais para o desenvolvimento de terapias contra o câncer cervical associado ao HPV [3].
- Biologia do câncer: as células SiHa servem como um modelo inestimável para o estudo da biologia do câncer cervical, incluindo o desenvolvimento, a progressão, a metástase e a invasão do câncer. Os pesquisadores utilizam essas células para explorar as mutações genéticas e as vias moleculares subjacentes que contribuem para o desenvolvimento e o crescimento do câncer cervical; por exemplo, um estudo utilizou células SiHa e descobriu que a regulação positiva da SEC61G (subunidade gama do translocão SEC61) estimula a proliferação das células do câncer cervical por meio da ativação da cascata MAPK [4].
- Triagem e testes de medicamentos: A SiHa é uma linhagem de células de câncer cervical amplamente utilizada para avaliar a eficácia de potenciais medicamentos anticâncer específicos para o câncer cervical associado ao HPV. Os pesquisadores exploram o potencial antiproliferativo, apoptótico e antimetastático de medicamentos utilizando essas células. Por exemplo, um estudo realizado em 2019 investigou o potencial citotóxico de extratos da fruta Vatica diospyroides Symington Tipo SS na linhagem celular de câncer cervical SiHa [5].
Células SiHa para sua pesquisa!
Publicações científicas que utilizam células SiHa
Algumas publicações científicas importantes e frequentemente citadas apresentam a linhagem celular SiHa de carcinoma espinocelular do colo do útero.
Esta publicação na revista *OncoTargets and Therapy* (2019) propôs que o composto natural aloe-emodina exerce efeitos apoptóticos associados ao HPV E6/E7 e ao metabolismo da glicose em células de câncer cervical SiHa.
Este artigo foi publicado na revista *Future Journal of Pharmaceutical Sciences* em 2022. Este estudo investigou as atividades antitumorais do extrato de folhas da planta *Excoecaria agallocha (L.)* na linhagem celular de câncer cervical SiHa.
Este estudo, publicado no Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), propôs que a molécula de 1,10-fenantrolina, ao se acoplar a nanopartículas de sulfato de zinco, exerce efeitos antiproliferativos significativos nas células SiHa.
Essa pesquisa foi publicada na revista Oncology Reports em 2019. O estudo revelou que a astragalosídeo IV, um produto natural, suprime a migração e a invasão das células SiHa ao modular as vias de sinalização PI3K e MAPK mediadas pelo TGF-β1.
Este estudo publicado na revista *Biomedicine & Pharmacotherapy* (2020) revelou que a IFI16 (proteína 16 induzível por interferon-gama) regula o gene PD-L1 por meio da ativação da via STING-TBK1-NF-kB, estimulando o crescimento das células SiHa do câncer cervical.
Recursos para a linha celular SiHa: protocolos, vídeos e muito mais
Aqui estão alguns recursos on-line sobre as células SiHa.
- Transfecção de células SiHa: este artigo científico contém um protocolo para a manutenção de células SiHa de câncer cervical e para a transfecção dessas células.
O link a seguir contém informações sobre o cultivo das células SiHa.
- Linha celular SiHa: este site contém muitos dados valiosos sobre a linha celular SiHa. Isso inclui informações sobre meios de crescimento, condições de cultura, protocolos para subcultura de células SiHa e manuseio de suas culturas proliferativas e criopreservadas.
Perguntas frequentes sobre as células de carcinoma cervical SiHa
As células SiHa são uma linhagem de células cancerosas humanas derivadas do carcinoma espinocelular do colo do útero. Elas são amplamente utilizadas em pesquisas sobre carcinomas do colo do útero, particularmente em estudos relacionados ao papilomavírus humano tipo 16 (HPV-16), conhecido por desempenhar um papel crucial na patogênese do câncer do colo do útero.
Nas células SiHa, o DNA do HPV-16 costuma estar integrado aos cromossomos da célula-hospedeira. Os locais de integração cromossômica do HPV podem ser fundamentais para a compreensão da progressão e da resistência ao tratamento do carcinoma cervical.
Sim, as células SiHa são um componente essencial do painel de células de câncer cervical utilizado para a caracterização biológica de células tumorais, para a análise dos efeitos de agentes quimioterápicos e para o desenvolvimento de novos medicamentos no âmbito da pesquisa científica.
Com certeza. As células SiHa, que contêm DNA do HPV integrado, são de valor inestimável para a hibridização in situ e outras técnicas de biologia molecular destinadas a estudar o papel do HPV no desenvolvimento de neoplasias cervicais e o potencial aumento dos efeitos da curcumina no tratamento do câncer.
As células SiHa são tumorigênicas em camundongos imunodeficientes, o que as torna um modelo adequado para o estudo da patogenicidade do carcinoma cervical e dos efeitos in vivo de possíveis agentes terapêuticos.
Referências sobre as células SiHa podem ser encontradas na literatura científica em revistas como *Cancer Research* (Cancer Res), *Biochemistry and Cell Biology*, *Journal of Cellular Physiology* e outras. Elas fornecem informações detalhadas sobre o uso das células SiHa no contexto de estudos do genoma do câncer, fenotipagem e análise das funções gênicas.
O perfil genético das células SiHa, incluindo a expressão de vários genes e a aquisição do CDV, contribui para a compreensão abrangente da etiologia do carcinoma cervical e para o desenvolvimento de terapias direcionadas.
As células SiHa são mantidas em cultura de células primárias, respeitando condições específicas de crescimento e requisitos do meio de cultura, a fim de preservar suas características e funcionalidade para fins de pesquisa.
Referências
- Melzer, C., J. von der Ohe e R. Hass, Revisão concisa: a interação entre o estroma mesenquimal/células semelhantes a células-tronco e células cancerosas oferece potencial terapêutico. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
- Ostrowska, K.M. et al., Investigação da influência do papilomavírus humano de alto risco na composição bioquímica de células de câncer cervical por meio de espectroscopia vibracional. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., Inibição do crescimento in vitro e in vivo de células de câncer cervical humano por meio da clivagem dos mRNAs E6/E7 do papilomavírus humano pelo sistema CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y., et al., A SEC61G promove a proliferação do câncer cervical ao ativar a via de sinalização MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Potencial anticâncer de extratos de frutas da espécie Vatica diospyroides tipo Symington SS e seu efeito na morte celular programada de linhagens celulares de câncer cervical. The Scientific World Journal, 2019. 2019.