Células RBL-2H3 – Importância das células RBL-2H3 na resposta alérgica e em estudos imunológicos
A linhagem celular RBL-2H3 é uma linhagem de leucemia basofílica derivada de ratos, utilizada em pesquisas imunológicas. Ela serve como um sistema modelo para o estudo da fisiologia, do comportamento e das funções dos mastócitos. Essas células também são empregadas no estudo de reações alérgicas, processos imunológicos, bem como em testes e desenvolvimento de medicamentos.
- Meio de crescimento
- Para a cultura das células RBL-2H3, utiliza-se o meio EMEM contendo 10% de FBS, 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e sal EBSS. O meio deve ser trocado de 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação dos mastócitos RBL-2H3 é de aproximadamente 50 a 60 horas.
- Tipo de crescimento
- A RBL-2H3 é uma linhagem celular aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-2
- Disponível na
- Cytion — Encomende a RBL-2H3
- Células RBL-2H3: Origem e características gerais
- Células RBL-2H3: Informações sobre cultura
- Vantagens e limitações da linhagem celular de basófilos RBL-2H3
- Linha celular RBL-2H3: um marco na pesquisa imunológica
- Linha celular RBL-2H3: Perguntas frequentes essenciais para pesquisadores
- Referências
- Linha celular RBL-2H3 para pesquisa imunológica avançada
- Células RBL-2H3: Publicações científicas
- Recursos para a linha celular RBL-2H3: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Células RBL-2H3: Origem e características gerais
Antes de utilizar uma linha celular de basófilos em sua pesquisa, é importante conhecer sua origem e características gerais. Esta seção do artigo fornecerá informações básicas sobre as células RBL-2H3. Por exemplo: O que são os mastócitos RBL-2H3? Por que utilizar células RBL-2H3? O que são as células RBL-2H3 na leucemia basofílica de ratos? Qual é a morfologia das células RBL-2H3? As células RBL-2H3 são imortais?
- As células RBL-2H3 são células de leucemia basofílica derivadas de células basofílicas de ratos Wistar em 1978, no Laboratório de Imunologia do Instituto Nacional de Pesquisa Odontológica.
- As células RBL-2H3 possuem o receptor de tirosina quinase c-kit e o receptor da protease II dos mastócitos (RMCP-II), o que as torna um modelo potencial de mastócitos. Portanto, são comumente chamadas de mastócitos, apesar de sua origem nos basófilos de ratos [1].
- Elas liberam histamina e outros mediadores após ativação e expressam receptores de IgE de alta afinidade.
- As células RBL-2H3 apresentam morfologia semelhante à dos fibroblastos.
Células RBL-2H3: Informações sobre cultura
Esta seção ajudará você a conhecer alguns aspectos fundamentais para a cultura da linhagem celular RBL-2H3. Você aprenderá: Qual é o tempo de duplicação das células RBL-2H3? Qual é a densidade de semeadura das células RBL-2H3? Qual é o protocolo de cultura das células RBL-2H3? Qual é o meio de congelamento da linha celular RBL-2H3?
Pontos-chave para a cultura de células RBL-2H3
Tempo de duplicação populacional:
O tempo de duplicação dos mastócitos RBL-2H3 é de aproximadamente 50 a 60 horas.
Adesiva ou em suspensão:
A RBL-2H3 é uma linhagem celular aderente.
Proporção de subcultivo:
Para as células RBL-2H3, a proporção de subcultura é mantida entre 1:2 e 1:4. As células aderentes são lavadas com solução 1x PBS sem magnésio e cálcio. Adiciona-se a solução de passagem Accutase, e as células são mantidas à temperatura ambiente por 10 minutos para se desprendarem do fundo do recipiente de cultura. Adiciona-se meio fresco, e as células são centrifugadas. As células colhidas são cuidadosamente ressuspensas em meio fresco e transferidas para novos frascos contendo meio de crescimento.
Meio de crescimento:
Utiliza-se meio EMEM contendo 10% de FBS, 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e sal EBSS para a cultura das células RBL-2H3. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células RBL-2H3 são cultivadas em uma incubadora umidificada, ajustada a uma temperatura de 37 °C e conectada a uma fonte de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células são armazenadas na fase de vapor de nitrogênio líquido ou a uma temperatura inferior a -150 °C em um freezer elétrico para preservar a viabilidade celular a longo prazo.
Processo de congelamento e meio:
Utiliza-se o meio de congelamento CM-1 ou CM-ACF para congelar as células RBL-2H3 por meio de um processo de congelamento lento. Resumidamente, esse método permite uma redução de 1 °C na temperatura por minuto e protege as células contra o choque térmico.
Processo de descongelamento:
As células RBL-2H3 são descongeladas em um banho-maria pré-ajustado (37 °C) por aproximadamente 60 segundos. Em seguida, as células são adicionadas a um meio de cultura fresco e centrifugadas. Essa etapa é essencial para remover os componentes do meio de congelamento. Em seguida, o sedimento celular é ressuspenso em um meio de crescimento, e as células são transferidas para um frasco para cultura.
Nível de biossegurança:
As células RBL-2H3 devem ser mantidas em laboratórios de biossegurança nível 1.
Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
Vantagens e limitações da linhagem celular de basófilos RBL-2H3
As células RBL-2H3 são comumente utilizadas em pesquisas imunológicas. Esta seção descreve suas principais vantagens e limitações.
Vantagens
- Fácil de cultivar: as células RBL-2H3 podem ser facilmente cultivadas e mantidas em ambiente laboratorial. Isso facilita a realização de experimentos econômicos e reproduzíveis, tornando-as uma escolha popular para estudos iniciais em imunologia.
Limitações
- Origem não humana: Por serem derivadas de basófilos de ratos, as células RBL-2H3 podem não reproduzir com precisão os processos biológicos humanos, o que pode limitar sua aplicabilidade em estudos de pesquisa específicos para humanos. Isso exige uma interpretação cautelosa dos dados ao extrapolar resultados para sistemas humanos.
- Modelo simplificado de mastócitos: Embora essas células ofereçam um modelo básico para o estudo das funções dos mastócitos, elas não representam totalmente a natureza complexa das interações dos mastócitos no sistema imunológico humano. Consequentemente, elas podem não modelar adequadamente os papéis multifacetados dos mastócitos nas respostas imunológicas ou em condições patológicas in vivo.
Linha celular RBL-2H3: um marco na pesquisa imunológica
Pesquisa com basófilos e mastócitos utilizando a linhagem celular RBL-2H3
A linha celular RBL-2H3, derivada de Rattus norvegicus, serve como um modelo fundamental para o estudo da biologia dos basófilos e mastócitos. Esses mastócitos de rato fornecem insights essenciais sobre a liberação de mediadores pelos mastócitos, fundamental para a compreensão de condições alérgicas, como a rinite alérgica. Por meio dessas células, os pesquisadores exploram a dinâmica dos receptores celulares e o estabelecimento de sinapses imunológicas, que são fundamentais para a resposta do sistema imunológico aos alérgenos. Um estudo interessante publicado em 2019 utilizou a linha celular RBL-2H3 e investigou os mecanismos por trás das reações pseudoalérgicas produzidas pela injeção de Qingkailing. O estudo constatou que a cascata de sinalização PI3K-RAC1 desencadeia parcialmente essa resposta alérgica nas células [2].
Dinâmica das sinapses imunológicas na pesquisa sobre alergias
Amplamente utilizadas na pesquisa em imunologia, as células RBL-2H3 são particularmente eficazes para investigar a dinâmica das sinapses imunológicas. Isso auxilia na elucidação dos processos de comunicação do sistema imunológico, com aplicações no estudo tanto dos mastócitos do sangue periférico quanto dos mastócitos peritoneais. Essa pesquisa é vital para uma compreensão abrangente da resposta imunológica, tanto em contextos sistêmicos quanto localizados.
Triagem de medicamentos e testes de toxicidade
Na triagem e nos testes de medicamentos, aproveita-se a capacidade de resposta das células RBL a vários estímulos, incluindo o estudo de como o H₂O₂ inibe as respostas mediadas por IgE. Essas células desempenham um papel essencial no desenvolvimento de tratamentos para doenças como infecções estreptocócicas, nas quais os estreptococos do grupo mitis inibem a ativação dos mastócitos. Além disso, pesquisadores avaliam os efeitos tóxicos de várias substâncias, incluindo produtos químicos, medicamentos e nanopartículas, utilizando esse modelo de mastócitos RBL 2H3. Por exemplo, um estudo recente (2022) avaliou a citotoxicidade de microplásticos de poliestireno nas células RBL-2H3. Os pesquisadores descobriram que os microplásticos danificam as organelas das células RBL-2H3 e promovem a morte celular [3]. Outro estudo de 2021 avaliou o potencial antialérgico e anti-inflamatório de um produto natural, a neferina, utilizando o modelo RBL 2H3 mc. O estudo revelou as boas propriedades antialérgicas e anti-inflamatórias do composto [4].
Metodologias avançadas em medição imunológica
A liberação consistente e mensurável de mediadores pelas células RBL-2H3 torna-as ideais para a fluorimetria, facilitando medições precisas e exatas, cruciais para o estudo de doenças e a avaliação de agentes terapêuticos.
A linhagem celular RBL-2H3, originária do Rattus norvegicus, é um recurso inestimável tanto na pesquisa fundamental quanto na aplicada no campo da imunologia. Ela oferece oportunidades significativas para o avanço do nosso conhecimento e do tratamento de doenças imunológicas.
Linha celular RBL-2H3 para pesquisa imunológica avançada
Células RBL-2H3: Publicações científicas
A seguir, apresentamos algumas publicações de pesquisa interessantes que abordam os mastócitos RBL-2H3:
Atividade inibitória da narirutina na desgranulação das células RBL-2H3
Este artigo científico foi publicado na revista Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). O estudo propôs que a narirutina, um composto natural, exerce efeitos inibitórios sobre a desgranulação das células RBL-2H3 por meio da regulação das vias de sinalização do NF-κB, da MAPK e da tirosina quinase.
Esta pesquisa publicada no International Journal of Molecular Sciences (2020) propôs que o composto apigenina suprime significativamente as respostas alérgicas e inflamatórias das células RBL-2H3 e RAW264.7. Portanto, ela pode servir como um agente potencial no combate a doenças relacionadas ao sistema imunológico.
Este artigo de pesquisa publicado no International Journal of Molecular Sciences (2021) avaliou os efeitos antialérgicos e anti-inflamatórios de um produto natural, a saponarina, utilizando diferentes linhagens celulares, incluindo a RBL-2H3.
Este estudo publicado na revista Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) constatou que os extratos de Benchalokawichian e alguns de seus constituintes ativos exercem efeitos inibitórios potenciais sobre a liberação de β-hexosaminidase pelas células RBL-2H3.
Este artigo foi publicado em 2018 no International Journal of Biological Macromolecules. O estudo afirmou que a Spirulina maxima, um produto natural, inibe a desgranulação das células RBL 2H3 ao impedir a fosforilação das MAPKs e da Akt.
Recursos para a linhagem celular RBL-2H3: protocolos, vídeos e muito mais
A RBL-2H3 é uma linhagem de mastócitos amplamente utilizada. Os recursos disponíveis que abrangem os protocolos de cultura e transfecção da RBL-2H3 são mencionados aqui:
- Modelo de mastócitos RBL 2H3: Este artigo de pesquisa inclui protocolos para a manutenção de culturas de RBL-2H3 e para a transfecção de RBL-2H3.
Aqui estão alguns recursos que explicam o protocolo de cultura celular da RBL-2H3:
- Células RBL-2H3: Este site é útil para você aprender os protocolos de cultura celular da linhagem RBL-2H3. Além disso, ele contém informações sobre meios de cultura e condições de cultivo das células RBL-2H3.
Linha celular RBL-2H3: Perguntas frequentes essenciais para pesquisadores
As células RBL-2H3 são uma linhagem celular originalmente derivada da leucemia basofílica de rato e são comumente utilizadas como modelo para o estudo da biologia dos mastócitos, particularmente no contexto de reações alérgicas e pesquisas imunológicas. Essas células são valiosas para a análise da liberação de mediadores por basófilos e mastócitos, da dinâmica dos receptores celulares e da formação de sinapses imunológicas.
Sim, sabe-se que, após a ativação, as células RBL-2H3 liberam histamina e outros mediadores inflamatórios. Essa característica as torna extremamente úteis para estudos relacionados a respostas alérgicas, já que a liberação de histamina é uma característica fundamental das reações alérgicas e dos processos inflamatórios.
O tempo de duplicação das células RBL-2H3 varia de acordo com as condições de cultura, mas geralmente fica em torno de 24 a 36 horas. No entanto, condições ideais de crescimento, como temperatura, pH e disponibilidade de nutrientes, podem influenciar o tempo de duplicação.
Embora as células RBL-2H3 sejam de origem de ratos e existam diferenças inerentes entre as espécies, elas ainda são amplamente utilizadas como modelo para o estudo de mecanismos relevantes para as respostas alérgicas humanas. No entanto, os resultados dos estudos com células RBL-2H3 devem ser interpretados com cautela ao serem extrapolados para os sistemas humanos.
Demonstrou-se que o H₂O₂, ou peróxido de hidrogênio, inibe a desgranulação mediada por IgE nas células RBL-2H3. Esse efeito é significativo para os pesquisadores que estudam a modulação das reações alérgicas em nível celular.
Sim, as células RBL-2H3 são amplamente utilizadas para triagem de medicamentos, especialmente para compostos que atuam nas vias alérgicas e inflamatórias. Elas são utilizadas para avaliar a eficácia e a segurança de potenciais agentes terapêuticos, bem como suas propriedades antialérgicas e anti-inflamatórias.
Referências
- Passante, E. e N. Frankish, A linhagem celular RBL-2H3: sua proveniência e adequação como modelo para o mastócito. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Reação pseudoalérgica causada pela injeção de Qingkailing, parcialmente por meio da via de sinalização PI3K-Rac1 em células RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Microplásticos (nanoplásticos) de poliestireno danificam as organelas das células RBL-2H3 e promovem a ativação da MOAP-1 para induzir a apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Efeitos antialérgicos e anti-inflamatórios da neferina nas células RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.