Células PANC1: Desvendando seu papel crucial na pesquisa do câncer de pâncreas
A PANC1 é uma linhagem celular tumoral epitelóide humana comumente utilizada na pesquisa sobre o câncer. Ela é empregada como modelo in vitro para estudar a biologia do câncer de pâncreas, a carcinogênese e os mecanismos celulares e moleculares subjacentes, bem como para avaliar possíveis terapias anticâncer.
- Meio de crescimento
- Para a cultura das células PANC1, utiliza-se DMEM com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃ e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio de cultura das células PANC1 deve ser trocado 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- A linha celular pancreática PANC 1 apresenta taxas de proliferação moderadas, com um tempo de duplicação de 25,83 ± 2,03 horas.
- Tipo de crescimento
- A PANC1 é uma linhagem celular epitelial aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
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Características gerais e origem da linha celular PANC1
Esta seção do artigo fornecerá informações básicas sobre a linhagem celular PANC1. Por exemplo: o que significa PANC-1? O que são as células PANC-1? Qual é a origem da PANC1? Qual é a morfologia da PANC1? Qual é o tamanho das células PANC1?
- A linhagem celular PANC1 de câncer pancreático foi obtida de um homem caucasiano de 56 anos com carcinoma do ducto pancreático. Essa linhagem celular tumoral contínua foi estabelecida por Michael Lieber e colegas em 1975 [1].
- As células PANC1 apresentam baixa capacidade de diferenciação, mas têm potencial para metastatizar.
- Essas células de câncer pancreático humano apresentam morfologia semelhante à das células epiteliais.
- A PANC 1 possui um cariótipo hipertriploide. O número modal de cromossomos relatado para a linhagem celular PANC 1 é 63. O genoma possui um pequeno cromossomo em anel e três cromossomos marcadores distintos.
Informações sobre a cultura de células PANC1
Esta seção é inteiramente dedicada às informações sobre a cultura de células PANC1. Conhecer as condições de cultura de uma linhagem celular pode facilitar o seu trabalho. Abordaremos os seguintes pontos: Qual é o tempo de duplicação das células PANC-1? Como se cultiva as células PANC1? As células PANC-1 são aderentes? Qual é o meio de cultura das células PANC-1?
Pontos-chave para a cultura de células PANC1
Tempo de duplicação:
A linhagem celular pancreática PANC-1 apresenta taxas de proliferação moderadas, com um tempo de duplicação de 25,83 ± 2,03 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A PANC-1 é uma linhagem celular epitelial aderente.
Densidade de semeadura:
As células PANC1 são semeadas a uma densidade de 1 x 10⁴ células/cm². Para a semeadura, as células são lavadas com PBS (solução salina tamponada com fosfato) e incubadas com solução de dissociação, ou seja, Accutase, por 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. As células desprendidas são ressuspensas em meio fresco e centrifugadas. O sedimento celular é cuidadosamente ressuspenso em meio de cultura, e as células são transferidas para novos frascos para crescimento.
Meio de crescimento:
Para a cultura das células PANC1, utiliza-se DMEM com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃ e 1,0 mM de piruvato de sódio.
O meio de cultura das células PANC1 deve ser trocado 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células PANC1 são cultivadas em uma incubadora umidificada a 37 °C e com uma fonte de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células PANC são armazenadas na fase de vapor de nitrogênio líquido ou em um ultracongelador elétrico (a temperatura inferior a -150 °C) para proteger a viabilidade celular.
Processo de congelamento e meio:
As células PANC1 são congeladas nos meios CM-1 ou CM-ACF. Utiliza-se um método de congelamento lento, que permite apenas uma queda de temperatura de 1 °C por minuto, para congelar as células PANC1.
Processo de descongelamento:
As células são descongeladas em banho-maria a 37 °C até restar apenas um pequeno pedaço de gelo. As células descongeladas são ressuspensas no meio e centrifugadas para remover o conteúdo do meio de congelamento. A placa de células é cuidadosamente ressuspensa, e as células são distribuídas a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² em novos frascos para cultura. As células PANC1 levam quase 48 horas para aderir.
Nível de biossegurança:
Recomenda-se o nível de biossegurança 1 para a cultura de células PANC1.
Vantagens das células PANC1
Cada linhagem celular apresenta certas vantagens e desvantagens que a diferenciam das demais. Esta seção irá esclarecer as vantagens e desvantagens associadas à linhagem celular PANC1.
Vantagens
As principais vantagens das células PANC1 são:
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Modelo in vitro de câncer de pâncreas
A PANC1 representa as características do adenocarcinoma do ducto pancreático humano. Portanto, é utilizada como modelo in vitro para estudar o desenvolvimento e o crescimento de tumores pancreáticos, bem como os mecanismos moleculares relacionados.
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Mutações genéticas
As células PANC1 possuem muitas mutações encontradas em tumores pancreáticos, o que as torna valiosas para o estudo de vias relacionadas à doença. Essas mutações incluem principalmente PANC1 KRAS e PANC1 P53.
PANC1
A linhagem celular cancerosa humana PANC1 é frequentemente utilizada na pesquisa do câncer de pâncreas. A seguir, mencionamos algumas áreas comuns de pesquisa.
- Biologia do câncer: as células PANC1 são utilizadas para estudar o desenvolvimento e o crescimento do câncer de pâncreas, bem como muitos outros processos celulares, incluindo proliferação, invasão, migração e morte celular. Além disso, também são estudadas diferentes vias de sinalização celular, mutações genéticas e mecanismos moleculares envolvidos na carcinogênese pancreática. Um estudo realizado em 2018 utilizou células PANC1 e descobriu que o omeprazol suprime a invasão de células tumorais pancreáticas por meio da indução de JNK mediada pelo receptor de hidrocarbonetos arílicos. A ativação de JNK, por sua vez, modula outros genes celulares e causa a inibição de fatores pró-oncogênicos [3]. Da mesma forma, outro estudo revelou que as vias de sinalização AKT e ERK estão envolvidas na proliferação, invasão e migração das células PANC1 do câncer pancreático humano [4].
- Triagem de medicamentos: A linhagem celular PANC1 serve como uma ferramenta valiosa para a triagem de potenciais medicamentos ou terapias anticâncer. Os pesquisadores geralmente exploram a resistência aos medicamentos e estudam os mecanismos de ação de potenciais candidatos a medicamentos. Uma pesquisa conduzida por Samira Alipour e colegas em 2022 propôs que o extrato de Portulaca oleracea exerce efeitos apoptóticos e citotóxicos nas células PANC1 e, portanto, pode ser um tratamento potencial para o câncer de pâncreas. A planta exerce esses efeitos antitumorais por meio da regulação dos genes CDK1 e P53 [5].
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Publicações sobre as células PANC1
Nesta seção, são mencionadas algumas publicações científicas interessantes e frequentemente citadas que abordam as células PANC1.
Esta pesquisa foi publicada em 2019 na revista internacional “Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology”. O estudo propôs que as nanopartículas de ouro sintetizadas de forma ecológica a partir da planta Scutellaria barbata exercem efeitos antitumorais contra a linhagem celular de câncer de pâncreas PANC1.
Esta publicação na revista “Toxicology and Environmental Health Sciences” (2020) explorou o potencial anticâncer do extrato de Delonix regia e das nanopartículas de prata em duas linhagens de células cancerosas humanas, a saber, PANC1 e MCF7.
Síntese de nanopartículas de ouro a partir de folhas de Panax notoginseng e sua atividade anticâncer em linhas celulares PANC-1 de câncer pancreático
Este artigo foi publicado na revista internacional *Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology* em 2019. Este estudo examinou os efeitos terapêuticos das nanopartículas de ouro sintetizadas a partir do extrato de folhas da planta *Panax notoginseng* contra a linhagem celular de câncer de pâncreas PANC1.
Geração do KS-58 como o primeiro peptídeo inibidor do K-Ras (G12D) com atividade anticâncer in vivo
Este estudo foi publicado na revista *Nature Scientific Reports* (2020). Nele, os pesquisadores geraram o peptídeo KS-58, que inibe seletivamente a mutação KRAS G12D da linha celular PANC-1 in vitro.
Esta pesquisa foi publicada na revista *Biomedicine & Pharmacotherapy* em 2018. O estudo propôs que a isorhamnetina, um flavonóide, inibe a proliferação das células PANC-1 por meio da parada na fase S do ciclo celular.
Este estudo, publicado na revista Oncoscience (2014), propôs que um novo inibidor da LIMK2 suprime o crescimento tumoral no modelo de xenoenxerto de PANC-1 em camundongos.
Recursos para a linhagem celular PANC-1: protocolos, vídeos e muito mais
Alguns recursos disponíveis sobre as células PANC 1 estão listados abaixo.
- Transfecção de PANC-1: Este vídeo é um tutorial para aprender o protocolo de transfecção de PANC-1.
- Subcultura de uma linhagem celular: este vídeo explica um protocolo geral para a subcultura de linhagens celulares aderentes.
Os links a seguir contêm o protocolo de cultura celular para as células PANC 1.
- Células PANC 1: este link contém o protocolo para descongelamento e subcultura da linha celular PANC 1.
- Cultura de células PANC 1: Este site pode ajudá-lo a aprender todas as informações essenciais sobre a cultura de células PANC 1, incluindo meios de cultura para células PANC 1, descongelamento e congelamento de células, além do protocolo de subcultura.
Perguntas frequentes: Entendendo as células PANC-1 e suas aplicações
Embora sejam, essencialmente, uma linhagem de células epiteliais, as células PANC-1 podem apresentar características neuroendócrinas em condições específicas.
Sim, as células PANC-1 são adequadas para o estudo da mudança de subtipo da EMT, proporcionando insights sobre a progressão e a metástase do câncer de pâncreas.
As células PANC-1 apresentam características do adenocarcinoma ductal, incluindo a expressão do receptor de somatostatina. Do ponto de vista genotípico, elas podem apresentar mutações como as encontradas no hotspot do p53 e no gene CDKN2A.
Sim, as células PANC-1 podem ser utilizadas em modelos de xenoenxertos para estudar a tumorigênese do câncer de pâncreas e avaliar intervenções terapêuticas.
Sim, as células PANC-1 demonstraram potencial tumorigênico em modelos animais, o que as torna valiosas para a pesquisa sobre o câncer.
As células PANC-1 podem ser adequadas para estudos de PRRT devido à expressão de receptores de somatostatina.
As células PANC-1 têm sido utilizadas em estudos que exploram o funcionamento do relógio circadiano e seu impacto na biologia do câncer de pâncreas.
Técnicas como a citometria de fluxo podem ser utilizadas para avaliar a expressão de marcadores da EMT em células PANC-1, fornecendo informações sobre sua plasticidade fenotípica.
Embora todas as três linhagens celulares sejam originárias do carcinoma pancreático, elas podem apresentar variações em sua composição genética, características fenotípicas e potencial tumorigênico. Para conhecer as diferenças específicas, consulte os respectivos perfis das linhagens celulares.
Sim, as células PANC-1 podem ser cultivadas em sistemas de cultura celular 3D para simular os microambientes tumorais in vivo, visando estudos mais relevantes do ponto de vista fisiológico.
A expressão do antígeno carcinoembrionário nas células PANC-1 pode variar e deve ser verificada de acordo com os requisitos experimentais.
O gene luc2, que codifica a enzima luciferase, pode ser introduzido nas células PANC-1 para estudos de imagem por bioluminescência, permitindo o monitoramento não invasivo do crescimento tumoral in vivo.
Sim, as células PANC-1 expressam receptores de somatostatina, incluindo os receptores SSTR2, que podem ser alvo de intervenções terapêuticas.
Sim, a citometria de fluxo é uma ferramenta valiosa para analisar o fenótipo e as características moleculares das células PANC-1, fornecendo dados quantitativos sobre os níveis de expressão proteica.
As culturas de PANC-1 podem conter populações celulares intermediárias com fenótipos diversos, refletindo a heterogeneidade clonal e a plasticidade celular inerentes ao câncer de pâncreas.
Referências
- Lieber, M., et al., Estabelecimento de uma linhagem celular tumoral contínua (PANC-1) a partir de um carcinoma humano do pâncreas exócrino. International Journal of Cancer, 1975. 15(5): p. 741-747.
- Kim, Y., et al., Perfil proteômico comparativo de linhagens celulares de adenocarcinoma ductal pancreático. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Jin, U.-H., et al., A inibição da migração das células Panc1 do câncer pancreático pelo omeprazol depende da ativação da JNK pelo receptor de hidrocarbonetos arílicos. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2018. 501(3): p. 751-757.
- Yuetong, L., et al., A salidrosida inibe a proliferação, a migração e a invasão das células PANC1 e SW1990 do câncer pancreático humano por meio das vias de sinalização AKT e ERK. Die Pharmazie — Revista Internacional de Ciências Farmacêuticas, 2020. 75(8): p. 385-388.
- Alipour, S., L. Pishkar e V. Chaleshi, Efeito citotóxico do extrato de Portulaca oleracea na regulação da expressão gênica de CDK1 e P53 em linhagem celular de câncer pancreático. Nutrition and Cancer, 2022. 74(5): p. 1792-1801.