Células NCI-H1299: Pesquisa e implicações clínicas das células de câncer de pulmão NCI-H1299
A NCI-H1299 é uma linhagem celular imortalizada de câncer de pulmão de células não pequenas amplamente utilizada em pesquisas nas áreas de imuno-oncologia, câncer e descoberta de medicamentos. Além disso, pesquisadores utilizaram essas células para investigar a sensibilidade a medicamentos, as vias de sinalização subjacentes e os mecanismos moleculares relacionados ao câncer de pulmão. Ademais, essas células são empregadas no estudo de infecções virais, como a causada pelo SARS-CoV-2.
- Meio de crescimento
- O RPM1 1640 é o meio de cultura ideal para as células NCI-H1299. É suplementado com 10% de soro fetal bovino, 4.500 mg/L de glicose, 2,0 mM de L-glutamina, 1 mM de piruvato de sódio, 1.500 mg/L de NaHCO₃ e 10 mM de HEPES. O meio deve ser renovado de 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação das células NCI-H1299 varia entre 22 e 30 horas.
- Tipo de crescimento
- A NCI-H1299 é uma linhagem celular aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomende a NCI-H1299
- Características gerais e origem das células NCI-H1299
- Informações sobre o cultivo
- Compre a linhagem celular NCI-H1299: ferramentas de pesquisa de alta qualidade para o estudo da biologia do câncer de pulmão
- Vantagens e desvantagens das células NCI-H1299
- Aplicações de pesquisa das células NCI-H1299
- Publicações científicas que utilizam as células NCI-H1299
- Recursos para a linha celular NCI-H1299: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes sobre a linha celular NCI-H1299
- Referências
- Perguntas frequentes
Características gerais e origem das células NCI-H1299
A primeira coisa a saber sobre uma linha celular é sua origem e características gerais, pois elas ajudam a definir seu uso em sua pesquisa. Esta seção do artigo irá ajudá-lo a conhecer algumas informações importantes sobre a origem e as características da NCI-H1299. Por exemplo: o que são as células de câncer de pulmão NCI-H1299? Que tipo de célula é a NCI-H1299? Qual é o tamanho das células NCI-H1299? Qual é a diferença entre a A549 e a NCI-H1299?
- A linhagem celular NCI-H1299 teve origem em uma metástase em um linfonodo do pulmão de um paciente do sexo masculino, caucasiano, de 43 anos, com câncer.
- Essas células apresentam deleção parcial homozigótica do gene p53; portanto, não expressam a proteína p53. A ausência de expressão da proteína p53 nas células NCI-H1299 contribui para a tendência proliferativa das células de câncer de pulmão H1299.
- Além do p53, essas células imortalizadas apresentam, segundo relatos, a mutação KRAS da NCI-H1299, responsável por suas propriedades de crescimento, proliferação, migração e invasão.
- O cariótipo das células NCI-H1299 é quase diploide.
- As células NCI-H1299 apresentam morfologia semelhante à das células epiteliais.
- Essas células são achatadas e têm espessura inferior a 5 µm.
NCI-H1299 e A549
NCI-H1299 e A549 são linhagens celulares de câncer de pulmão de células não pequenas. As células NCI-H1299 são mais agressivas e sensíveis em comparação com as A549. Ambas apresentam mutações relativamente semelhantes, como a do gene KRAS. No entanto, ao contrário das células NCI-H1299, as células A549 expressam o gene P53.
Informações sobre o cultivo
Manter uma cultura de linhagem celular não é fácil até que você conheça todas as informações essenciais sobre ela, incluindo: Qual é o tempo de duplicação da NCI-H1299? Qual é a densidade de semeadura da NCI-H1299? Qual é o meio de cultura das células NCI-H1299? Como se cultiva as linhas celulares NCI-H1299? Esta seção ajudará você a descobrir as respostas para todas essas perguntas sobre a cultura de células NCI-H1299.
Pontos-chave para a cultura de células NCI-H1299
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação do NCI-H1299 varia entre 22 e 30 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A NCI-H1299 é uma linhagem celular aderente.
Proporção de subcultivo:
As células NCI-H1299 são subcultivadas na proporção recomendada de 1:3 a 1:6. Para a semeadura, as células aderentes são lavadas com PBS 1x e incubadas com solução de passagem Accutase por 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. As células desprendidas são adicionadas a meios de cultura frescos e centrifugadas. O sedimento celular é então ressuspenso, e as células são transferidas para novos frascos contendo meio de crescimento.
Meio de crescimento:
O RPM1 1640 é um meio ideal para as células NCI-H1299. É suplementado com 10% de soro fetal bovino, 4.500 mg/L de glicose, 2,0 mM de L-glutamina, 1 mM de piruvato de sódio, 1.500 mg/L de NaHCO₃ e 10 mM de HEPES. O meio deve ser renovado de 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As culturas de células de câncer de pulmão NCI-H1299 são mantidas em uma incubadora umidificada a 37 °C com um suprimento de 5% de CO₂.
Armazenamento:
A linhagem celular NCI-H1299 pode ser armazenada na fase de vapor de nitrogênio líquido ou em freezers de temperatura ultrabaixa a temperaturas inferiores a -150 °C para armazenamento de longo prazo.
Processo de congelamento e meio:
CM-1 ou CM-ACF são meios de congelamento para células NCI-H1299. As células são congeladas por meio de um processo de congelamento lento, que permite apenas uma redução de 1 grau na temperatura por minuto, a fim de proteger a viabilidade celular.
Processo de descongelamento:
As células NCI-H1299 congeladas são agitadas rapidamente em um banho-maria pré-aquecido a 37 graus Celsius por 40 a 60 segundos, até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. As células descongeladas recebem meio fresco e podem ser cultivadas diretamente em novos frascos ou centrifugadas. No primeiro caso, o meio deve ser substituído após 24 horas de incubação. A centrifugação ajuda a remover os componentes do meio de congelamento. Posteriormente, as células colhidas são ressuspensas em meio fresco e transferidas para o novo frasco para cultivo.
Nível de biossegurança:
É necessário um laboratório de nível 1 de biossegurança para o manuseio da cultura celular NCI-H1299.
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Vantagens e desvantagens das células NCI-H1299
Assim como outras linhagens de células cancerosas humanas, a NCI-H1299 também possui algumas características distintas associadas a vantagens e desvantagens específicas. A seguir, resumimos algumas das mais significativas.
Vantagens
As principais vantagens da linhagem celular de câncer de pulmão de células não pequenas NCI-H1299 são:
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Modelo in vitro de câncer de pulmão
As linhas celulares NCI-H1299 foram desenvolvidas a partir de metástases em linfonodos de carcinoma de pulmão e, portanto, possuem propriedades relativamente semelhantes. Assim, essas células podem servir como um modelo in vitro para investigar a biologia do câncer de pulmão, os mecanismos celulares e moleculares, bem como para selecionar e testar possíveis terapêuticas.
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Fácil de cultivar
As células NCI-H1299 são fáceis de cultivar e manter em um laboratório de pesquisa. Não há requisitos nem procedimentos complexos para o cultivo celular.
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Mutações P53 e KRAS nas células NCI-H1299
As células NCI-H1299 não apresentam expressão do gene p53, o que permite que as células se proliferem vigorosamente. Além disso, elas possuem uma mutação no KRAS que contribui para o crescimento, a proliferação, a invasão e a migração celular. Considerando esses fatores, os pesquisadores utilizam as células H1299 para investigar mecanismos moleculares relevantes às mutações no KRAS e no p53.
Desvantagens
As desvantagens das células NCI-H1299 são:
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Especificidade tecidual
As células NCI-H1299 são originárias do tecido pulmonar. Portanto, sua aplicabilidade é limitada principalmente à pesquisa do carcinoma de pulmão. Elas podem não representar plenamente a heterogeneidade e as características gerais de outros tipos de câncer.
Aplicações de pesquisa das células NCI-H1299
A linhagem celular NCI-H1299 é amplamente utilizada na pesquisa do câncer de pulmão. Algumas aplicações promissoras dessa linhagem celular são mencionadas a seguir.
- Biologia do câncer: as células NCI-H1299 servem como uma excelente ferramenta de pesquisa para investigar o desenvolvimento e a progressão do câncer, bem como os mecanismos celulares e moleculares relacionados. Essas células apresentam certas mutações, permitindo que os pesquisadores explorem comportamentos relacionados às células cancerosas, vias de sinalização e perfis de expressão gênica. Vários estudos utilizaram a linhagem celular NCI-H1299 de carcinoma de pulmão de células não pequenas para estudar a biologia do câncer de pulmão. Por exemplo, um estudo realizado em 2018 investigou a via de sinalização envolvida na apoptose das células cancerosas do pulmão utilizando células NCI-H1299. Os pesquisadores descobriram que a via PI3K/AKT contribui para a proliferação celular e que sua inibição pode causar a morte das células cancerosas [1]. Da mesma forma, outra pesquisa investigou os mecanismos envolvidos na transição epitelial-mesenquimal (EMT) da linha NCI-H1299. Esse estudo propôs que uma proteína extracelular, a SPARC (proteína secretada ácida e rica em cisteína), contribui para a EMT e a migração das células NCI-H1299, promovendo, assim, a tumorigênese nessas células — a proteína SPARC atua como mediadora da sinalização do TGF-β1 [2].
- Descoberta e triagem de medicamentos: a NCI-H1299, uma linhagem celular de câncer de pulmão humano, é amplamente utilizada para avaliar a toxicidade e a eficácia de possíveis medicamentos. Além disso, é empregada por pesquisadores para investigar o mecanismo de ação de medicamentos antitumorais. Estudos também utilizaram essas células para identificar possíveis alvos de medicamentos e mecanismos de resistência. Por exemplo, uma pesquisa conduzida por Xiao-Yun Shen e colegas investigou o potencial anticâncer do composto natural bruceína D (BD). Os resultados revelaram que a BD impede significativamente a proliferação, a invasão e a migração das células NCI-H1299. Portanto, ela pode ser considerada uma terapia adjuvante em potencial para o tratamento do carcinoma de pulmão de células não pequenas [3]. Da mesma forma, um estudo avaliou os efeitos citotóxicos do xantohumol, isoladamente e em combinação com o medicamento quimioterápico cisplatina, em células de câncer de pulmão NCI-H1299 [4].
Publicações científicas que abordam as células NCI-H1299
Aqui estão algumas publicações científicas significativas e mais citadas sobre a linhagem celular de carcinoma de pulmão NCI-H1299.
Este artigo foi publicado na revista Human and Experimental Toxicology (2021). O estudo propôs que o indol-3-carbinol induz a apoptose nas células H1299 por meio do aumento dos níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS).
Esta pesquisa foi publicada em 2018 na revista *Cellular Physiology and Biochemistry*. Os resultados da pesquisa revelaram que a combinação de ácido cafeico e paclitaxel exerce um efeito anticâncer sinérgico na linhagem celular de câncer de pulmão de células não pequenas NCI-H1299.
Este artigo científico foi publicado na revista *Molecular Medicine Reports* (2018). O estudo avaliou o efeito antitumoral da tubeimosida-1, uma saponina triterpenóide, e os mecanismos subjacentes na linhagem celular NCI-H1299.
Este artigo, publicado no Journal of Cancer (2020), propôs que a pristimerina, um composto natural, suprime a proliferação e a migração das células NCI-H1299.
Mecanismo de regulação do gene VIPR1 nas células do adenocarcinoma de pulmão humano H1299
Este estudo, publicado na revista Medical Oncology (2019), explorou os efeitos potenciais da superexpressão do gene VIPR1 na linhagem celular de adenocarcinoma NCI-H1299.
Recursos para a linhagem celular NCI-H1299: protocolos, vídeos e muito mais
Aqui estão alguns recursos online sobre as células NCI-H1299.
- Transfecção de NCI-H1299: este vídeo explica o protocolo de transfecção transitória para as linhas celulares NCI-H1299.
- Subcultura de uma linhagem celular aderente: este vídeo ajudará você a aprender um procedimento geral de subcultura para uma linhagem celular aderente.
O link a seguir contém informações sobre cultura celular para as células NCI-H1299.
- Linha celular NCI-H1299: este link pode ajudá-lo a conhecer o protocolo de passagem e transfecção das células NCI-H1299.
A linhagem celular NCI-H1299 tem origem em uma metástase em um linfonodo de um carcinoma de pulmão.
As células NCI-H1299 são frequentemente utilizadas como sistema-modelo para o estudo da biologia do câncer de pulmão, incluindo a análise do transcriptoma e dos mecanismos moleculares.
As células NCI-H1299 não apresentam expressão do gene p53, o que leva à sua proliferação vigorosa. Essa mutação é frequentemente analisada em estudos que investigam supressores tumorais e efeitos anticâncer.
Sim, os pesquisadores utilizam células NCI-H1299 para avaliar os efeitos inibitórios e a atividade antitumoral de vários compostos e possíveis agentes terapêuticos.
Sim, as células NCI-H1299 são comumente incluídas em painéis de câncer de pulmão para o estudo da progressão do câncer, das respostas terapêuticas e da identificação de alvos potenciais.
As células NCI-H1299 são frequentemente comparadas às células pulmonares normais para investigar diferenças na expressão gênica, nas vias de sinalização e nas respostas aos tratamentos no contexto do câncer de pulmão.
Os pesquisadores utilizam células NCI-H1299 para examinar os efeitos da radioterapia nas células tumorais, incluindo a avaliação da viabilidade celular, dos danos ao DNA e dos possíveis mecanismos de resistência.
Sim, estudos têm explorado os efeitos do protopanaxadiol nas células NCI-H1299, incluindo suas possíveis propriedades anticâncer e mecanismos de ação.
Sim, as células NCI-H1299 geralmente podem ser recuperadas após a criopreservação ou cultura prolongada em condições adequadas, mantendo suas características para experimentos posteriores.
As células NCI-H1299 constituem uma ferramenta valiosa para a compreensão da biologia do câncer, a identificação de novos alvos terapêuticos e a triagem de potenciais agentes anticâncer, contribuindo para os avanços na pesquisa sobre o câncer e nas estratégias de tratamento.
Referências
- Gu, J., et al., Estudo da apoptose induzida pelo EGCG em células de câncer de pulmão por meio da inibição da via de sinalização PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., O SPARC atua como mediador do TGF-β1 na promoção da transição epitelial-mesenquimal em células de câncer de pulmão A549 e H1299. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Um estudo sobre o mecanismo de ação da bruceína D no tratamento de células H1299 de câncer de pulmão de células não pequenas. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Efeitos citotóxicos do xantohumol e sua combinação com a cisplatina em células H1299 de câncer de pulmão metastático humano. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.