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Linha celular MG-63: Um guia detalhado sobre as células MG-63 na pesquisa do osteossarcoma

As células MG-63 são células de osteossarcoma humano do tipo fibroblasto que oferecem uma ampla gama de aplicações de pesquisa na área biomédica. Isso pode incluir o estudo de processos relacionados aos ossos, como desenvolvimento ósseo, diferenciação, etc. Além disso, a linha celular MG-63 serve como um modelo in vitro adequado para estudar a viabilidade, a proliferação e a adesão das células ósseas.

Características gerais e origem da linha celular MG-63

Esta seção do artigo abordará a origem e as características gerais da linhagem celular MG-63. Você aprenderá: O que é a linhagem celular MG-63? Qual é a origem da linhagem celular MG-63? Qual é a morfologia das células MG-63? Qual é o tamanho das células MG-63?

  • A MG-63 é um tipo de linhagem celular de osteoblastos originária do osso de um paciente do sexo masculino (caucasiano) de 14 anos com osteossarcoma. A. Billiau e colegas depositaram essa linhagem celular em 1977.
  • A linha celular MG-63 possui uma morfologia semelhante à das células fibroblásticas.
  • As células de osteossarcoma humano (MG-63) apresentam hipotriploidia. O número modal de cromossomos para essas células é 66, o que ocorre em aproximadamente 44% da população celular. Ploidias mais elevadas também são relatadas em quase 2% da população celular. Além disso, 18 a 19 cromossomos marcadores são abundantes em todas as células.

Imagem por microscópio eletrônico de varredura (SEM) de uma cultura de células de sarcoma.

Informações sobre o cultivo da linha celular MG-63

Informações importantes sobre os requisitos de cultura da linha celular podem facilitar seu trabalho. Esta seção do artigo lista todos os pontos-chave essenciais para a cultura e manutenção das células MG-63. Aqui você aprenderá: Qual é o tempo de duplicação das células MG-63? Qual meio de crescimento é utilizado para as células MG-63? Qual é a densidade de semeadura das células MG-63?

Pontos-chave para a cultura de células MG-63

Tempo de duplicação

O tempo de duplicação populacional das células MG-63 varia entre 28 e 38 horas, dependendo das condições de cultura.

Propriedades de crescimento

A MG-63 é uma linhagem celular aderente.

Densidade de semeadura

Recomenda-se uma densidade celular de 1 x 10 células/cm² para as células MG-63. As células aderentes são lavadas com solução salina tamponada com fosfato (PBS) 1x, sem magnésio nem cálcio. Em seguida, essas células são incubadas com solução de dissociação (Accutase), adicionadas a meio fresco e centrifugadas. O sedimento celular coletado é ressuspenso em meio fresco e transferido para um novo frasco para crescimento.

Meio de crescimento

Os meios DMEM ou Ham’s F12 são utilizados para a cultura de células MG-63. Esses meios podem ser complementados com 5% de soro fetal bovino (FBS), 3,0 g/L de glicose, 2,5 mM de L-glutamina e 1,2 g/L de NaHCO₃ para um crescimento celular ideal. Os meios devem ser substituídos 2 a 3 vezes por semana.

Condições de crescimento

É necessária uma incubadora umidificada a 37 °C e um suprimento de 5% de CO₂ para a cultura das células MG-63.

Armazenamento

Essas células do tipo osteoblasto podem ser armazenadas na fase de vapor de nitrogênio líquido ou a temperaturas inferiores a -150 °C para manter a viabilidade celular.

Processo de congelamento e meio

Os meios CM-1 ou CM-ACF são utilizados para o congelamento das células MG-63. Geralmente, recomenda-se um processo de congelamento lento para evitar que as células sofram choque térmico e para proteger sua viabilidade.

Processo de descongelamento

As células congeladas são incubadas por 40 a 60 segundos em um banho-maria pré-aquecido (37 graus Celsius). As células são ressuspensas em meio de crescimento fresco e transferidas para um novo frasco. Após 24 horas de incubação, o meio é substituído para remover os componentes do meio de congelamento.  

Nível de biossegurança

São necessárias instalações laboratoriais com nível de biossegurança 1 para o manuseio e a manutenção das culturas de MG-63.

MG 63 cells

Células MG-63 antes e depois de atingirem a confluência.

Linha celular MG-63: vantagens e desvantagens

A MG-63 é uma linha celular de osteoblastos amplamente utilizada. Ela apresenta várias vantagens e desvantagens associadas a ela. A seguir, mencionaremos alguns dos principais prós e contras da linha celular MG-63.

Vantagens

As vantagens das células MG-63 são:

  • Características semelhantes às dos osteoblastos

    A linha celular MG-63 apresenta características semelhantes às dos osteoblastos, tornando-a adequada para o estudo de processos e doenças relacionadas aos ossos. Ela também pode ser utilizada para investigar a adesão, a proliferação e a viabilidade celular em superfícies de titânio [1].

  • Facilidade de transfecção

    As células MG-63 são amplamente utilizadas em estudos de transfecção, possibilitando pesquisas sobre expressão gênica, função e processos celulares.

  • Alta produção de interferon

    As células MG-63 são capazes de produzir altos níveis de interferon. Elas podem produzir rendimentos de interferon 3,7 vezes maiores por cm² do que os fibroblastos diplóides quando induzidas com cicloheximida, ácido poliinosínico-policitidílico e actinomicina [2].

Desvantagens

As desvantagens associadas às células B MG-63 são:

  • Heterogeneidade

    As células MG-63 apresentam heterogeneidade na população celular, o que pode afetar a reprodutibilidade.

  • Linha celular tumoral

    A MG-63 é uma linhagem de células cancerosas e pode não representar totalmente o comportamento e a fisiologia das células normais, limitando sua aplicação em certos experimentos de laboratório.

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Aplicações das células MG-63

As células MG-63 são uma excelente ferramenta de pesquisa. Elas oferecem muitas aplicações promissoras no campo da pesquisa. Algumas das principais aplicações das células MG-63 na pesquisa estão listadas a seguir.

  • Estudo de processos/doenças relacionadas aos ossos: as células MG-63 são células semelhantes aos osteoblastos (formadoras de osso). Portanto, essas células são amplamente utilizadas para estudar doenças ósseas e processos celulares, incluindo desenvolvimento, diferenciação e mineralização. Além disso, as células são amplamente utilizadas para a triagem de medicamentos terapêuticos destinados a promover a consolidação óssea. Uma pesquisa utilizou células MG-63 para estudar o potencial terapêutico de nanopartículas de óxido de zinco sintetizadas por via ecológica a partir de Scutellaria baicalensis na proliferação, mineralização e diferenciação das células ósseas [3].
  • Pesquisa sobre câncer: as células MG-63 são amplamente utilizadas na pesquisa sobre câncer. Vários estudos utilizaram essas células de osteossarcoma para compreender as vias de sinalização do câncer e avaliar o potencial citotóxico e terapêutico de medicamentos. Um estudo realizado em 2019 explorou as propriedades antitumorais de um composto natural, a tomentosina, utilizando células MG-63. Os resultados mostraram que a tomentosina exibe efeitos anticâncer ao desencadear a produção intracelular de espécies reativas de oxigênio (ROS) [4].

Publicações de pesquisa que apresentam as células MG-63

A seguir, apresentamos algumas publicações de pesquisa que utilizam a MG-63, a linhagem celular semelhante aos osteoblastos.

O miR-192 aumenta a sensibilidade das células cancerosas de osteossarcoma MG-63 ao metotrexato

Este artigo foi publicado na revista Pathology - Research and Practice em 2020. Esta pesquisa utilizou células MG-63 para estudar os mecanismos moleculares envolvidos na resistência a medicamentos em células cancerosas de osteossarcoma (MG-63). Os resultados revelaram que o miRNA-192 poderia ser um alvo útil para superar a resistência ao metotrexato no osteossarcoma.

Nanopartículas de óxido de zinco sintetizadas por via verde regulam a expressão apoptótica nas células cancerosas ósseas MG-63

Esta pesquisa foi publicada no Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020). O estudo relatou o potencial anticâncer das nanopartículas de óxido de zinco (ZnONPs) sintetizadas por via verde a partir de Rehmanniae Radix contra células cancerosas ósseas (MG-63).

Diferenciação osteogênica e potencial de mineralização de nanopartículas de óxido de zinco da Scutellaria baicalensis em células MG-63 semelhantes a osteoblastos humanos

Este artigo de pesquisa foi publicado em 2021 na revista *Materials Science and Engineering*. Este estudo propôs as propriedades de cicatrização óssea das nanopartículas de óxido de zinco biossintetizadas a partir da planta *Scutellaria baicalensis*, utilizando a linhagem celular MG-63.

A curcumina inibe a proliferação e a invasão das células MG-63 por meio da inativação da via p-JAK2/p-STAT3

Este estudo foi publicado na revista *Onco Targets and Therapy* em 2021. A pesquisa propôs as propriedades antitumorais do composto curcumina contra células de osteossarcoma. O composto exerceu esses efeitos terapêuticos por meio da inativação da via de sinalização oncológica p-JAK2/p-STAT3.

Influência da vitamina D3 tratada com biocampo na proliferação, diferenciação e maturação de parâmetros relacionados aos ossos na linhagem celular MG-63

Esta pesquisa foi publicada em 2018 na revista “International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science”. O estudo constatou que a vitamina D3 tratada com energia de biocampo influencia positivamente a proliferação, a maturação e a diferenciação das células ósseas, além de melhorar os parâmetros de saúde óssea.

Recursos para a linhagem celular MG-63: protocolos, vídeos e muito mais

Vários recursos estão disponíveis sobre a linhagem celular MG-63, explicando seus protocolos de cultura celular e transfecção.

  • Transfecção de células MG-63: este vídeo explica de forma abrangente o protocolo de transfecção para células MG-63.
  • Passagem de células aderentes: este vídeo orienta sobre a subcultura ou passagem de linhagens celulares aderentes. Ele ajudará você a aprender os protocolos básicos de cultura celular.

O link a seguir fornece o protocolo de cultura para as células MG-63.

  • Cultura de células MG-63: Este site oferece um protocolo fácil e detalhado para a subcultura ou divisão da linha celular MG-63.

Perguntas frequentes sobre as células MG-63

As células MG-63 são uma linhagem celular de osteossarcoma humano comumente utilizada em pesquisas para estudar a biologia óssea, a biologia do câncer e a avaliação de medicamentos. Elas são derivadas do osteossarcoma de um menino de 14 anos e apresentam características típicas das células osteoblásticas.

As células MG-63 têm origem no osteossarcoma humano, um tipo de câncer ósseo. Mais especificamente, elas são derivadas do tecido ósseo maligno de um paciente humano.

O tempo de duplicação das células MG-63 varia normalmente entre 24 e 36 horas, dependendo das condições de cultura e dos meios utilizados.

As células MG-63 apresentam um cariótipo anormal com múltiplas anomalias cromossômicas. Isso inclui tanto aberrações numéricas quanto estruturais, características das células cancerosas.

Enquanto as células MG-63 são células de osteossarcoma, os fibroblastos humanos são derivados do tecido conjuntivo e estão envolvidos na cicatrização de feridas e na formação da matriz extracelular. Ambos os tipos de células são utilizados em estudos sobre interações celulares, particularmente no contexto da engenharia óssea e tecidual.

As células MG-63 apresentam propriedades robustas de aderência celular, o que as torna adequadas para estudos envolvendo adesão celular, espalhamento e interação com diversos biomateriais. Essas propriedades são cruciais para a compreensão das funções dos osteoblastos e para a otimização de implantes ósseos.

As células MG-63 são utilizadas em pesquisas para investigar o papel da adenosina no metabolismo ósseo. Os receptores de adenosina presentes nessas células medeiam várias funções, incluindo a formação e a reabsorção óssea, o que as torna valiosas para o estudo dos mecanismos moleculares do metabolismo ósseo.

A amelogenina, uma proteína essencial para a formação do esmalte dentário, também pode ser estudada utilizando células MG-63, a fim de explorar seus efeitos nas células ósseas e seu possível papel na engenharia e regeneração do tecido ósseo.

As células MG-63 são fundamentais para o estudo da otimização da osseointegração, que é o processo de integração do tecido ósseo aos implantes. Os pesquisadores utilizam essas células para testar novos materiais e modificações de superfície que possam melhorar a integração e a estabilidade dos implantes.

A estabilidade fenotípica refere-se à consistência das características celulares ao longo do tempo e ao longo de múltiplas passagens. No caso das células MG-63, manter a estabilidade fenotípica é essencial para garantir resultados confiáveis e reproduzíveis nos experimentos.

As células MG-63 servem como modelo para o estudo das funções dos osteoblastos, incluindo a formação e a mineralização ósseas, bem como da fisiopatologia do osteossarcoma, proporcionando insights sobre a progressão do câncer e possíveis alvos terapêuticos.

Sim, as células MG-63 podem ser utilizadas para investigar os efeitos dos interferons humanos nas células cancerosas ósseas, incluindo suas propriedades antivirais, antiproliferativas e imunomoduladoras, contribuindo para a compreensão da imunoterapia contra o câncer.

Referências

  1. Wandiyanto, J.V., et al., O destino das células MG-63 semelhantes a osteoblastos em superfícies de titânio nanoestruturadas bactericidas pré-infectadas. Materials (Basel), 2019. 12(10).
  2. Billiau, A., et al., Interferon humano: produção em massa em uma linha celular recém-estabelecida, MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
  3. Tang, Y., et al., Diferenciação osteogênica e potencial de mineralização de nanopartículas de óxido de zinco derivadas de Scutellaria baicalensis em células MG-63 semelhantes a osteoblastos humanos. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
  4. Lee, C.M., et al., A tomentosina exibe efeito anticancerígeno em células MG-63 de osteossarcoma humano por meio da indução de espécies reativas de oxigênio intracelulares. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.