Células HL-60: Fundamentos da pesquisa sobre leucemia mieloide aguda
A HL-60 é uma linhagem celular imortal de leucemia humana. É amplamente utilizada para estudar a biologia do câncer e para avaliar a eficácia de medicamentos anticâncer. Além disso, também pode ser usada para compreender os diferentes mecanismos celulares e moleculares envolvidos na proliferação e diferenciação das células leucêmicas.
- Meio de crescimento
- Consulte a página do produto
- Tempo de duplicação
- Consulte a página do produto
- Tipo de crescimento
- Adere
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomende HL-60
- Linha celular HL-60: Origem e informações gerais
- Informações sobre a cultura celular HL-60
- Células HL-60: vantagens e desvantagens
- Aplicações da linha celular HL-60 na pesquisa: do câncer à imunologia e além
- Linha celular HL-60 para sua pesquisa
- Células HL-60: Publicações científicas
- Recursos da linha celular HL-60: protocolos, vídeos e muito mais
- Linha celular HL-60: Perguntas frequentes essenciais para pesquisadores
- Referências
- Perguntas frequentes
Linha celular HL-60: Origem e informações gerais
A linha celular HL-60 serve como um modelo crucial na pesquisa hematológica, oferecendo insights profundos sobre a natureza e o tratamento da leucemia promielocítica aguda. Esta postagem do blog aprofunda-se nas origens e nas características distintivas da linha celular HL-60, esclarecendo seu papel crucial na pesquisa médica e nos desenvolvimentos terapêuticos.
A HL-60 foi isolada pela primeira vez a partir de células leucêmicas de uma mulher caucasiana de 36 anos diagnosticada com leucemia promielocítica aguda. Esse trabalho pioneiro foi conduzido por S.J. Collins e sua equipe, marcando um avanço significativo, pois a HL-60 foi a primeira linhagem celular de leucemia mieloide a ser isolada e cultivada com sucesso em suspensão. Essa conquista facilitou inúmeras oportunidades de pesquisa no estudo da leucemia e de outras doenças relacionadas. Em termos de características físicas, as células HL-60 apresentam morfologia linfoblástica e são conhecidas por crescerem em suspensão, apresentando formato arredondado. O tamanho dessas células varia, com diâmetros que vão de 9 a 25 μm, refletindo sua heterogeneidade. No nível genômico, a linhagem celular HL-60 é predominantemente pseudodiplóide, com um número modal de cromossomos de 43. Curiosamente, uma pequena porcentagem (6,2%) das células apresenta um componente 2S, o que acrescenta mais uma camada de complexidade à sua composição genética [1].
Compreender esses aspectos fundamentais das células HL-60 não apenas amplia nosso conhecimento sobre a leucemia no nível celular, mas também apoia os esforços de pesquisa em andamento para descobrir novas modalidades de tratamento. Nas seções a seguir, exploraremos como as propriedades únicas da linhagem celular HL-60 contribuíram para avanços significativos na pesquisa médica.
Informações sobre o cultivo de células HL-60
A cultura de células HL-60 é simples e fácil. Esta seção irá familiarizá-lo com noções básicas, tais como: Qual é o tempo de duplicação da linhagem celular HL-60? A cultura de células HL-60 é aderente ou em suspensão? Qual é a densidade de semeadura da linhagem celular HL-60? Qual meio é utilizado para o crescimento das células HL-60?
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação das células HL-60 é de aproximadamente 36 a 48 horas.
Adesiva ou em suspensão:
As células HL-60 crescem em cultura em suspensão.
Densidade de semeadura:
Essas células são semeadas a uma densidade de 1 x 10⁶ células/ml quando subcultivadas e a 2 x 10⁵ células/ml quando se inicia uma nova cultura.
Meio de crescimento:
Utiliza-se o meio de crescimento RPMI 1640, adicionado com 10 % de FBS e 2,5 mM de L-glutamina, para a cultura das células HL-60. O meio deve ser renovado 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células HL-60 são cultivadas em uma incubadora umidificada a 37 °C e com 5 % de CO₂.
Armazenamento:
As células HL-60 são armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C ou na fase de vapor de nitrogênio líquido para manter o maior número possível de células viáveis.
Meio e processo de congelamento:
Os meios de congelamento CM-1 ou CM-ACF são utilizados para o congelamento das células HL-60. É preferível um método de congelamento lento para o congelamento das células HL-60.
Processo de descongelamento:
O frasco congelado de células HL-60 é agitado rapidamente em um banho-maria ajustado à temperatura de 37 °C. Em seguida, as células são centrifugadas para remover o meio de congelamento. É adicionado um novo meio de cultura, e as células são ressuspensas para serem transferidas para um frasco para crescimento.
Nível de biossegurança:
Recomenda-se o nível de biossegurança 1 para o manuseio de culturas de HL-60.
Células HL-60: vantagens e desvantagens
Antes de trabalhar com qualquer linhagem celular, talvez você queira conhecer suas vantagens e desvantagens. Esta seção do artigo abordará alguns prós e contras do uso das células HL-60.
Vantagens
Algumas vantagens importantes da linha celular HL-60 são:
- Versatilidade: as células HL-60 têm a capacidade de se diferenciar em vários tipos de células, incluindo monócitos, macrófagos e granulócitos, sob condições adequadas de crescimento. Isso as torna úteis para o estudo da diferenciação celular e de outros processos celulares.
- Fácil de cultivar: as células HL-60 são fáceis de cultivar e manter em culturas em suspensão, o que as torna uma ferramenta conveniente para o estudo de diversos processos celulares.
- Modelo in vitro de leucemia: Essas células foram obtidas de um paciente com leucemia mieloide aguda e, portanto, apresentam características genéticas e moleculares semelhantes às da doença.
Desvantagens
As desvantagens da linhagem celular HL-60 são:
- Potencial de diferenciação limitado: as células HL-60 podem se diferenciar em algumas linhagens mieloides em resposta a estímulos, mas seu potencial de diferenciação é limitado em comparação com células primárias.
Aplicações da linha celular HL-60 na pesquisa: do câncer à imunologia e além
A linhagem celular HL-60, derivada de um paciente com leucemia promielocítica aguda, tornou-se um pilar da pesquisa médica devido à sua versatilidade e facilidade de cultura. Essas culturas de baixa manutenção são fundamentais em uma infinidade de aplicações de pesquisa, e nosso objetivo é explorar algumas das mais significativas, incorporando uma ampla gama de palavras-chave de investigação para fornecer uma visão geral abrangente.
Pesquisa sobre câncer
No campo da oncologia, a linha celular HL-60 tem sido fundamental para desvendar as complexidades da sinalização das células cancerosas, aprofundar nossa compreensão da expressão de oncogenes e impulsionar a descoberta de novos alvos terapêuticos. Essa linha celular faz parte do painel de linhas celulares de leucemia utilizado para a triagem de novos agentes quimioterápicos. Um exemplo marcante é o uso de células HL-60 para determinar as propriedades antileucêmicas de compostos extraídos de organismos marinhos, revelando efeitos tanto antiproliferativos quanto pró-apoptóticos [2]. Além disso, a linhagem celular facilitou o estudo de vias de sinalização fundamentais, como a JAK/STAT, e sua influência na proliferação de células leucêmicas, além de avaliar o potencial terapêutico de compostos bioativos como a timoquinona [3].
Imunologia
As células HL-60 constituem um sistema in vitro robusto para investigar diversas respostas imunológicas, incluindo o complexo processo de quimiotaxia e a regulação da expressão de mediadores imunológicos-chave. Essas células podem se diferenciar em células mieloides semelhantes a macrófagos e neutrófilos, servindo como um modelo versátil para a investigação de vias inflamatórias. Por exemplo, células semelhantes a macrófagos derivadas de HL-60 foram utilizadas para explorar o potencial anti-inflamatório de fitoquímicos do gênero Brassica [4]. Em outro estudo, a diferenciação das células HL-60 em células semelhantes a neutrófilos permitiu que os pesquisadores identificassem genes essenciais para a diferenciação celular e funções imunológicas relacionadas [5].
Descoberta de medicamentos
As capacidades de diferenciação mieloide da HL-60 também têm sido aproveitadas na descoberta de medicamentos, particularmente na identificação de candidatos que possam potencialmente modular a via de diferenciação, o que é crucial no tratamento da leucemia. Isso é exemplificado por estudos que utilizaram a linhagem celular HL-60 para avaliar o potencial anticâncer de produtos naturais [6].
Além disso, a linhagem celular HL-60 é utilizada para estudar vários aspectos da biologia das células mieloides, como compreender como o tratamento com agentes como o ácido retinóico pode levar à diferenciação monocítica, ou como essas células imitam os neutrófilos primários na geração de armadilhas extracelulares. O uso do modelo na elucidação dos eventos moleculares de neoplasias hematológicas é ainda mais ampliado por sua aplicação em estudos de painéis de mutações celulares, particularmente no contexto da análise de hotspots do p53 na leucemia.
Para aqueles que exploram a mecânica celular, o tempo de duplicação da HL-60 e sua resposta à eletroporação em canais microfluídicos, a linhagem celular oferece uma plataforma confiável para investigação.
Linha celular HL-60 para sua pesquisa
Células HL-60: Publicações científicas
Existem diversos estudos de pesquisa disponíveis sobre as células HL-60. Aqui, listamos alguns exemplos notáveis:
Este artigo científico propôs o efeito antitumoral de um composto, o Stigmast-5-en-3-ol, nas células de leucemia HL-60 e nas células de câncer de mama MCF-7.
Este estudo descreve o papel da via de sinalização JAK/STAT na proliferação das células HL-60. Além disso, os pesquisadores investigam o potencial terapêutico do composto timoquinona utilizando essa linhagem celular de leucemia. O composto inibe a proliferação celular e induz a morte celular ao reativar a expressão dos reguladores negativos da cascata JAK/STAT.
Este estudo utilizou células HL-60 para derivar um modelo de células semelhantes a macrófagos, com o objetivo de investigar a atividade anti-inflamatória dos compostos da planta Brassica.
Este estudo, publicado na revista International Immunopharmacology, desenvolveu um simulador de células neutrófilas a partir da linhagem celular HL-60 utilizando dimetilsulfóxido. O estudo observou que o gene ERK está envolvido na diferenciação dessas células.
Este artigo de pesquisa investiga o potencial anticâncer de compostos polifenólicos vegetais, ou seja, o ácido gálico e o ácido elágico, em células de leucemia HL-60 sensíveis e resistentes a medicamentos.
Linha celular HL-60: Recursos, protocolos, vídeos e mais
Vários recursos educacionais on-line estão disponíveis sobre a linha celular HL-60. Esta seção abordará alguns recursos que descrevem o cultivo e a transfecção dessa linha celular.
Protocolos de cultura celular
Os recursos que descrevem os métodos de cultura de células HL-60 são:
- Propagação da HL-60: Este documento fornece informações sobre a subcultura de células HL-60.
- Linha celular HL-60: Este site contém informações básicas sobre as células HL-60 e protocolos, incluindo cultura, congelamento e descongelamento das células.
Protocolos de transfecção
Aqui estão alguns recursos que descrevem os métodos de transfecção utilizados para as células HL-60.
- Transfecção de células HL-60: Este link apresenta um procedimento detalhado de transfecção para células de leucemia HL-60.
- Transfecção transitória de células HL-60: Este documento contém informações úteis sobre a linhagem celular e apresenta um protocolo detalhado para a transfecção transitória de células HL-60.
Vídeos relacionados à linhagem celular HL-60
Existem poucos recursos em vídeo sobre as células HL-60.
- Passagem de células HL-60: este vídeo explica o protocolo para subcultivo de células HL-60.
Esperamos que este artigo forneça a você informações básicas sobre o cultivo e a manutenção da linhagem celular HL-60. Além disso, ele pode ampliar seu conhecimento sobre as vantagens do uso dessas células leucêmicas em pesquisas. Se você planeja utilizar essa linhagem celular, faça seu pedido conosco.
Linha celular HL-60: Perguntas frequentes essenciais para pesquisadores
A linhagem celular HL-60 é uma linhagem de leucemia promielocítica derivada de um paciente com leucemia promielocítica aguda. Essa linhagem celular é amplamente utilizada em pesquisas para estudar a diferenciação das células mieloides e a expressão de oncogenes.
O ácido retinóico induz a diferenciação na linhagem celular HL-60, levando as células a amadurecerem e se transformarem em células semelhantes a granulócitos. Esse processo é fundamental para o estudo dos mecanismos subjacentes à diferenciação mieloide.
O soro é um componente crucial do meio de cultura das células hematopoiéticas, fornecendo fatores de crescimento e nutrientes essenciais para a proliferação e a manutenção das células HL-60 em cultura.
Sim, a linhagem celular HL-60 é capaz de realizar quimiotaxia, que é o movimento das células em resposta a estímulos químicos. Isso as torna úteis para ensaios de quimiotaxia e para a compreensão da migração celular.
A linhagem celular HL60, que apresenta expressão de oncogenes celulares, serve como um sistema modelo para explorar a regulação da expressão de oncogenes e seu papel na leucemogênese.
A linha celular HL-60 é de inestimável valor nos estudos de biologia celular, especialmente para a investigação do ciclo celular, dos processos de diferenciação celular e dos eventos moleculares que levam à leucemia.
Os painéis de linhagens celulares leucêmicas permitem a realização de estudos comparativos entre diversas linhagens celulares leucêmicas, incluindo sua composição genética, perfis de mutação, resposta a medicamentos e as vias moleculares envolvidas na leucemogênese, como a via MAPK.
Os certificados de análise e origem geralmente podem ser baixados ou solicitados ao fornecedor ou ao repositório que disponibiliza a linha celular HL-60, garantindo que os pesquisadores recebam células autenticadas e livres de contaminantes para seus estudos.
A linhagem celular HL-60 pode ser diferenciada para adquirir características semelhantes às dos neutrófilos primários, incluindo a capacidade de formar armadilhas extracelulares, o que permite que os pesquisadores a utilizem como um modelo substituto para estudar o comportamento e a função dos neutrófilos.
As células HL-60 são utilizadas como modelo in vitro para o estudo da leucemia promielocítica aguda, da biologia das linhagens celulares mieloides e dos efeitos de diversos compostos sobre a diferenciação e a proliferação. Elas também são utilizadas em experimentos que investigam respostas celulares, como a quimiotaxia, a expressão de oncogenes e o impacto das mutações nos processos celulares.
A abreviação “HL-60” significa “Leucemia Humana 60”. Ela se refere à 60ª linhagem celular estabelecida a partir de pacientes com leucemia na época de seu desenvolvimento. A sigla “HL” indica o foco em células leucêmicas humanas.
O tempo de duplicação das células HL-60 é de aproximadamente 36 a 48 horas em condições ideais de crescimento. No entanto, esse valor pode variar dependendo das condições de cultura e do número de passagens das células.
Quando as células HL-60 são tratadas com 12-miristato-13-acetato de forbol (PMA), elas geralmente se diferenciam em um tipo celular semelhante aos macrófagos ou monócitos. Essa diferenciação faz parte do estudo das vias de diferenciação monocítica e da compreensão dos mecanismos de diferenciação das células mieloides.
Referências
- Fleck, R., S. Romero-Steiner e M. Nahm, “Uso da linhagem celular HL-60 para medir a capacidade opsônica de anticorpos pneumocócicos”. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
- Fernando, I.S., et al., Efeitos apoptóticos e antiproliferativos do Stigmast-5-en-3-ol, proveniente de Dendronephthya gigantea, em células HL-60 de leucemia humana e células MCF-7 de câncer de mama humano. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
- Almajali, B., et al., A timoquinona suprime a proliferação celular e potencia a apoptose das células leucêmicas HL60 por meio da reexpressão de reguladores negativos da via JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Análise do potencial anti-inflamatório dos compostos bioativos da Brassica em um modelo de células semelhantes a macrófagos humanos derivadas de células HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
- Wang, D., et al., A ERK está envolvida na diferenciação e função de células semelhantes a neutrófilos HL-60 induzidas por dimetilsulfóxido, que imitam neutrófilos inflamatórios. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Atividade antileucêmica de compostos bioativos derivados de Brassica em células de leucemia mieloide HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.