Linha celular BEWO
A BeWo é uma linha celular derivada do coriocarcinoma humano amplamente utilizada na pesquisa biomédica. Ela serve como um valioso modelo in vitro para a exploração do complexo processo de desenvolvimento placentário e da sincitização dos trofoblastos humanos. Os pesquisadores também utilizam essas células para estudar o comportamento das células trofoblásticas, a produção de hormônios e o transporte de substâncias através da placenta. Além disso, as células BeWo também oferecem aplicações em estudos de toxicologia, infecções e transmissão de doenças.
Este artigo abrange conhecimentos fundamentais sobre as células BeWo que podem ajudá-lo a lidar com elas em sua pesquisa. Ele incluirá:
- Características gerais e origem das células BeWo
- Linha celular BeWo: informações sobre cultura
- Vantagens e desvantagens da linhagem celular BeWo
- Aplicações das células BeWo na pesquisa
- Publicações científicas que abordam as células BeWo
- Recursos para a linha celular BeWo: protocolos, vídeos e muito mais
Características gerais e origem das células BeWo
Conhecer previamente a origem e as características gerais de uma linha celular é fundamental para seu uso em sua pesquisa. Esta parte do artigo explora a origem da linha celular BeWo, suas características e muito mais. Aqui, você aprenderá: O que é a linha celular de coriocarcinoma BeWo? O que é a sincitialização das células BeWo? De onde vêm as células BeWo? Qual é a morfologia das células BeWo? Qual é a ploidia das células BeWo?
- A linha celular placentária BeWo teve origem no coriocarcinoma gestacional maligno de uma placenta fetal masculina em 1968 [1]. Assim, ela serve como um modelo inestimável para pesquisas sobre a placenta.
- As células BeWo apresentam uma morfologia semelhante à epitelial.
- As células BeWo são relativamente pequenas, variando entre 20 e 30 µM [2].
- As células BeWo apresentam um cariótipo estável. Seu número de cromossomos é hipotetraplóide. O número modal de cromossomos das células BeWo é 86. Ele pode variar de 71 a 178.
- As células BeWo produzem vários hormônios, a saber: somatomamotropina coriônica humana, gonadotrofina coriônica humana (hCG) e hormônios esteróides.
- As células BeWo expressam marcadores moleculares, incluindo CK 7, E-caderina e VE-caderina.
Sublinha B30
A B30 é uma sublinha das células BeWo. É utilizada para investigar a captação e o transporte de nutrientes. Isso se deve ao seu crescimento vigoroso em membranas porosas.
BeWo e JEG-3
As linhagens celulares BeWo e JEG-3 são derivadas de coriocarcinomas e utilizadas em pesquisas sobre a placenta. As células BeWo produzem hormônios em níveis mais baixos do que as JEG-3, tais como a gonadotrofina coriônica humana (hCG) e o estradiol.
Linha celular BeWo: Informações sobre o cultivo
Manter uma cultura celular pode ser complicado, a menos que você conheça os detalhes essenciais. Por exemplo: Qual é o tempo de duplicação das células BeWo? Qual é o meio de cultura das células BeWo? Como se cultiva a linha celular BeWo? E como se congela as células BeWo?
Pontos-chave para a cultura de células BeWo
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação populacional das células BeWo é de aproximadamente 30 horas.
Adesiva ou em suspensão:
A BeWo é uma linha celular aderente.
Densidade de semeadura celular:
A densidade de semeadura recomendada para as células BeWo é de 1 x 10⁴ células/cm². Para a semeadura, o meio antigo é removido das células, e estas são enxaguadas com PBS 1x. Em seguida, adiciona-se Accutase (solução de passagem) e as células são incubadas por 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. Depois, as células desprendidas são adicionadas ao meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas são então ressuspensas e transferidas para um novo frasco.
Meio de crescimento:
Para o cultivo das células BeWo, utiliza-se o meio F12K de Ham contendo 10% de FBS, 2,0 mM de L-glutamina, 2,0 mM de piruvato de sódio e 2,5 g/L de NaHCO₃. O meio de cultura das células BeWo deve ser trocado de 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células BeWo são mantidas em uma incubadora umidificada, ajustada a uma temperatura de 37 graus Celsius e com um suprimento de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células BeWo congeladas são armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C em um freezer elétrico de temperatura ultrabaixa ou na fase de vapor de nitrogênio líquido.
Processo de congelamento e meio:
Recomenda-se o congelamento das células BeWo no meio de congelamento CM-1 ou CM-ACF. As células são congeladas por meio de um método de congelamento lento. Esse método permite apenas uma queda de 1 grau na temperatura por minuto, evitando assim qualquer choque nas células e protegendo sua viabilidade.
Processo de descongelamento:
As células congeladas são descongeladas por imersão em um banho-maria pré-ajustado a 37 °C por 40 a 60 segundos, até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Em seguida, adiciona-se meio de crescimento fresco e as células são centrifugadas para remover os componentes do meio de congelamento. O sedimento celular coletado é ressuspenso e transferido para um frasco de cultura para crescimento.
Nível de biossegurança:
É necessário um laboratório de Nível 1 de Biossegurança para manusear e manter culturas de células BeWo.
Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
- Vantagens e desvantagens da linha celular BeWo
- Aplicações de pesquisa das células BeWo
- Linha celular BeWo: Informações sobre cultura
- Características gerais e origem das células BeWo
- 5. Publicações científicas sobre as células BeWo
- Recursos para a linha celular BeWo: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Vantagens e desvantagens da linha celular BeWo
As células BeWo apresentam características únicas e trazem vantagens e desvantagens específicas. Nesta seção, exploraremos algumas das mais notáveis.
Vantagens
As principais vantagens da linha celular de coriocarcinoma BeWo são:
-
Modelo de células placentárias in vitro
As células BeWo fornecem um modelo in vitro para o estudo do comportamento das células trofoblásticas e da sincitialização placentária, reproduzindo processos difíceis de observar in vivo.
-
Produção de hormônios
As células BeWo secretam hormônios, como o hCG e o lactogênio placentário, o que as torna valiosas para estudos de regulação hormonal e pesquisas em biologia reprodutiva.
Desvantagens
As desvantagens das células trofoblásticas BeWo são:
-
Linha celular cancerosa
As células BeWo foram derivadas do coriocarcinoma, que é um tumor placentário. Essa origem pode não representar totalmente a função normal das células placentárias.
Aplicações das células BeWo na pesquisa
A linha celular BeWo é amplamente utilizada em pesquisas sobre a placenta. Algumas aplicações específicas dessa linha celular são mencionadas a seguir:
- Pesquisa relacionada à placenta e à gravidez: as células BeWo são fundamentais na pesquisa sobre a placenta e a gravidez. Por exemplo, pesquisadores utilizam essas células para estudar o transporte de substâncias, incluindo medicamentos, nutrientes e toxinas, através da barreira placentária. Além disso, também investigam a produção e a regulação de hormônios, incluindo a gonadotrofina coriônica humana (hCG), o lactogênio placentário e os hormônios esteróides. Isso é importante para compreender as alterações hormonais durante a gravidez. Uma pesquisa realizada em 2018 investigou o efeito dos retardantes de chama bromados (BFRs) sobre a atividade da sulfotransferase na linhagem celular trofoblástica humana (BeWo). Essa enzima está envolvida na regulação dos níveis intracelulares do hormônio tireoidiano [3].
- Pesquisa sobre infecções e doenças: as células BeWo também são utilizadas para examinar a interação entre patógenos e células placentárias. Essa pesquisa é valiosa para compreender doenças que podem ser transmitidas da mãe para o feto e para desenvolver estratégias de proteção à saúde fetal. Além disso, essa linhagem celular ajuda os pesquisadores a investigar complicações que surgem durante a gravidez, como a pré-eclâmpsia. Por exemplo, um estudo conduzido por Michalina Bralewska em 2023 utilizou o modelo de células trofoblásticas BeWo e descobriu que tanto a cromogranina A (CgA) quanto o peptídeo derivado dela, a catestatina (CST), podem desempenhar papéis no complexo processo de patogênese da pré-eclâmpsia (PE) [4]. Posteriormente, outro estudo explorou o potencial anticâncer da tricosantina utilizando a linha celular de coriocarcinoma BeWo. A pesquisa também se empenhou em identificar biomarcadores por meio da realização de análises proteômicas comparativas antes e depois do experimento [5].
5. Publicações científicas sobre as células BeWo
Aqui estão algumas publicações científicas importantes que abordam as células trofoblásticas BeWo.
Este estudo publicado na revista *Frontiers in Bioscience-Landmark* (2022) propôs que a sinalização da AMPK ativa a mitofagia nas células trofoblásticas BeWo por meio das vias de mitofagia facilitadas pelas proteínas FUNDC1 e PRKN. Como resultado, a mitofagia ajuda a manter a produção de ATP e o potencial de membrana mitocondrial.
Este artigo foi publicado na revista *Animal Cells and Systems* (2020). O estudo propôs que o etilparabeno medeia a apoptose das células BeWo por meio da regulação da via da caspase 3.
Este estudo, publicado na revista *Drug Metabolism and Disposition* (2023), utilizou linhagens celulares placentárias, incluindo BeWo, JAR, JEG-3 e HTR-8/SVneo, para investigar a deposição de xenobióticos e esteróides nas células.
Este artigo de pesquisa publicado na revista *International Journal of Molecular Medicine* (2020) propôs que a apelina, ligante do receptor APJ, promove a proliferação das células BeWo por meio das vias de sinalização APJ, ERK1/2, Stat3 e AMPK. Assim, ela poderia ser uma adipocina essencial na regulação do desenvolvimento da placenta.
Este estudo publicado na revista *Epilepsia* (2021) explorou os efeitos dos nutrientes fetais e dos anticonvulsivantes sobre os transportadores de colina na linhagem celular trofoblástica de origem humana BeWo.
Recursos para a linhagem celular BeWo: protocolos, vídeos e muito mais
Aqui estão alguns recursos online disponíveis sobre as células BeWo:
- Transfecção in vitro: este vídeo ajudará você a aprender o protocolo de transfecção in vitro de DNA plasmídico para células aderentes.
O link a seguir contém informações sobre cultura celular para as células BeWo:
- Células BeWo: este site contém informações essenciais sobre cultura celular da linhagem BeWo. Isso inclui informações sobre meios de cultura e condições de cultivo. Também apresenta protocolos para subcultura e manuseio de culturas criopreservadas e proliferativas.
Referências
- Weber, M., et al., Citogenômica de seis linhagens celulares trofoblásticas humanas. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Características dos trofoblastos em cultura de longo prazo. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt e H.M. Stapleton, “Interrupção da atividade da sulfotransferase do hormônio tireoidiano por retardantes de chama bromados na linhagem celular de coriocarcinoma placentário humano, BeWo”. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha e A. Sakowicz, Redução do nível da proteína CST derivada da CgA nas linhagens celulares trofoblásticas HTR-8/SVneo e BeWo causada pelo ambiente pré-eclâmptico. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al., Análise proteômica comparativa da adição do fármaco tricosantina à linhagem celular BeWo. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.