Linha celular BxPC-3
A BxPC-3 é uma linha celular de câncer pancreático derivada de humanos. É amplamente utilizada em estudos sobre o câncer. Os pesquisadores empregam essas células principalmente para estudar a biologia do câncer pancreático, identificar alvos terapêuticos e desenvolver medicamentos anticâncer.
- Meio de crescimento
- O meio RPMI 1640 é utilizado para a cultura da linha celular BxPC-3. Ele é suplementado com 10% de soro fetal bovino, 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ para alcançar o crescimento celular ideal. O meio deve ser trocado de 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação das células BxPC-3 varia entre 48 e 60 horas.
- Tipo de crescimento
- A BxPC-3 é uma linhagem celular aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-3
- Disponível na
- Cytion — Encomende a BxPC-3
Este artigo traz informações essenciais sobre a linha celular BxPC-3 que podem ajudar significativamente no seu trabalho com ela. Principalmente, ele abordará:
- Informações gerais e origem da linha celular BxPC-3
- Cultivo de células BxPC-3
- Linha celular BxPC-3: vantagens e limitações
- Aplicações das células BxPC-3 na pesquisa
- Publicações científicas sobre as células BxPC-3
- Recursos para a linha celular BxPC-3: protocolos, vídeos e muito mais
- Informações gerais e origem da linha celular BxPC-3
- Cultivo das células BxPC-3
- Linha celular BxPC-3: vantagens e limitações
- Aplicações das células BxPC-3 na pesquisa
- 5. Publicações científicas sobre as células BxPC-3
- Recursos para a linha celular BxPC-3: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Informações gerais e origem da linha celular BxPC-3
Conhecer a origem de uma linha celular é fundamental para sua aplicabilidade na pesquisa. Estar familiarizado com suas características, incluindo morfologia, tamanho celular e ploidia, torna seu uso mais simples e prático. Aqui, você conhecerá a origem e as características gerais das células BxPC-3: O que são as células BxPC-3? O que é a linha celular BxPC-3? Qual é a origem da linha celular BxPC-3? Qual é a morfologia das células BxPC-3?
- As células BxPC-3, células de carcinoma pancreático humano, foram derivadas de uma mulher europeia de 61 anos com adenocarcinoma pancreático em 1986. Essas células foram confirmadas como tumorigênicas mesmo após a paciente ter se submetido a várias sessões de radioterapia e quimioterapia. Assim, a linhagem celular estabelecida é um modelo inestimável para o estudo do desenvolvimento e da progressão do câncer.
- As células BxPC-3 apresentam uma morfologia semelhante à das células epiteliais.
- O número modal de cromossomos para o BxPC-3 é 59. Essas células apresentam uma deleção homozigótica no cromossomo 18q, que codifica a proteína SMAD4/DPC4. Além disso, a linhagem celular não apresenta a mutação kras do BxPC-3, comum entre os tumores pancreáticos. A deleção do gene BRAF também é encontrada nessas células de câncer pancreático.
Qual é a diferença entre BxPC3 e PANC-1?
As células BxPC-3 PADC (adenocarcinoma ductal pancreático) e PANC-1 são linhagens celulares primárias de câncer pancreático com morfologia epitelial. Nesse contexto, as primeiras possuem mais propriedades de tipo epitelial, enquanto as últimas apresentam mais atributos mesenquimais [1].
Cultura de células BxPC-3
A linhagem celular BxPC-3 é amplamente utilizada em laboratórios de pesquisa sobre câncer. É necessário conhecer os seguintes pontos-chave para a cultura eficiente dessa linhagem celular de câncer de pâncreas. Você aprenderá: Qual é o tempo de duplicação das células BxPC-3? Como se cultiva a linhagem celular BxPC-3?
Pontos-chave para a cultura de células BxPC-3
Tempo de duplicação populacional:
O tempo de duplicação das células BxPC-3 varia entre 48 e 60 horas.
Adereentes ou em suspensão:
A BxPC-3 é uma linha celular aderente.
Proporção de divisão:
As células BxPC-3 são subcultivadas na proporção de 1:2 a 1:4. As células são lavadas com PBS 1x e incubadas com uma solução de passagem chamada Accutase. Após 8 a 10 minutos, meio fresco é adicionado às células, que são então centrifugadas. O sedimento é novamente ressuspenso no meio, e as células são transferidas para um novo recipiente de cultura para crescimento.
Meio de crescimento:
O meio RPMI 1640 é utilizado para a cultura da linhagem celular BxPC-3. Ele é suplementado com 10% de soro fetal bovino, 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ para alcançar o crescimento celular ideal. O meio deve ser substituído de 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As culturas de células BxPC-3 são mantidas em uma incubadora umidificada a 37 °C conectada a um suprimento de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células congeladas são geralmente armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C ou na fase de vapor do nitrogênio líquido para proteger a viabilidade das células.
Processo de congelamento e meio:
O CM-1 ou o CM-ACF podem ser usados para congelar culturas de células BxPC-3. É seguido um processo de congelamento lento, que permite apenas uma queda de 1 °C na temperatura, para evitar que as células sofram qualquer choque.
Processo de descongelamento:
As células BxPC-3 congeladas são descongeladas em um banho-maria pré-ajustado a 37 °C por 40 a 60 segundos. Após restar um pequeno pedaço de gelo, as células são adicionadas a meios de cultura frescos e centrifugadas para remover os elementos do meio de congelamento. Em seguida, o sedimento celular é ressuspenso e as células são transferidas para o frasco para crescimento.
Nível de biossegurança:
As culturas de células BxPC-3 são mantidas em laboratórios de nível de biossegurança 1.
Linha celular BxPC-3: Vantagens e limitações
A BxPC-3 é uma linha celular de adenocarcinoma pancreático bem conhecida, associada a diversas vantagens e limitações. As principais vantagens e desvantagens dessa linha celular estão listadas a seguir.
Vantagens
As principais vantagens das células BxPC-3 são:
-
Modelo in vitro do câncer de pâncreas
As células BxPC-3, derivadas de pacientes com adenocarcinoma pancreático, apresentam características relevantes, tornando-as um modelo adequado para o estudo do comportamento do câncer pancreático in vitro.
-
Linha celular tumorigênica
As células BxPC-3 possuem propriedades tumorigênicas e podem formar tumores quando injetadas em camundongos nude ou imunocomprometidos. Esses tumores se assemelham muito aos tumores primários de adenocarcinoma pancreático, tornando o modelo de xenoenxerto BxPC-3 ideal para o estudo do crescimento e da progressão do câncer.
Limitações
As limitações associadas à linhagem celular BxPC-3 são:
-
Contaminação cruzada
A linha celular BxPC-3, como qualquer outra, apresenta risco de contaminação cruzada. Os pesquisadores devem agir com cautela e seguir rigorosamente os protocolos de prevenção de contaminação ao manusear essas células.
-
Taxa de crescimento lenta
As células BxPC-3 apresentam uma taxa de proliferação relativamente lenta, com um tempo de duplicação que varia entre 48 e 60 horas. Essa característica pode exigir períodos de incubação mais longos para experimentos específicos, o que pode causar atrasos no andamento da pesquisa.
Aplicações das células BxPC-3 na pesquisa
As células BxPC-3 oferecem diversas aplicações na pesquisa sobre o câncer. As aplicações mais comuns são:
- Pesquisa sobre câncer de pâncreas: as células BxPC-3 imitam o adenocarcinoma pancreático e, portanto, são utilizadas para explorar os mecanismos genéticos e moleculares subjacentes ao desenvolvimento e crescimento do tumor. Além disso, os pesquisadores descobrem novos biomarcadores e alvos terapêuticos utilizando essas células. Além disso, as células BxPC-3 expressam significativamente fatores angiogênicos, ou seja, interleucina-8 (IL-8), prostaglandina E2 (PGE2) e fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), o que as torna adequadas para o estudo da angiogênese. Nesse contexto, a angiogênese é um processo crucial associado ao crescimento e à metástase do câncer. Um estudo publicado em 2022 demonstrou que a superexpressão de laminina-5 gama-2 (LAMC2) no BxPC3 PDAC (adenocarcinoma ductal pancreático) potencia sua tumorigênese por meio da regulação da via de sinalização EGFR/ERK1/2/ AKT/mTOR [2].
- Descoberta e desenvolvimento de medicamentos: a linhagem celular BxPC-3 serve como um modelo inestimável para testes de medicamentos anticâncer. Pesquisadores examinam os efeitos citotóxicos, antimetastáticos e apoptóticos de medicamentos potenciais no PDAC BxPC3. Um estudo conduzido por Alexandria Turner e colegas em 2020 explorou as propriedades apoptóticas dos extratos do fruto de Elaeocarpus reticulatus em células de câncer pancreático BxPC-3 [3]. Da mesma forma, foi realizada em 2020 uma pesquisa que determinou o potencial anticâncer de um extrato metanólico de uma planta chamada Oxialis obtriangulata em células BxPC-3. Além disso, os pesquisadores também estudaram a via mecânica celular pela qual o extrato vegetal exercia efeitos terapêuticos [4].
5. Publicações científicas sobre as células BxPC-3
Esta seção lista algumas das publicações mais citadas e interessantes que abordam a linhagem celular BxPC-3.
A licocumarona induz a morte celular do adenocarcinoma pancreático BxPC-3 ao inibir a DYRK1A
Esta publicação na revista *Chemico-Biological Interactions* (2020) explorou os efeitos apoptóticos de um produto natural, a licocumarona, nas células de câncer pancreático BxPC-3.
Este artigo de pesquisa foi publicado na revista Anticancer Research (2022). O estudo propôs que a hidroxicloroquina causa a morte celular das células BxPC-3 por meio da inibição do gene BCL-XL.
Esta pesquisa foi publicada em 2020 no Journal of Cellular Biochemistry. O estudo afirma que um composto natural, o salidrosídeo, exibe atividades anticâncer nas células BxPC-3 ao regular a cascata de sinalização do HIF-1α (fator induzível por hipóxia) e do LOXL2.
Este artigo publicado na revista *Biomedicine & Pharmacotherapy* sugere que o ibrutinibe pode ser utilizado como um excelente radiossensibilizador em pacientes com câncer de pâncreas. In vitro, um estudo em células BxPC-3 indica que ele diminui a fosforilação do EGFR nas células BxPC-3, bem como a expressão de pAKT e de genes a jusante regulados positivamente pela radioterapia.
Este estudo publicado na revista *Integrative Cancer Therapies* propôs que um produto natural, a quelidonina, exerce atividade apoptótica em células pancreáticas humanas BxPC-3 por meio da regulação das vias de sinalização de p53 e GADD45a nas células BxPC-3.
Recursos para a linhagem celular BxPC-3: protocolos, vídeos e muito mais
A linhagem celular BxPC-3 possui muitas vantagens interessantes que a tornam adequada para uso em pesquisa. Muitos recursos online sobre a linhagem celular BxPC-3 mencionam seus protocolos de manuseio, manutenção e transfecção.
- Transfecção de BxPC-3: Este vídeo é um guia passo a passo para aprender o protocolo de transfecção das células BxPC-3.
Esta seção do artigo inclui alguns links que explicam os protocolos de cultura celular do BxPC-3.
- Cultura de células BxPC-3: Este site ajudará você a aprender os protocolos para a subcultura e o manuseio de culturas de BxPC-3 criopreservadas e proliferativas.
Referências
- Kim, Y., et al., Perfil proteômico comparativo de linhagens celulares de adenocarcinoma ductal pancreático. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., A superexpressão da laminina-5 gama-2 promove a tumorigênese do adenocarcinoma ductal pancreático por meio da cascata EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Extratos do fruto de Elaeocarpus reticulatus reduzem a viabilidade e induzem a apoptose em células de câncer pancreático in vitro. Molecular Biology Reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Potencial anticâncer de Oxialis obtriangulata em células de câncer pancreático por meio da regulação da via mediada por ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.