Publicado: 17 de outubro de 2023 | Última revisão: maio de 2026
Células A431: Origem, condições de cultura e aplicações em pesquisa
A431 é uma linhagem celular de carcinoma epidermoide humano derivada da pele de uma paciente de 85 anos. É uma das linhagens celulares mais utilizadas na pesquisa biomédica, particularmente na biologia do câncer, imuno-oncologia, dermatologia e descoberta de medicamentos. As células A431 apresentam uma superexpressão maciça do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) — apresentando aproximadamente 2 a 3 milhões de receptores por célula, cerca de 20 a 50 vezes mais do que as células epiteliais normais —, o que as torna o modelo in vitro de referência para estudos de sinalização do EGFR e para o teste de terapias direcionadas ao EGFR, como o cetuximabe e o erlotinibe. As células A431 estão disponíveis exclusivamente na Cytion, seu banco de células europeu independente.
- Espécie / Origem
Humana (mulher, 85 anos) - Tecido
Epiderme da pele (carcinoma epidermoide) - Morfologia
Epithelial, aderente - Tempo de duplicação
80–100 horas - Meio de crescimento
DMEM + 10% de FBS - Nível de biossegurança
BSL-1 - Característica principal
Superexpressão de EGFR (~2–3 milhões de receptores/célula) - Biomarcadores principais
EGFR (amplificado), TP53 (mutante), KRAS (tipo selvagem), PTEN (expresso) - Número do produto
300112 — Encomende células A431 da Cytion
- Células A431: Características gerais e origem
- Linha celular A431: Informações sobre cultura
- Vantagens e desvantagens da linha celular A431
- Aplicações de pesquisa das células A431
- A431 em comparação com outras linhagens celulares de câncer de pele
- Publicações científicas que utilizam as células A431
- Recursos, protocolos e vídeos
- Perguntas frequentes
Células A431: características gerais e origem
Esta seção aborda as principais propriedades biológicas da linha celular A431 — incluindo sua origem, morfologia, cariótipo e a superexpressão de EGFR, que a torna excepcionalmente valiosa para a pesquisa.
Origem e história da linhagem celular A431
- A A431, uma linhagem celular de câncer de pele humano, foi obtida da epiderme de uma paciente de 85 anos com carcinoma epidermoide [1]. Ela foi estabelecida por D.J. Giard et al., que desenvolveram várias outras linhagens celulares a partir de tumores sólidos.
- A linha celular foi amplamente distribuída e validada por bancos de células independentes em todo o mundo, incluindo a Cytion, como um modelo de pesquisa confiável e reproduzível.
Morfologia e cariótipo da A431
- As células A-431 apresentam morfologia epitelial. Elas se agregam e formam aglomerados celulares em condições padrão de cultura.
- A linhagem celular de câncer de pele A431 é hipertriploide. O número modal de cromossomos é 74, ocorrendo em aproximadamente 36% das células. Ploidias mais elevadas também estão presentes em cerca de 1% da população celular.
Expressão de EGFR nas células A431
A superexpressão de EGFR é a característica definidora das células A431 e a principal razão para seu uso generalizado. As células A431 apresentam uma amplificação genômica do locus do gene EGFR, resultando em aproximadamente 2 a 3 milhões de receptores de EGFR por célula — 20 a 50 vezes mais do que nas células epiteliais normais. Isso torna a linha A431 o controle positivo padrão-ouro para:
- Validação de anticorpos anti-EGFR por Western blot, citometria de fluxo e imunofluorescência
- Testes de anticorpos monoclonais direcionados ao EGFR, como cetuximabe e panitumumabe
- Avaliação de inibidores da tirosina quinase (TKIs) do EGFR, como erlotinibe, gefitinibe e afatinibe
- Estudo de vias de sinalização a jusante, incluindo PI3K/AKT/mTOR e RAS/MAPK/ERK
Linha celular A431: Informações sobre cultura
Conhecer os requisitos de cultura de uma linhagem celular facilita o manuseio. Esta seção aborda o tempo de duplicação, o meio de crescimento, a repiquagem, a criopreservação e os requisitos de biossegurança para a linhagem celular A431.
Pontos-chave para o cultivo de células A431
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação populacional das células A431 varia de 80 a 100 horas.
Adesiva ou em suspensão:
A A431 é uma linha celular aderente.
Densidade de semeadura:
1 x 10⁴ células/cm² é a densidade ideal para a linhagem celular A431. As células atingem a confluência em aproximadamente 4 dias nessa densidade. As células aderentes são lavadas com PBS (1×) e incubadas com solução de passagem Accutase; em seguida, são ressuspensas em meio de cultura, centrifugadas e transferidas para novos frascos.
Meio de crescimento:
Meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 1,0 mM de piruvato de sódio, 1,5 g/L de NaHCO₃ e 4 mM de L-glutamina. O meio deve ser trocado a cada 2–3 dias.
Condições de crescimento:
As células cancerosas A431 são cultivadas em uma incubadora umidificada com 5% de CO₂ a 37 °C.
Armazenamento:
Armazene em um freezer elétrico ou na fase de vapor de nitrogênio líquido a temperaturas inferiores a −150 °C para preservar a viabilidade celular.
Processo de congelamento e meio:
CM-1 ou CM-ACF são os meios de congelamento recomendados para as células A431. Utilize um método de congelamento lento com taxa controlada (−1 °C/min).
Processo de descongelamento:
Descongele rapidamente as células A431 congeladas em banho-maria a 37 °C (40–60 segundos). Quando restar um pequeno pedaço de gelo, adicione meio de cultura e centrifugue. Resuspenda as células colhidas e transfira-as para frascos de cultura.
Nível de biossegurança:
Recomenda-se o Nível de Biossegurança 1 (BSL-1) para o manuseio de culturas de A431.
Vantagens e desvantagens da linha celular A431
A linha celular A431 possui características distintas que a tornam altamente útil, mas também limitada em determinados contextos. Aqui está um resumo equilibrado.
Vantagens
As principais vantagens da linha celular cancerosa A431 são:
Superexpressão de EGFR
As células A431 superexpressam o EGFR a uma taxa de 2 a 3 milhões de receptores por célula, servindo como o padrão-ouro de controle positivo para estudos de sinalização do EGFR e validação de medicamentos anti-EGFR (cetuximabe, erlotinibe, gefitinibe).
Tumorigenicidade
As células A431 são tumorigênicas e formam tumores facilmente em camundongos imunocomprometidos, tornando-as uma ferramenta confiável para modelos de câncer com xenoenxertos, a fim de estudar a dinâmica do crescimento tumoral e avaliar novos tratamentos contra o câncer in vivo.
Bem caracterizadas
Décadas de pesquisas publicadas significam que as células A431 são amplamente caracterizadas nos níveis genômico, proteômico e fenotípico, proporcionando uma base científica robusta para o desenho experimental.
Formação de esferóides 3D
As células A431 formam facilmente esferóides 3D compactos em condições de aderência ultrabaixa, tornando-as compatíveis com plataformas modernas de triagem de organoides e esferóides para estudos de penetração e eficácia de medicamentos.
Desvantagens
As desvantagens das células A431 são:
Anomalias genéticas
A431 é uma linhagem celular cancerosa com mutações genéticas acumuladas e alterações cromossômicas (hipertriploide, número modal 74) que podem não reproduzir totalmente as características originais do tumor.
Risco de contaminação microbiana
A linha A431 é propensa à contaminação bacteriana. A manutenção de técnicas assépticas rigorosas e a realização de testes de rotina para micoplasma são essenciais para se obter resultados confiáveis.
Não é representativa de todos os tumores com EGFR
Como a expressão de EGFR na A431 é impulsionada pela amplificação gênica, e não por mutação (como no câncer de pulmão), os resultados podem não ser diretamente aplicáveis a contextos de tumores com mutação no EGFR, como o câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC).
Aplicações das células A431 na pesquisa
A linhagem celular A431 é amplamente utilizada em diversas disciplinas de pesquisa. Sua biologia única do EGFR, sua tumorigenicidade e seu genoma bem caracterizado fazem dela uma das linhagens de células cancerosas humanas mais versáteis disponíveis.
- Biologia do câncer: a A431 é uma ferramenta poderosa para investigar os mecanismos celulares e moleculares que impulsionam o crescimento, a metástase e a invasão do câncer. Estudos mapearam as vias de sinalização PI3K/AKT/mTOR e RAS/MAPK/ERK nessa linha celular, tendo-se demonstrado que a inibição induz a apoptose em células tumorais cutâneas A431 [2, 3].
- Testes de terapia direcionada ao EGFR: As células A431 são o padrão-referência para a avaliação de terapêuticas anti-EGFR — anticorpos monoclonais (cetuximabe, panitumumabe) e inibidores de tirosina quinase (TKI) de molécula pequena (erlotinibe, gefitinibe, afatinibe, osimertinibe).
- Testes e avaliação de medicamentos: As células A431 são utilizadas para avaliar novos candidatos a medicamentos anticâncer. Um estudo de 2022 realizado por Rahim et al. demonstrou potentes efeitos antiproliferativos de nanopartículas de prata sintetizadas biogenicamente a partir de Alstonia angustiloba nas células A431 [4].
- Modelos de xenoenxertos tumorais: As células A431 são tumorigênicas em camundongos imunodeficientes, permitindo a criação de modelos de xenoenxertos subcutâneos e ortotópicos para estudos de eficácia in vivo. Lim et al. utilizaram xenoenxertos derivados de A431 para avaliar os efeitos radiossensibilizantes do EGF exógeno in vivo [5].
- Toxicidade cutânea e pesquisa dermatológica: As células A431 são amplamente utilizadas por empresas farmacêuticas e de cosméticos para avaliar a toxicidade dérmica, a penetração cutânea e os perfis de segurança de compostos aplicados por via tópica.
- Modelos esferoidais e organoides 3D: As células A431 formam esferoides 3D compactos em condições de adesão ultrabaixa ou em gota suspensa, permitindo estudos de penetração e resistência a medicamentos mais relevantes do ponto de vista fisiológico.
- Validação de anticorpos anti-EGFR: Devido à sua extrema densidade de EGFR, as células A431 são o controle positivo padrão para a validação de anticorpos anti-EGFR em Western blot, imunofluorescência, IHC e citometria de fluxo.
A431 vs. outras linhagens celulares de câncer de pele
A escolha da linha celular correta é fundamental para a validade experimental. Veja a seguir como a A431 se compara a outras linhas celulares de câncer de pele e de células escamosas comumente utilizadas:
| Característica | A431 | A375 (melanoma) | SCC-25 (Carcinoma espinocelular oral) | HaCaT (queratinócito) |
|---|---|---|---|---|
| Tipo de câncer | Carcinoma epidermoide | Melanoma maligno | Carcinoma espinocelular oral | Queratinócito imortalizado |
| Expressão de EGFR | +++ (~2–3 milhões/célula) | + (baixa) | ++ (moderada) | ++ (moderada) |
| Tumorigenicidade | Sim | Sim | Sim | Não |
| Morfologia | Epithelial, aderente | Fusiforme, aderente | Epithelial, aderente | Epithelial, aderente |
| BSL | 1 | 1 | 1 | 1 |
| Uso principal | Pesquisa sobre EGFR, testes de medicamentos anticâncer | Biologia do melanoma, inibidores de BRAF | Câncer de cabeça e pescoço, estudos de radiação | Biologia da pele, função de barreira |
Publicações científicas que apresentam as células A431
Aqui estão algumas publicações importantes, revisadas por pares, que apresentam a linhagem celular A431 de carcinoma cutâneo.
Publicado na revista *Materials Today Communications* (2020). Avaliou o potencial anticâncer de nanofibras de poli-ε-caprolactona carregadas com curcumina e de álcool polivinílico-AuNPs contra células cancerosas A431.
O miRNA-221 promove a progressão do carcinoma espinocelular cutâneo ao ter como alvo o PTEN
Publicado na revista *Cellular & Molecular Biology Letters* (2019). Propôs-se que o microRNA-221 desempenha um papel oncogênico no carcinoma espinocelular cutâneo ao atuar sobre o gene supressor de tumor PTEN.
Publicado na revista BMC Complementary Medicine and Therapies (2016). Demonstrou que a vincristina do fungo Eutypella spp–CrP14 induz a apoptose nas células A431.
A superexpressão de CDC42SE1 nas células A431 reduziu a proliferação celular ao inibir a via Akt
Publicado na revista Cells (2019). Identificou o CDC42SE1 como um potencial biomarcador da progressão do câncer de pele, sendo que sua regulação negativa facilita a tumorigênese nas células A431.
A metformina inibe a proliferação das células A431 ao modular a via de sinalização PI3K/Akt
Publicado na revista Experimental and Therapeutic Medicine (2015). Demonstrou que a metformina suprime a proliferação das células A431 ao regular a via de sinalização PI3K/Akt.
Recursos para a linhagem celular A431: protocolos, vídeos e muito mais
Os recursos a seguir oferecem orientações práticas para o trabalho com células A431 em laboratório.
- Transfecção de células A-431 — Um guia em vídeo passo a passo para a transfecção de células cancerosas A431.
- Linha celular cancerosa A431 — Página do produto da Cytion — Informações completas sobre cultura celular: meio de crescimento, densidade de semeadura, repico, criopreservação e certificados de qualidade.
- Protocolo de cultura de células A431 — Um protocolo externo conciso para a cultura da linha celular A431, da Bio-Protocol.
- Veja todas as linhagens celulares de câncer de pele da Cytion — Explore toda a gama de linhagens celulares de câncer de pele disponíveis na Cytion.