Células endoteliais da veia umbilical humana (HUVEC)
As HUVEC são células endoteliais primárias que constituem uma ferramenta essencial na pesquisa biomédica. Elas auxiliam os pesquisadores no estudo da angiogênese, da biologia vascular e de doenças como a aterosclerose e o câncer. As HUVECs são utilizadas para explorar o comportamento das células endoteliais, os mecanismos de sinalização celular e os testes de medicamentos, oferecendo insights valiosos sobre possíveis terapias ou tratamentos para doenças cardiovasculares e câncer. Elas também servem como um sistema modelo para estudos de biologia vascular.
Origem e características gerais das células HUVEC
O conhecimento sobre a origem e as características gerais de uma linhagem celular é fundamental para determinar sua adequação ao seu estudo. Esta seção ajudará você a conhecer essas informações essenciais sobre as células endoteliais HUVEC: Para que servem as células HUVEC? Qual é a sigla completa de HUVEC? Quais são as características distintivas das HUVEC? Qual é a morfologia das HUVEC? Qual é o diâmetro das HUVEC? Qual é o tamanho das células HUVEC?
- As células HUVEC são extraídas do endotélio da veia do cordão umbilical humano.
- A morfologia das HUVEC é semelhante à das células endoteliais. Elas geralmente têm forma poligonal e um núcleo redondo no centro.
- O tamanho das células HUVEC é de 17 μm de diâmetro.
- Essas células endoteliais são diplóides. Possuem um número modal de cromossomos de 46.
HUVEC TERT2
HUVEC TERT2 é uma linhagem celular imortalizada derivada de células endoteliais primárias da veia umbilical humana (HUVECs). Ela foi desenvolvida por meio da introdução do gene da transcriptase reversa da telomerase humana (TERT) no genoma das células HUVEC. Essa modificação contribuiu para prolongar sua vida útil em cultura, permitindo experimentos de longo prazo sem as limitações associadas às HUVECs primárias.
Qual é a diferença entre HUVEC e HMEC-1?
A estrutura e a complexidade das linhagens celulares endoteliais HUVEC e HMEC-1 são comparáveis. No entanto, as células HMEC-1 apresentam uma população mais homogênea do que as HUVECs no que diz respeito ao tamanho e à granularidade celular. Isso pode reduzir as variações nos dados experimentais.
Informações sobre o cultivo da linhagem celular HUVEC
Esta seção do artigo tem como objetivo fornecer a você conhecimentos essenciais sobre a cultura de células HUVEC. Isso facilitará muito o seu trabalho com elas. Aqui, você encontrará respostas para as seguintes perguntas frequentes: Qual é o tempo de duplicação das células HUVEC? Qual é a densidade de semeadura das células HUVEC? Quantas passagens existem nas células HUVEC? O que é o meio de cultura para células HUVEC? Como se cultiva células HUVEC?
Pontos-chave para a cultura de células HUVEC
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação das HUVEC é de aproximadamente 23,5 horas. No entanto, ele pode variar de acordo com as condições de cultura celular e o número de passagens.
Adesivas ou em suspensão:
As HUVEC são uma linhagem celular aderente. As células crescem e formam monocamadas.
Proporção de subcultura:
A proporção de subcultivo para as HUVECs é de 1:2 a 1:4. Para a semeadura, as células são lavadas com solução salina tamponada com fosfato 1x e submetidas a uma solução de dissociação (Accutase) por 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. Em seguida, adiciona-se o meio de cultura, e as células desprendidas são centrifugadas. O sobrenadante é descartado, e o sedimento celular é cuidadosamente ressuspenso. As células são transferidas para um novo frasco de cultura para crescimento.
Meio de crescimento:
O meio de crescimento de células endoteliais é utilizado para a cultura de células HUVEC. O meio é substituído a cada 2 a 3 dias. As células HUVEC podem ser utilizadas por até 8 a 10 passagens.
Condições de crescimento:
A linhagem de células endoteliais humanas (HUVEC) é mantida em uma incubadora umidificada com 5% de CO₂ a 37 °C.
Armazenamento:
As células HUVEC são geralmente armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C em um freezer de temperatura ultrabaixa ou na fase de vapor de nitrogênio líquido. Isso protege a viabilidade celular por períodos mais longos.
Processo de congelamento e meio:
Para a preservação das células HUVEC, recomenda-se o uso dos meios de congelamento CM-1 ou CM-ACF. Geralmente, recomenda-se um processo de congelamento lento, pois permite uma redução de apenas 1 °C na temperatura por minuto, evitando o choque nas células e mantendo a viabilidade.
Processo de descongelamento:
Para descongelar as células congeladas, coloque-as em um banho-maria pré-aquecido a 37 °C por 40 a 60 segundos, até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Em seguida, adicione meio fresco às células e centrifugue. Essa etapa é necessária para remover quaisquer resíduos do meio de congelamento das células. Resuspenda o sedimento celular e transfira as células para um novo frasco com o meio de cultura.
Nível de biossegurança:
É necessário um laboratório de Nível 1 de Biossegurança para o manuseio adequado de culturas de células HUVEC.
Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
Vantagens e limitações
Assim como outras linhagens celulares humanas, as células HUVEC têm suas próprias vantagens e limitações. Nesta seção, abordaremos algumas das mais notáveis, que impactam significativamente seu uso em pesquisas.
Vantagens
As principais vantagens das células HUVEC são:
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Modelo de célula endotelial
Modelos altamente relevantes para o estudo da angiogênese, da biologia vascular e de doenças relacionadas à função endotelial.
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Fácil de cultivar
Relativamente fáceis de isolar de cordões umbilicais humanos. Não apresentam requisitos exigentes de cultura celular e são facilmente mantidas em laboratórios de pesquisa.
Limitações
As limitações associadas à linhagem de células endoteliais HUVEC são:
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Vida útil limitada
As HUVECs têm vida útil limitada, normalmente com capacidade para 8 a 10 passagens, o que constitui uma limitação para experimentos de longo prazo. Elas podem sofrer senescência à medida que o número de passagens aumenta.
Aplicações das células HUVEC na pesquisa
As células HUVEC apresentam um potencial significativo para diversas aplicações no campo biomédico. A seguir, destacaremos alguns usos importantes das células HUVEC na pesquisa.
- Estudos sobre doenças cardiovasculares: a linhagem celular HUVEC é um valioso modelo de célula endotelial, proporcionando, assim, insights sobre os mecanismos subjacentes a doenças cardiovasculares, como aterosclerose, trombose e hipertensão. Pesquisadores utilizam essas células para investigar os mecanismos subjacentes à disfunção endotelial, ao estresse oxidativo e à inflamação. Por exemplo, um estudo realizado em 2020 utilizou HUVECs e demonstrou que o RNA não codificante longo TTTY15 desempenha um papel fundamental na atenuação da lesão das células endoteliais vasculares mediada pela hipóxia, atuando no eixo do miRNA-186-5p [1].
- Pesquisa sobre câncer: As HUVECs são ideais para o estudo da biologia vascular. Por isso, são utilizadas para explorar a angiogênese tumoral e as interações das células endoteliais. Isso auxilia os pesquisadores a compreender como os tumores obtêm suprimento sanguíneo excedente e se proliferam. Por exemplo, Hui Wang e colegas descobriram que os exossomos liberados pelas células do carcinoma espinocelular oral (OSCC) aumentam os níveis de miRNA-210-3p e diminuem a expressão de efrina A3 nas células HUVEC, além de promoverem a formação de tubos por meio da regulação da cascata PI3K/AKT, conforme confirmado pelo ensaio de formação de tubos em HUVEC [2].
- Testes de medicamentos: As células endoteliais HUVEC são amplamente utilizadas para testes de medicamentos. Os pesquisadores podem avaliar a eficácia, a toxicidade e os possíveis efeitos colaterais de compostos naturais, nanopartículas e outros agentes terapêuticos in vitro utilizando HUVECs. Por exemplo, um estudo avaliou a toxicidade de nanopartículas de prata sintetizadas a partir do extrato de Rheum ribes utilizando células HUVEC [3].
Publicações que abordam as células HUVEC
Esta seção do artigo listará algumas publicações de pesquisa interessantes e frequentemente citadas que abordam as células HUVEC.
Este estudo foi publicado na revista Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Ele afirmou que o ácido gama-aminobutírico (GABA), um neurotransmissor, inibe o estresse oxidativo induzido pelo H₂O₂ nas células HUVEC; portanto, poderia ser um agente farmacológico eficaz contra doenças cardiovasculares relacionadas a danos oxidativos.
Este estudo, publicado na revista *Biochemical and Biophysical Research Communications* (2020), explorou como o estrogênio regula um transdutor de sinal, a glicoproteína 130 (gp130), nas células HUVEC.
A rigidez do substrato regulou a migração e o potencial de angiogênese das células A549 e HUVECs
Este artigo de pesquisa publicado no Journal of Cellular Physiology (2017) investigou os efeitos da variação da rigidez do substrato na migração e na angiogênese de células endoteliais (A549 e HUVECs). Foram realizados ensaios de migração e angiogênese de HUVECs para avaliar esses efeitos.
A deposição lisossomal de nanopartículas de óxido de cobre provoca a morte das células HUVEC
Esta pesquisa publicada na revista *Biomaterials* (2018) investiga os possíveis mecanismos responsáveis pela toxicidade das nanopartículas de óxido de cobre nas células endoteliais vasculares.
Este estudo publicado na revista *Medicine* (2020) propôs que um composto natural, a quercetina, suprime a apoptose e a inflamação das HUVECs mediadas pelo TNF-alfa por meio da regulação das vias de sinalização AP-1 e NF-kB.
6. Recursos para a linhagem celular HUVEC: protocolos, vídeos e muito mais
A seguir, apresentamos alguns recursos online disponíveis sobre as células HUVEC.
- Transfecção de HUVEC: Este link fornece informações abrangentes sobre a transfecção de HUVEC. Por exemplo, inclui informações sobre reagentes de transfecção e um protocolo para a transfecção in vitro de HUVEC.
O link a seguir contém o protocolo de cultura de células HUVEC.
- Cultura de células HUVEC: Este documento ajudará você a aprender os protocolos de cultura de células HUVEC para subcultura e manuseio de culturas criopreservadas.
Referências
- Zheng, J., et al., O LncRNA TTTY15 regula a lesão das células endoteliais vasculares induzida pela hipóxia por meio do direcionamento do miR-186-5p em doenças cardiovasculares. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
- Wang, H., et al., Os exossomos do OSCC regulam o miR-210-3p, direcionando-se ao EFNA3 para promover a angiogênese do câncer bucal por meio da via PI3K/AKT. BioMed Research International, 2020. 2020.
- Unal, İ. e S. Egri, Biossíntese de nanopartículas de prata utilizando o extrato aquoso de Rheum ribes, caracterização e avaliação de sua toxicidade em HUVECs e Artemia salina. Inorganic and Nano-Metal Chemistry, 2022: p. 1-14.