Células BEAS-2B – Células BEAS-2B na pesquisa de doenças respiratórias: um guia abrangente
A BEAS-2B é uma linhagem celular epitelial pulmonar humana imortalizada e não tumorigênica. É um modelo in vitro amplamente utilizado para estudar a resposta das células pulmonares a diversos carcinógenos e substâncias tóxicas. Além disso, é uma valiosa ferramenta de pesquisa para o estudo de diferentes infecções e doenças respiratórias, como a COVID-19 e os carcinomas pulmonares.
- Meio de crescimento
- Utiliza-se o meio BEGM (Meio de Crescimento de Células Epiteliais Brônquicas) contendo 10% de soro fetal bovino para a cultura da linha celular pulmonar BEAS-2B. O meio deve ser trocado a cada 2 a 3 dias.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação da população de BEAS-2B é de aproximadamente 26 horas.
- Tipo de crescimento
- A BEAS-2B é uma linhagem celular aderente de tipo epitelial.
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomende BEAS-2B
Neste artigo, discutiremos praticamente todos os aspectos da linha celular pulmonar BEAS-2B, incluindo sua origem, informações sobre cultura celular, vantagens, desvantagens e aplicações em pesquisa. Destacamos os seguintes pontos:
- Origem e características gerais das células BEAS-2B
- Linha celular BEAS-2B: Informações sobre cultura
- Vantagens e desvantagens das células BEAS-2B
- Aplicações da linha celular BEAS-2B na pesquisa
- Células BEAS-2B: publicações científicas
- Protocolos de cultura celular
1. Origem e características gerais das células BEAS-2B
A primeira coisa que se procura em uma linhagem celular é sua origem e características gerais. Aqui, você conhecerá as principais características e a origem das células epiteliais brônquicas humanas BEAS-2B. Você aprenderá: O que é a linhagem celular pulmonar BEAS-2B? Que tipo de células são as BEAS-2B? Qual é a origem das células BEAS-2B?
- A BEAS-2B, linha celular do epitélio brônquico, foi desenvolvida a partir de um tecido pulmonar humano não canceroso em 1988 pelo grupo de Curtis C. Harris [1].
- As células BEAS-2B apresentam uma morfologia semelhante à do epitélio.
HBEpC x BEAS-2B
As HBEpC são células primárias do epitélio brônquico humano. Assim como as BEAS-2B, são células epiteliais brônquicas humanas normais. No entanto, elas têm uma vida útil limitada em comparação com as células BEAS-2B imortalizadas. Ambas as linhagens celulares podem ser utilizadas para estudar biologia pulmonar, toxicologia e modelagem de doenças.
Linha celular BEAS-2B: Informações sobre o cultivo
As informações sobre o cultivo de uma linha celular podem facilitar seu trabalho com ela. Nesta seção do artigo, você aprenderá todos os conceitos básicos para a cultura da linha celular pulmonar BEAS-2B. Em particular, saberemos: Qual é o tempo de duplicação da BEAS-2B? Qual é o meio de cultura da BEAS-2B? A linha celular BEAS-2B é aderente? Como se cultiva células BEAS-2B?
Pontos-chave para a cultura de células BEAS-2B
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação da população de BEAS-2B é de aproximadamente 26 horas.
Adesiva ou em suspensão:
A BEAS-2B é uma linhagem celular aderente de tipo epitelial.
Densidade celular:
A densidade celular recomendada para a linhagem celular BEAS-2B é de 1 a 2 × 10⁴ células/cm². As células BEAS-2B aderentes são enxaguadas com solução salina tamponada com fosfato e incubadas com Accutase à temperatura ambiente por alguns minutos. Após a dissociação das células, adiciona-se meio fresco e as células são coletadas por centrifugação. As células coletadas são cuidadosamente ressuspensas e transferidas para um novo frasco para crescimento.
Meio de crescimento:
Utiliza-se o meio BEGM (Meio de Crescimento de Células Epiteliais Brônquicas) contendo 10% de soro fetal bovino para a cultura da linhagem celular pulmonar BEAS-2B. O meio deve ser substituído a cada 2 a 3 dias.
Condições de crescimento:
A cultura de BEAS-2B é mantida a 37 °C em uma incubadora umidificada com suprimento contínuo de 5% de CO₂.
Armazenamento:
Os frascos de células BEAS-2B congeladas podem ser armazenados na fase de vapor de nitrogênio líquido ou em um freezer elétrico a uma temperatura inferior a -150 °C.
Processo de congelamento e meio:
Os meios de congelamento CM-1 ou CM-ACF são utilizados para congelar a linhagem celular pulmonar BEAS-2B. As células são congeladas permitindo-se apenas uma redução de 1 °C por minuto na temperatura, a fim de proteger a viabilidade celular. Esse tipo de método é denominado congelamento lento.
Processo de descongelamento:
As culturas de BEAS-2B congeladas ou criopreservadas são descongeladas em banho-maria a 37 °C contendo um agente antimicrobiano por 40 a 60 segundos. Em seguida, os meios são adicionados às células, que podem ser cultivadas diretamente em novos frascos ou centrifugadas para remover os componentes do meio de congelamento. Depois, as células coletadas são ressuspensas e cultivadas. No primeiro caso, o meio de congelamento é removido após 24 horas.
Nível de biossegurança:
São necessários laboratórios de nível 1 de biossegurança para o manuseio de culturas de BEAS-2B.
Vantagens e desvantagens das células BEAS-2B
Assim como outras linhagens celulares, as células BEAS-2B também apresentam algumas vantagens e desvantagens. Algumas delas são discutidas a seguir.
Vantagens
As vantagens da linhagem celular BEAS-2B incluem:
Linha celular imortalizada
A linha celular epitelial brônquica humana BEAS-2B foi imortalizada. Portanto, ela continua a crescer sem entrar em senescência. Essa característica das células BEAS-2B elimina a necessidade de extrações repetidas de células epiteliais pulmonares humanas primárias, que têm uma vida útil mais curta.
Fácil de cultivar
As culturas de BEAS-2B são fáceis de manter. As células crescem e se propagam sem dificuldade em condições padrão de cultura. Não há requisitos exigentes ou complicados para a cultura celular.
Origem humana
A linha celular BEAS-2B tem origem e relevância humanas. Assim, é um modelo in vitro ideal para estudar as respostas, o comportamento e os processos das células epiteliais das vias aéreas humanas.
Desvantagens
As desvantagens associadas à linha celular pulmonar BEAS-2B são:
Células epiteliais pulmonares humanas transformadas
As células BEAS-2B são transformadas pelo vírus Ad12-SV40 2B, o que pode alterar seu comportamento e suas respostas em comparação com as células epiteliais brônquicas originais derivadas do tecido pulmonar humano.
Aplicações da linhagem celular BEAS-2B na pesquisa
A linhagem celular BEAS-2B oferece diversas aplicações na pesquisa biomédica. Algumas aplicações comuns das células BEAS-2B são:
- Toxicologia: as células BEAS-2B são frequentemente utilizadas para investigar a genotoxicidade e a citotoxicidade de várias toxinas, poluentes ambientais e substâncias químicas. Pesquisadores utilizam essa linhagem de células epiteliais brônquicas para avaliar os efeitos nocivos dessas substâncias na saúde pulmonar. Além disso, também estudam os mecanismos moleculares subjacentes. Por exemplo, um estudo realizado em 2021 avaliou a toxicidade do cádmio metálico na linhagem celular BEAS-2B. Os resultados da pesquisa revelaram que o cádmio induziu morte celular e danos mitocondriais na linhagem celular pulmonar BEAS-2B por meio da modulação da via de sinalização MAPK [2]. Outro estudo utilizou a linhagem celular BEAS-2B para avaliar a toxicidade de nanopartículas de óxido de zinco sob estresse oxidativo [3].
- Modelagem de doenças respiratórias: a linhagem celular BEAS-2B é uma excelente ferramenta de pesquisa e um modelo in vitro para o estudo de doenças respiratórias, como a doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), asma, câncer de pulmão e infecções virais, como a SARS-CoV-2. Os pesquisadores tendem a induzir condições relacionadas a doenças na linha celular BEAS-2B e a estudar os mecanismos celulares e moleculares subjacentes. Isso ajuda a identificar alvos potenciais para medicamentos e a desenvolver terapias personalizadas. Uma pesquisa realizada em 2022 utilizou a linha celular BEAS-2B e estudou o papel do estrogênio e de seus receptores na infecção pelo SARS-CoV-2. Os resultados revelaram que uma maior expressão do receptor de estrogênio GPER1 reduz a carga viral do SARS-CoV-2 nas células BEAS-2B. Portanto, ele pode estar envolvido na infecção ou na replicação do SARS-CoV-2 [4].
5. Células BEAS-2B: Publicações científicas
A seguir, apresentamos alguns estudos de pesquisa interessantes e mais citados que utilizam células BEAS-2B.
Toxicidade do grafeno em células pulmonares humanas normais (BEAS-2B)
Este estudo foi publicado em 2011 no Journal of Biomedical Nanotechnology. A pesquisa propôs que o óxido de grafite induz apoptose e citotoxicidade na linhagem celular epitelial brônquica normal (BEAS-2B).
Este artigo de pesquisa foi publicado no Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Este estudo explorou o potencial terapêutico da naringenina, um flavonóide, na linhagem celular BEAS-2B. Os resultados sugeriram que a naringenina protege as células pulmonares BEAS-2B contra a toxicidade induzida pelo paraquat ou danos oxidativos.
Este estudo foi publicado na revista Inhalation Toxicology (2011). Nele, os pesquisadores avaliaram o efeito tóxico de nanopartículas magnéticas com revestimentos de sílica amorfa na linha celular BEAS-2B in vitro.
Este artigo publicado na revista *Biomedicine & Pharmacotherapy* (2022) propôs que o ácido ursodeoxicólico pode impedir a migração anormal das células epiteliais das vias aéreas e prevenir danos causados pela interação entre a proteína spike do SARS-CoV-2 e o receptor ACE-2. Assim, ele pode ajudar a restaurar a camada basal epitelial.
Este estudo foi publicado em 2019 no Journal of Toxicology and Environmental Health. Os resultados da pesquisa indicam que a exposição crônica ao radônio pode promover a carcinogênese em células epiteliais brônquicas humanas (BEAS-2B) por meio da ativação do microRNA-34a.
Protocolos de cultura celular
O protocolo de cultura celular para as células BEAS-2B é descrito aqui.
- Subcultura de BEAS-2B: Este documento ajudará você a conhecer os meios de cultura e os procedimentos de subcultura das células BEAS-2B.
- Linha celular BEAS-2B: Este site contém todas as informações básicas necessárias para começar a trabalhar com a linha celular BEAS-2B, incluindo seus meios de cultura e protocolos para o manejo de culturas em proliferação e criopreservadas.
Referências
- Han, X., et al., As células epiteliais pulmonares humanas BEAS-2B apresentam características de células-tronco mesenquimais. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., O cádmio induziu apoptose e danos mitocondriais nas células BEAS-2B por meio da via de sinalização MAPK. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., A toxicidade das nanopartículas de óxido de zinco (ZnO) em células epiteliais brônquicas humanas (BEAS-2B) é acentuada pelo estresse oxidativo. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., A superexpressão do receptor de estrogênio GPER1 e o tratamento com G1 reduzem a infecção por SARS-CoV-2 em células brônquicas BEAS-2B. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.