SW480-Luc
US$ 777,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Informações gerais
| Descrição | A SW480-Luc é um derivado bioluminescente da linhagem celular humana SW480 de adenocarcinoma de cólon, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de vaga-lume. A linhagem celular parental SW480 foi estabelecida a partir de um adenocarcinoma primário do cólon de um paciente do sexo masculino, caucasiano, de 51 anos, e é amplamente utilizada como modelo de câncer colorretal primário. As células SW480 apresentam morfologia de tipo epitelial e abrigam mutações oncogênicas importantes, incluindo KRAS G12V, TP53 R273H e P309S, além do truncamento do APC, tornando essa linhagem um modelo relevante para o estudo do papel das vias de sinalização Wnt/β-catenina e KRAS no câncer colorretal. É importante ressaltar que a SW480 foi derivada do mesmo paciente que a SW620, mas representa o tumor primário, permitindo estudos comparativos da biologia do câncer colorretal primário em relação ao metastático. A integração estável da luciferase na SW480-Luc permite a imagem por bioluminescência (BLI) sensível e quantitativa da carga tumoral em modelos de xenoenxertos subcutâneos e ortotópicos utilizando hospedeiros imunocomprometidos. O sinal de luminescência emitido se correlaciona com o número de células tumorais viáveis, possibilitando o monitoramento longitudinal não invasivo do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta terapêutica. A SW480-Luc é amplamente utilizada para avaliação in vivo de agentes direcionados ao KRAS, inibidores da via Wnt e regimes quimioterápicos no câncer colorretal, bem como para estudos comparativos com a linhagem metastática correspondente SW620. A SW480-Luc mantém as características moleculares estabelecidas da linhagem parental SW480, incluindo mutações em KRAS, TP53 e APC. A modificação com luciferase aumenta substancialmente a produtividade experimental e a sensibilidade para estudos farmacodinâmicos in vivo. Os pesquisadores devem verificar a atividade da luciferase, o perfil mutacional e a cinética de crescimento sob suas condições experimentais específicas antes do uso pré-clínico em larga escala. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tecido | Dois pontos |
| Doença | Adenocarcinoma do cólon |
Características
| Idade | 51 anos |
|---|---|
| Gênero | Masculino |
| Etnia | caucasiano |
| Morfologia | De tipo epitelial |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulatórios
| Referência | SW480-Luc (número de catálogo da Cytion 305698) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_C8Y1 |
| Situação em relação aos OGMs | GMO-S1: Esta linhagem celular contém uma cassete repórter de luciferase de vaga-lume (Luc2, com códons otimizados) integrada de forma estável, introduzida por meio de transdução lentiviral incompetente para replicação. A população celular policlonal resultante foi mantida sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). É necessário o nível de contenção S1. Essa classificação se aplica apenas na Alemanha e pode diferir em outros países. |
Dados biomoleculares
| Receptores expressos | Fator de crescimento epidérmico (EGF), queratina (coloração por imunoperoxidase). A matrilisina, uma metaloproteinase associada à invasividade tumoral, não é expressa. |
|---|---|
| Expressão de proteínas | Proteína P53; Luc2 (vaga-lume, com códons otimizados) |
| Expressão de antígenos | HLA A2, B8, B17, tipo sanguíneo A, Rh+. Luc2 (vaga-lume, com códons otimizados) |
| Isoenzimas | G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1 |
| Tumorigênico | Sim, em camundongos nude |
| Vírus | Negativo para a transcriptase reversa |
| Suscetibilidade ao vírus | Vírus da imunodeficiência humana (HIV, LAV) |
| Produtos | Antígeno carcinoembrionário (CEA) 0,7 ng/10⁶ células/10 dias, queratina, TGF-β. Foi relatado que as células produzem GM-CSF. |
| Perfil mutacional | Mutação: p.Gln1338Ter, homozigótica; Mutação: p.Gly12Val, homozigótica; Mutação: p.Arg273His, heterozigótica; Mutação: p.Pro309Ser, heterozigótica |
Manuseio
| Meio de cultura | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 10% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Proporção de divisão | 1 a 3 |
| Densidade de semeadura | 1 a 3 × 10⁴ células/cm² |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |