HROC222 T1 M2 Células

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 300859

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	HROC222 T1 M2 é uma linhagem celular de adenocarcinoma colorretal humano estabelecida na coleção de modelos HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) a partir de um tumor primário ressecado de um paciente adulto. A designação “T1” indica que a amostra foi obtida no primeiro momento cirúrgico, enquanto “M2” denota o modelo in vitro correspondente gerado a partir desse tumor. A plataforma HROC integra um biobanco abrangente, anotação molecular padronizada e o estabelecimento paralelo de xenoenxertos derivados de pacientes (PDX) e linhagens celulares permanentes de baixa passagem, possibilitando modelos de pesquisa translacional clinicamente anotados. A geração do HROC222 T1 M2 seguiu procedimentos padronizados envolvendo a dissociação mecânica do tecido tumoral recém-ressecado, a preparação de suspensões de células únicas e a semeadura em placas de cultura revestidas com colágeno, em meio de cultura de células tumorais definido, suplementado com glutamina, antibióticos e antimicóticos. Em toda a coorte HROC, linhagens celulares primárias permanentes de câncer colorretal foram estabelecidas com sucesso a partir de aproximadamente 13% das amostras analisadas. A análise estatística identificou que um grau tumoral mais elevado estava significativamente associado ao estabelecimento bem-sucedido da linhagem celular primária, enquanto o estágio linfonodal avançado apresentou uma tendência positiva. Na análise multivariada da coleção, o envolvimento linfonodal surgiu como um preditor independente do sucesso no estabelecimento do modelo. A coleção HROC abrange todos os principais subtipos moleculares do carcinoma colorretal, incluindo instabilidade cromossômica (CIN), fenótipo de metilação de ilhas CpG (CIMP), tumores com microssatélites estáveis (MSS) e com alta instabilidade de microssatélites (MSI-H), bem como diversos contextos mutacionais que afetam genes-chave, como KRAS, BRAF, TP53, APC e PIK3CA. O HROC222 T1 M2 foi gerado dentro dessa estrutura rigorosamente caracterizada, permitindo a integração com dados clínico-patológicos e moleculares detalhados e, quando disponível, com o material PDX correspondente. Por ser um modelo de carcinoma colorretal derivado de paciente com poucas passagens, o HROC222 T1 M2 é adequado para investigações sobre a biologia tumoral, relações genótipo-fenótipo e testes terapêuticos pré-clínicos no âmbito da pesquisa em oncologia de precisão.
Organismo	Humano
Tecido	Cólon transverso
Doença	Adenocarcinoma
Local da metástase	Não aplicável (tumor primário do cólon transverso; T1 M2 indica o primeiro momento cirúrgico, modelo in vitro 2)
Aplicações	Pesquisa sobre o CRC; adenocarcinoma colorretal; biobanco HROC Linnebacher; sensibilidade a medicamentos; biologia tumoral; integração PDX-in vitro

Idade	79 anos
Gênero	Masculino
Etnia	caucasiano
Morfologia	De tipo epitelial
Tipo de célula	Células epiteliais
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	HROC222 T1 M2 (número de catálogo da Cytion 300859)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	9606
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_VQ93
Situação em relação aos OGMs	Sem modificação genética; linhagem celular de CCR do tipo selvagem derivada de paciente (biobanco HROC Linnebacher).

Meio de cultura	DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Suplementos	Adicione 10% de FBS ao meio
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos	A cada 3 a 5 dias
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

HROC222 T1 M2 Células

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular