Células RAG

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 395,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 305190

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	A linhagem celular RAG é um mutante não reversível resistente à 8-azaguanina, derivado de um adenocarcinoma renal de camundongos BALB/c. Essa linhagem foi desenvolvida por meio de passagens alternadas entre animais e cultura de tecidos, a fim de enriquecer a população tumorigênica e, ao mesmo tempo, eliminar os fibroblastos estromais normais. As células RAG apresentam uma morfologia amebóide a epitelóide, com processos citoplasmáticos proeminentes, e são resistentes a métodos de seleção dependentes da hipoxantina-guanina fosforibosiltransferase (HGPRT) devido à sua deficiência enzimática. Essa resistência facilitou seu uso em sistemas de seleção bioquímica para experimentos de hibridização de células somáticas. As células RAG são amplamente utilizadas como linha parental em estudos de fusão de células somáticas devido à sua compatibilidade com procedimentos de fusão que utilizam o vírus Sendai inativado. Quando fundidas com outras linhagens celulares, como LM(TK-) ou WI-38, os híbridos retêm cromossomos marcadores e exibem complementação bioquímica de deficiências metabólicas. Esses híbridos têm sido fundamentais no mapeamento de elementos reguladores genéticos e no estudo da expressão gênica, particularmente em enzimas associadas ao rim, como a esterase ES-2. Os híbridos RAG fornecem insights tanto sobre a segregação cromossômica inter e intraespecífica quanto sobre a genômica funcional. Além de seu papel em estudos de hibridização, as células RAG têm servido como modelo para estudar a regulação epigenética da expressão gênica. Células híbridas envolvendo RAG frequentemente apresentam extinção e reexpressão de características genéticas específicas, dependendo da retenção ou perda de cromossomos específicos. Isso torna a linhagem celular RAG uma ferramenta valiosa para compreender a dinâmica da regulação genética e da estabilidade cromossômica em células tumorigênicas.
Organismo	Mouse
Tecido	Rim
Doença	Carcinoma renal em camundongos
Sinônimos	Trapo

Raça/Subespécie	BALB/c
Morfologia	Ameboide
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	RAG (número de catálogo da Cytion 305190)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	10090
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_3575

Expressão de proteínas	Esterase-2 específica do rim (ES-2)

Meio de cultura	EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a)
Suplementos	Adicione ao meio 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos	2 a 3 vezes por semana
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Células RAG

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular