Células OLN-93

A OLN-93 é uma linhagem celular oligodendroglial permanente derivada de culturas gliais primárias do cérebro de ratos recém-nascidos. A linhagem celular teve origem em células transformadas espontaneamente em culturas gliais mistas e foi caracterizada por manter propriedades oligodendrogliais estáveis ao longo de períodos prolongados de cultura. As células OLN-93 proliferam continuamente na presença de soro, com um tempo de duplicação de aproximadamente 16 a 18 horas, e mantêm características-chave dos oligodendrócitos diferenciados. Análises imunocitoquímicas e bioquímicas demonstram que essas células expressam os principais marcadores específicos da mielina, incluindo galactocerebrosídeo (GC), proteína básica da mielina (MBP), glicoproteína associada à mielina (MAG), proteína proteolipídica (PLP) e proteína de Wolfgram (WP). A expressão da PLP e de sua isoforma DM20, resultante de splicing alternativo, foi confirmada no nível do mRNA por meio de RT-PCR.

É importante ressaltar que as células OLN-93 não expressam os marcadores astrocíticos vimentina e proteína ácida fibrilar glial (GFAP), nem o marcador de precursores de oligodendrócitos A2B5, indicando um fenótipo diferenciado, não precursor. Morfologicamente, as células apresentam uma aparência bipolar em condições padrão de cultura e desenvolvem processos arborizados quando cultivadas em baixa densidade ou em ambientes com baixo teor de soro, assemelhando-se a oligodendrócitos imaturos ou no estágio pós-natal inicial. Essas características tornam as células OLN-93 um modelo valioso para o estudo da diferenciação de oligodendrócitos, da expressão de proteínas da mielina e das interações com neurônios ou outros tipos de células gliais in vitro.

As células OLN-93 também foram geneticamente modificadas para o estudo de processos de doenças neurodegenerativas. Por exemplo, quando transfectadas para expressar a α-sinucleína humana (incluindo a mutante A53T) e a proteína tau, elas servem como modelo para investigar mecanismos de agregação proteica sob estresse. Quando expostas ao estresse oxidativo e proteossômico, as células OLN-93 formam agregados positivos para tioflavina S que se co-localizam com a α-sinucleína, a proteína tau e a αB-cristalina, assemelhando-se às inclusões citoplasmáticas gliais observadas em sinucleinopatias, como a atrofia multissistêmica. Essas alterações induzidas pelo estresse na solubilidade das proteínas e na composição dos agregados ressaltam a utilidade das células OLN-93 como um sistema-modelo para explorar a proteostase, a biologia das proteínas chaperonas e as respostas celulares dos oligodendrócitos à agregação patológica de proteínas.