Células NRK-IBB-DiHcRed1
US$ 800,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Informações gerais
| Descrição | A NRK-IBB-DiHcRed1 é uma linhagem celular modificada derivada de células renais normais de rato (NRK), projetada para expressar a proteína fluorescente vermelha DiHcRed1. Essa modificação permite que os pesquisadores acompanhem e visualizem processos celulares em tempo real por meio da microscopia de fluorescência. A fluorescência vermelha estável é ideal para imagens de células vivas, facilitando estudos sobre migração, divisão e morfologia celular. A linha celular mantém as características típicas das células NRK, incluindo morfologia de tipo epitelial e proliferação normal, tornando-a um modelo confiável para o estudo do comportamento de células de mamíferos. A fluorescência vermelha também permite a multiplexação com outros marcadores, ampliando seu uso na biologia celular, na pesquisa sobre o câncer e na triagem de medicamentos. |
|---|---|
| Organismo | Rato |
| Tecido | Rim |
| Sinônimos | NRK IBB-DiHcRed1 |
Características
| Raça/Subespécie | OsborneMendel |
|---|---|
| Morfologia | Células semelhantes a fibroblastos, com forma fusiforme |
| Propriedades de crescimento | Monocamada, aderente |
Dados regulatórios
| Referência | NRK-IBB-DiHcRed1 (número de catálogo da Cytion 500671) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 10116 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_AV95 |
| Depositante | Laboratório Ellenberg (EMBL) |
Dados biomoleculares
| Receptores expressos | Fator de crescimento epidérmico (EGF), atividade estimuladora da multiplicação (MSA) |
|---|---|
| Expressão de proteínas | IBB-DiHcRed1: Localização/gene: 1..589 / Pcmv, 656..916 / IBB, 932..1615, 1670..2356 / HcRed1, 3587..4381 / KanR/NeoR |
| Produtos | Promotor IBB do CMV (Ribbeck & Gorlich 2002), neomicina, fosfotransferase, fator de crescimento epidérmico, atividade estimuladora da multiplicação |
Manuseio
| Meio de cultura | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione ao meio 10% de FBS e 0,5 mg/mL de G418 |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Descarte o meio antigo e lave as células com PBS. Adicione uma solução recém-preparada de 0,025% de tripsina/0,02% de EDTA aquecida a 37 graus Celsius e aguarde até que as células se desprendam, o que geralmente leva cerca de 5 minutos. Neutralize a tripsina adicionando meio fresco e, em seguida, transfira a mistura celular para um tubo e centrifugue. Após a centrifugação, remova o sobrenadante, ressuspenda o sedimento celular em meio de cultura fresco e transfira a suspensão para novos frascos. Incorpore G418 ao meio de cultura para atingir uma concentração final de 0,5 mg/ml |
| Densidade de semeadura | 2 a 4 x 10⁴ células/cm² |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
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