Células MKN1

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 540,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

criotubo

Número do produto: 305589

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	A MKN1 é uma linhagem celular de câncer gástrico humano derivada de um paciente adulto com adenocarcinoma pouco diferenciado. Essa linhagem celular é amplamente utilizada na pesquisa sobre o câncer devido à sua relevância na modelagem da progressão, invasão e resposta do câncer gástrico às terapias. Ela apresenta uma morfologia de tipo mesenquimal, indicativa da transição epitelial-mesenquimal (EMT), um processo crítico na metástase do câncer. A linha celular MKN1 se destaca por sua expressão moderada a baixa de proteínas-chave como a RhoA, o que a torna uma ferramenta essencial no estudo de vias de sinalização ligadas à adesão e motilidade celular. Pesquisas recentes destacam a importância da MKN1 na exploração do papel da DCLK1 (quinase 1 semelhante à doublecortina), um suposto marcador de células-tronco cancerígenas, no câncer gástrico. A superexpressão de DCLK1 nas células MKN1 promove a EMT e aumenta a secreção de pequenas vesículas extracelulares (sEVs), que estão implicadas na migração celular e na remodelação do microambiente tumoral. A análise proteômica das sEVs de células MKN1 com superexpressão de DCLK1 identificou alterações significativas em proteínas envolvidas na migração e adesão, como STRAP e BCAM. Além disso, a atividade quinásica da DCLK1 parece regular a seleção de proteínas de carga dentro dessas vesículas, ressaltando seu potencial como alvo terapêutico. Além disso, estudos envolvendo a mutação RHOA (R129W) em células MKN1 revelaram seu papel na alteração das vias de migração e adesão celular, independentemente das mutações no CDH1. Ensaios funcionais mostram que a mutação resulta em um estado mais ativo de RhoA ligado ao GTP, associando-a ao aumento da motilidade celular. Essas descobertas posicionam o MKN1 como um modelo robusto para a análise dos mecanismos genéticos e moleculares subjacentes à patogênese do câncer gástrico e para o teste de possíveis intervenções terapêuticas.
Organismo	Humano
Tecido	Estômago
Doença	Carcinoma adenoescamoso
Local da metástase	Nódulo linfático
Sinônimos	MKN-1, MKN 1

Idade	72 anos
Gênero	Masculino
Etnia	Japonês
Morfologia	De tipo epitelial
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	MKN1 (número de catálogo da Cytion 305589)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	9606
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_1415

Perfil mutacional	Mutação: TP53, p.Val143Ala (c.428T>C)

Meio de cultura	RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Suplementos	Adicione 10% de FBS ao meio
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio e magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com TrypLE Express, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Células MKN1

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular