Células MHCC-97H-Luc
Informações gerais
| Descrição | A MHCC-97H-Luc é um derivado bioluminescente da linhagem celular humana MHCC-97H de carcinoma hepatocelular, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de vaga-lume. A linhagem celular parental MHCC-97H foi estabelecida a partir de um carcinoma hepatocelular em um paciente chinês do sexo masculino de 39 anos e é caracterizada por alto potencial metastático, conforme refletido em sua designação como a sublinhagem de alta metástase da série MHCC-97. As células MHCC-97H estão associadas à transformação pelo vírus da hepatite B (VHB) e exibem comportamento invasivo agressivo, tornando-as um modelo clinicamente relevante para o estudo do carcinoma hepatocelular altamente metastático e de estratégias terapêuticas direcionadas à invasão e disseminação. A integração estável da luciferase na MHCC-97H-Luc permite a imagem por bioluminescência (BLI) sensível e não invasiva da carga tumoral em modelos de implante ortotópico no fígado e de xenoenxertos subcutâneos utilizando hospedeiros imunocomprometidos. O sinal emitido se correlaciona com o número de células tumorais viáveis, possibilitando o monitoramento longitudinal do enxerto tumoral, da disseminação intra-hepática e das metástases à distância. A linhagem MHCC-97H-Luc é particularmente valiosa para a avaliação in vivo de agentes antimetastáticos, inibidores de quinases e novas terapias direcionadas contra o carcinoma hepatocelular altamente invasivo, bem como para investigar as interações do microambiente tumoral e os mecanismos moleculares subjacentes à metástase do HCC. O MHCC-97H-Luc mantém o alto potencial metastático e as características moleculares associadas ao HBV da linhagem parental MHCC-97H, proporcionando uma plataforma pré-clínica relevante e agressiva para a pesquisa do carcinoma hepatocelular. O repórter de luciferase aumenta a sensibilidade experimental e permite a avaliação farmacodinâmica em tempo real. Os pesquisadores devem validar a atividade da luciferase, o comportamento metastático e a cinética de crescimento em suas condições experimentais específicas antes do uso in vivo em larga escala. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tecido | Fígado |
| Doença | Carcinoma hepatocelular em adultos |
| Sinônimos | MHCC 97-H, MHCC97-H, MHCC97H |
Características
| Idade | 39 anos |
|---|---|
| Gênero | Masculino |
| Etnia | Chinês |
| Morfologia | De tipo epitelial |
| Tipo de célula | Semelhante a hepatócitos |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulatórios
| Referência | MHCC-97H-Luc (número de catálogo da Cytion 305687) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_4972 |
Dados biomoleculares
| Expressão de antígenos | Luc2 (firefly, com otimização de códons) |
|---|---|
| Tumorigênico | Alto potencial metastático |
| Vírus | Transformante: vírus da hepatite B (VHB) |
Manuseio
| Meio de cultura | DMEM |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 10% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Proporção de divisão | 1 a 3 |
| Densidade de semeadura | 1 a 3 × 10⁴ células/cm² |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento. |
| Descongelamento e cultura de células |
|
| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |