Células MDBK (NBL-1)
US$ 395,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Informações gerais
| Descrição | As células MDBK, abreviação de células renais bovinas Madin-Darby (também conhecidas como NBL-1), são um recurso biológico excepcional derivado dos rins de indivíduos adultos de Bos taurus aparentemente saudáveis, especificamente machos. Essas células crescem por adesão e possuem uma morfologia semelhante à epitelial. Uma das aplicações notáveis das células MDBK reside em sua capacidade de facilitar estudos in vitro sobre a expressão de antígenos derivados de Eimeria bovis na membrana da superfície celular do hospedeiro. Com um tempo médio de duplicação que varia de 24 a 35 horas, as células MDBK apresentam uma taxa de proliferação moderada. O estabelecimento da linhagem celular MDBK remonta a 18 de fevereiro de 1957, quando S.H. Madin e N.B. Darby conseguiram isolá-la com sucesso do rim de um novilho adulto saudável. Desde então, essas células tornaram-se um pilar da pesquisa biológica, possibilitando inúmeros avanços em diversos campos científicos. A análise do cariótipo das células MDBK revela um número modal de cromossomos de 51, indicando um estado hipodiplóide. Dentro da população celular, a condição hipodiplóide se manifesta como um número de cromossomos da linhagem-tronco de 2n = 60, com um componente 2S presente em aproximadamente 5% das células. Além disso, normalmente estão presentes de 11 a 14 cromossomos marcadores, compreendendo uma combinação de cromossomos metacêntricos, submetacêntricos e acro-telocêntricos. Notavelmente, o cromossomo X apresenta monossomia, enquanto não são observados cromossomos HSR nem DM’s (double minutes). As células MDBK apresentam uma ampla gama de aplicações no campo da pesquisa biológica. Sua utilidade se estende à cultura celular 3D, permitindo que os cientistas recriem estruturas complexas semelhantes a tecidos para estudos avançados. Além disso, as células MDBK são inestimáveis na triagem de alto rendimento, facilitando a triagem rápida e eficiente de compostos ou agentes para diversos fins. Adicionalmente, essas células desempenham um papel crucial em estudos toxicológicos, essenciais para avaliar a segurança e os possíveis efeitos adversos de substâncias em organismos vivos. |
|---|---|
| Organismo | Bovino |
| Tecido | Rim |
| Sinônimos | MDBK (NBL-1), NBL-1, Rim bovino Madin-Darby, Rim bovino Madin Darby |
Características
| Raça/Subespécie | Bos taurus |
|---|---|
| Idade | Adulto |
| Gênero | Masculino |
| Morfologia | De tipo epitelial |
| Propriedades de crescimento | Monocamada, aderente |
Dados regulatórios
| Referência | MDBK (NBL-1) (número de catálogo da Cytion 600396) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 9913 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_0421 |
Dados biomoleculares
| Vírus | A linhagem foi testada e comprovou-se que está livre do vírus da diarreia bovina (BVD). |
|---|---|
| Suscetibilidade ao vírus | As células são suscetíveis ao vírus da diarreia bovina, à estomatite vesicular (cepa Indiana), ao vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina, ao parvovírus bovino, aos adenovírus bovinos I e III e ao vírus da parainfluenza 3. |
| Resistência a vírus | Poliovírus 2 |
| Transcriptase reversa | Negativo |
| Produtos | Queratina |
Manuseio
| Meio de cultura | EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione ao meio 10% de FBS e 1% de NEAA |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Densidade de semeadura | 1 x 104 células/cm² |
| Renovação de fluidos | A cada 3 dias |
| Recuperação pós-degelo | Rápido |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
|
| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
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Certificado de Análise (CoA)
| Número do lote | Tipo de certificado | Data | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 600396-090123 | Certificado de Análise | 21. Jul. 2025 | 600396 |