Células LM/TK (LMTK-)
US$ 395,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Informações gerais
| Descrição | A linhagem celular LM/TK- (LMTK-) é derivada de fibroblastos murinos e caracteriza-se pela ausência de atividade da timidina quinase (TK). Essa linhagem celular é particularmente útil em pesquisas de biologia genética e molecular, nas quais serve como um sistema-modelo para o estudo da função gênica, da replicação do DNA e da recombinação. A ausência de TK nessas células permite a seleção de mutantes ou células recombinantes que recuperaram a atividade da TK, tornando-as valiosas em estudos envolvendo mutantes com deficiência de TK e para a seleção de clones TK-positivos após a transfecção com DNA exógeno. Essa linhagem celular, derivada de uma sublinhagem da linhagem de fibroblastos de camundongo L-M, que é resistente ao BUdR, é potencialmente utilizada para estudos genéticos e bioquímicos, tais como transferência gênica e hibridização de células somáticas. As células LM/TK- são comumente empregadas em pesquisas envolvendo o gene da timidina quinase do vírus do herpes simplex (HSV), pois fornecem uma base crucial para a seleção de transformantes do gene HSV-TK. Isso tem implicações significativas na pesquisa em terapia gênica, na qual o HSV-TK é utilizado em estratégias de terapia gênica suicida para matar seletivamente células cancerosas. Além disso, essas células são utilizadas na produção de vírus recombinantes e na análise da expressão e replicação de genes virais. A linhagem celular LMTK- desempenha, portanto, um papel fundamental no avanço de nossa compreensão da manipulação genética e no desenvolvimento de estratégias terapêuticas. |
|---|---|
| Organismo | Mouse |
| Tecido | Tecido conjuntivo subcutâneo, aréola mamária e tecido adiposo |
| Sinônimos | L-M[TK-], LM TK negativo, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, células L (TK-), L(TK-), L(tk-) |
Características
| Raça/Subespécie | C3H/An |
|---|---|
| Idade | 100 dias |
| Gênero | Masculino |
| Morfologia | Semelhante a fibroblastos |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulatórios
| Referência | LM/TK(LMTK-) (número de catálogo da Cytion 305176) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_4536 |
Dados biomoleculares
| Expressão de antígenos | H-2k |
|---|---|
| Tumorigênico | Sim, em camundongos nude (os tumores se desenvolveram em até 21 dias com frequência de 100% (5/5) nos camundongos nude inoculados por via subcutânea com 1×10⁷ células). |
Manuseio
| Meio de cultura | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 10% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Renovação de fluidos | 2 vezes por semana |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
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Certificado de Análise (CoA)
| Número do lote | Tipo de certificado | Data | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 305176-100725 | Certificado de Análise | 18. Aug. 2025 | 305176 |