Células LLC-PK1
US$ 395,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Informações gerais
| Descrição | As células LLC-PK1 são uma linhagem celular bem estabelecida e amplamente utilizada na pesquisa biomédica. Essas células foram derivadas do rim de um porco macho saudável, apresentando morfologia epitelial típica. A linhagem LLC-PK1 é polarizada e possui junções apertadas, o que a torna um modelo ideal para tecido epitelial. Uma das características fundamentais das células LLC-PK1 é sua capacidade de produzir o ativador do plasminogênio, uma substância que estimula a fibrinólise. Essa propriedade tornou as células LLC-PK1 particularmente valiosas na pesquisa sobre trombose. Nos últimos anos, o ativador do plasminogênio passou a ser incluído em medicamentos utilizados em terapias contra a trombose, uma vez que facilita a dissolução de pequenos coágulos sanguíneos. Além de produzirem ativadores do plasminogênio, as células LLC-PK1 produzem grandes quantidades de citoqueratina. Essa característica as tornou populares para diversas investigações farmacológicas e metabólicas. A linhagem LLC-PK1 tem sido utilizada em estudos de metabolismo, transporte, toxicidade e interação de medicamentos. As células LLC-PK1 também são frequentemente utilizadas em ensaios de permeabilidade. O mecanismo de transporte de uracila difere dependendo das linhagens celulares, com um sistema independente de Na+ na membrana basolateral das células Caco-2 e sistemas tanto dependentes quanto independentes de Na+ na membrana apical das células LLC-PK1. Em comparação com outras linhagens celulares, as células LLC-PK1 compartilham muitas características das células tubulares proximais in vivo, incluindo microvilosidades da membrana apical, alta atividade das enzimas da membrana apical e expressão de receptores do hormônio paratireóideo e transportadores de glicose dependentes de sódio. Isso torna as células LLC-PK1 uma ferramenta valiosa em estudos de toxicologia renal. Outra linhagem celular comumente utilizada em estudos de toxicologia renal é a linhagem MDCK. Assim como as células LLC-PK1, as células MDCK são epiteliais, mas apresentam características mais típicas das células tubulares distais. Elas expressam receptores de vasopressina, oxitocina e prostaglandina, que, quando estimulados, ativam a adenilato ciclase. As linhas celulares LLC-PK1 e MDCK proliferam rapidamente e podem ser passadas facilmente por muitas gerações em culturas de monocamada. As células LLC-PK1 também são capazes de formar “cúpulas”, bolhas cheias de líquido resultantes do transporte de água e solutos, junções apertadas e adesão das células ao substrato. Em conclusão, a linhagem celular LLC-PK1 é uma ferramenta versátil e valiosa para a pesquisa biomédica. Ela tem sido amplamente utilizada em diversos estudos sobre metabolismo de fármacos, transporte de fármacos, toxicidade de fármacos, interações medicamentosas, toxicologia renal e ensaios de permeabilidade. Com sua morfologia epitelial bem estabelecida e a produção de ativador de plasminogênio e citoqueratina, as células LLC-PK1 são um modelo ideal para tecido epitelial. |
|---|---|
| Organismo | Sus Scrofa |
| Tecido | Rim |
| Aplicações | Metabolismo de fármacos, ensaios de permeabilidade, toxicidade e estudos de interação. |
| Sinônimos | LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1 |
Características
| Raça/Subespécie | Hampshire |
|---|---|
| Idade | 3 a 4 semanas |
| Gênero | Masculino |
| Morfologia | De tipo epitelial |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulatórios
| Referência | LLC-PK1 (número de catálogo da Cytion 607264) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | A linhagem celular contém sequências e transcritos do oncovírus suíno tipo C (PCOV). O modo de infecção é indeterminado, e não se pode excluir a possibilidade de secreção viral. Na Alemanha, esses vírus são classificados como BSL 1 para seres humanos e BSL 2 para animais (TRBA 462). No entanto, o Comitê Central Alemão de Segurança Biológica (ZKBS) classifica esses vírus e as linhagens celulares infectadas como BSL 2 para aplicações de modificação genética. |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_0391 |
Dados biomoleculares
| Vírus | Contém sequências e transcritos do oncovírus suíno tipo C (PCOV). Não se pode excluir a possibilidade de expressão viral. |
|---|---|
| Produtos | Ativador do plasminogênio |
Manuseio
| Meio de cultura | Meio 199, p: 2,7 mM de glutamina estável, p: 2,2 g/L de NaHCO₃, p: EBSS (número de artigo da Cytion 820101a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 3% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Recolha as células em suspensão em um tubo de 15 ml e lave delicadamente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (use 3 a 5 ml para frascos T25 e 5 a 10 ml para frascos T75). Aplique Accutase (1 a 2 ml para frascos T25, 2,5 ml para frascos T75), garantindo a cobertura total da camada celular. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 10 minutos. Após a incubação, combine e centrifugue tanto a suspensão quanto as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspenda cuidadosamente o sedimento celular e transfira a suspensão celular para novos frascos contendo meio fresco. |
| Densidade de semeadura | 1 a 3 × 10⁶ células/cm² |
| Renovação de fluidos | A cada 3 dias |
| Recuperação pós-degelo | Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas. |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
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Certificado de Análise (CoA)
| Número do lote | Tipo de certificado | Data | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 607264-030725 | Certificado de Análise | 18. Aug. 2025 | 607264 |