Células L-929-GFP

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 305956

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	As células L-929-GFP são um derivado marcado com fluorescência da linhagem celular de fibroblastos murinos L-929, que foi originalmente estabelecida a partir do tecido conjuntivo subcutâneo de um camundongo adulto. A linhagem parental L-929 é um dos modelos de fibroblastos de camundongo mais amplamente utilizados na pesquisa biomédica e se caracteriza por seu crescimento aderente, morfologia fusiforme e robusta capacidade proliferativa. As células L-929 são amplamente utilizadas em estudos de citotoxicidade, inflamação, biologia da matriz extracelular e interações hospedeiro-patógeno, além de serem comumente empregadas para a produção e bioensaio de citocinas, como o fator de necrose tumoral-α (TNF-α). A expressão estável da proteína fluorescente verde (GFP) nas células L-929-GFP permite a visualização direta e o acompanhamento quantitativo do comportamento dos fibroblastos em tempo real. Essas células são particularmente úteis para aplicações baseadas em fluorescência, incluindo ensaios de migração, experimentos de cocultura, estudos de engenharia de tecidos e imagens de células vivas. As células L-929-GFP mantêm as principais características biológicas da linhagem parental de fibroblastos, ao mesmo tempo em que oferecem maior utilidade para o monitoramento da localização celular, proliferação e interações em ambientes celulares complexos. Consequentemente, elas servem como um modelo versátil para a investigação da dinâmica das células estromais, processos de cicatrização de feridas, compatibilidade de biomateriais e respostas citotóxicas imunomediadas. Modificação genética: Modificadas de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, a fim de expressar o repórter da proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantidas como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.
Organismo	Mouse
Tecido	Tecido conjuntivo
Sinônimos	L929/GL50

Idade	100 dias
Gênero	Masculino
Tipo de célula	Fibroblasto
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	L929-GFP (número de catálogo da Cytion 305956)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	10090
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_E2Z7
Situação em relação aos OGMs	GMO-S1: Esta linhagem celular contém um repórter da proteína fluorescente verde ZsGreen1 integrado de forma estável, introduzido por meio de transdução lentiviral incompetente para replicação. A população celular policlonal resultante foi mantida sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). É necessário o nível de contenção S1. Essa classificação se aplica apenas na Alemanha e pode diferir em outros países.

Expressão de antígenos	ZsGreen1 (proteína fluorescente verde)

Meio de cultura	DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Suplementos	Adicione 10% de FBS ao meio
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de semeadura	1 a 3 × 10^⁴ ^células/cm^²
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando suavemente. Centrifugue a mistura a 200 x g por 5 minutos e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento. Siga o procedimento descrito na seção “Recuperação pós-descongelamento”
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Células L-929-GFP

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular