Células KC

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 300604

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	KC (Kc167) é uma linhagem celular embrionária de Drosophila melanogaster derivada de um embrião feminino no estágio de fechamento dorsal, registrada no Cellosaurus como CVCL_Z833. A linhagem foi originalmente estabelecida e tem sido amplamente utilizada na biologia celular da Drosophila, em triagens genéticas e na genômica funcional. As células Kc167 foram imortalizadas com SV40 e crescem de forma semiaderente, formando uma população mista de células aderidas e flutuantes. Elas estão entre as linhagens celulares de Drosophila mais bem caracterizadas e são totalmente adequadas para o silenciamento gênico mediado por RNAi, o que as torna um modelo fundamental para triagens de RNAi em todo o genoma na biologia de invertebrados. As células KC são aplicáveis na biologia celular da Drosophila, em triagens de RNAi e CRISPR em todo o genoma, em estudos de vias de transdução de sinal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), em pesquisas sobre imunidade inata e em estudos comparativos de vias conservadas evolutivamente. O genoma da Drosophila, totalmente sequenciado e anotado, combinado com extensos bancos de dados públicos de reagentes de RNAi (por exemplo, DRSC/TRiP), torna as células KC particularmente poderosas para descobertas genômicas funcionais imparciais. A classificação BSL-2 se aplica devido à imortalização por SV40. As células KC são cultivadas no meio Schneider para Drosophila, suplementado com 2 mM de glutamina e 10% de FBS. É importante ressaltar que as linhagens celulares de Drosophila são cultivadas a 25 °C em ar ambiente sem CO₂ (e não a 37 °C / 5% de CO₂, como no caso das células de mamíferos). As células são repicadas por ressuspensão e diluição suaves (crescimento semiaderente). O meio é renovado ou as células são diluídas a cada 2–3 dias.
Organismo	Drosophila melanogaster (mosca-da-fruta)
Tecido	Embrião
Doença	Normal
Local da metástase	Embrião (fase de fechamento dorsal)
Aplicações	Biologia celular da Drosophila; triagens de RNAi em todo o genoma; triagens CRISPR; transdução de sinal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); imunidade inata; genômica funcional de invertebrados
Sinônimos	KC, K C

Idade	Fase de fechamento dorsal
Gênero	Mulher
Morfologia	Semiadherente, semelhante ao epitélio
Tipo de célula	Células embrionárias
Propriedades de crescimento	semiaderente

Referência	KC (número de catálogo da Cytion 300604)
Nível de biossegurança	2
NCBI_TaxID	7227
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_Z833
Situação em relação aos OGMs	GMO-S2: Esta linhagem celular de Drosophila contém uma cassete de imortalização SV40 integrada de forma estável. É necessário o nível de contenção BSL-2. Essa classificação se aplica apenas na Alemanha e pode variar em outros países.

Suscetibilidade ao vírus	SV40 imortalizado

Meio de cultura	Meio de Schneider para Drosophila + 2 mM de glutamina + 10% de soro fetal bovino (FBS).
Suplementos	Adicione ao meio 2 mM de glutamina e 10% de FBS
Reagente de dissociação	Não é necessário (semi-aderente; ressuspender delicadamente)
Tempo de duplicação	aproximadamente 24 a 48 horas
Subcultura	Pipete delicadamente a cultura para ressuspender as células semiaderentes. Transfira um volume adequado para um novo frasco e adicione meio de Schneider fresco e pré-aquecido. Dilua até atingir uma densidade de 5 × 10⁵ a 1 × 10⁶ células/ml. Incube a 25 °C em ar ambiente, sem CO₂.
Proporção de divisão	1 a 3
Densidade de semeadura	5 × 10⁵ a 1 × 10⁶ células/ml
Renovação de fluidos	A cada 2 ou 3 dias
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	25 °C, ar ambiente (não é necessário CO₂).
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Células KC

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular