Células HeLa EB3 GFP KIRC14
Informações gerais
| Descrição | HeLa EB3-GFP Kirc 14 é um derivado geneticamente modificado da linhagem celular humana HeLa de carcinoma cervical, projetado para expressar de forma estável uma construção de fusão da EB3 (proteína de ligação terminal 3) marcada com GFP, com “Kirc 14” indicando um subclone específico (clone 14) selecionado do conjunto de células transfectadas. A EB3 é um membro da família das proteínas de ligação às extremidades que acompanha as extremidades positivas dos microtúbulos em crescimento e serve como um marcador do comportamento dinâmico dos microtúbulos em células vivas. A proteína de fusão GFP-EB3 produz sinais fluorescentes característicos, semelhantes a cometas, nas pontas dos microtúbulos em polimerização, permitindo a imagem em células vivas da dinâmica dos microtúbulos, do transporte intracelular e da organização do citoesqueleto em tempo real. O HeLa EB3-GFP Kirc 14 é utilizado em pesquisas de biologia celular para a imagem em células vivas da dinâmica das extremidades positivas dos microtúbulos, estudos da montagem do fuso mitótico e das interações entre cinetócoros e microtúbulos, investigações do transporte intracelular de cargas e avaliação de compostos que afetam a dinâmica da polimerização dos microtúbulos. A expressão subclonal estável de GFP-EB3 proporciona intensidade e padrão de fluorescência consistentes ao longo das passagens, tornando o clone 14 adequado para ensaios de imagem quantitativa e triagem de alto rendimento de agentes direcionados aos microtúbulos. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tecido | Colô, do útero |
| Doença | Adenocarcinoma cervical (de origem HeLa); transfectado de forma estável com GFP-EB3 (reporter da extremidade positiva dos microtúbulos) |
| Aplicações | Imagem da dinâmica dos microtúbulos em células vivas; estudos do fuso mitótico; pesquisa sobre a interação entre cinetóquios e microtúbulos; transporte intracelular; triagem de medicamentos direcionados aos microtúbulos |
Características
| Morfologia | De tipo epitelial |
|---|---|
| Tipo de célula | Células epiteliais |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulatórios
| Referência | HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (número de catálogo da Cytion 305718) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Número de acesso do Cellosaurus | Derivado de HeLa (CVCL_0030); subclone GFP-EB3 não designado de forma independente |
| Situação em relação aos OGMs | GMO-S1: Esta linhagem HeLa EB3 GFP KIRC14 contém uma construção de EB3 marcada com GFP para o rastreamento da extremidade positiva dos microtúbulos em imagens de células vivas. Essa classificação se aplica apenas na Alemanha e pode diferir em outros países. |
Dados biomoleculares
Manuseio
| Meio de cultura | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 10% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase, 10 min., 37 °C |
| Tempo de duplicação | aprox. 24 horas |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS. Cubra com Accutase, incube à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos, ressuspenda com meio, centrifugue a 300×g por 3 minutos e transfira para frascos novos com meio de seleção. |
| Proporção de divisão | 1 a 5 |
| Densidade de semeadura | 1 a 3 × 10⁴ células/cm² |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
Certificado de Análise (CoA)
| Número do lote | Tipo de certificado | Data | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 305718-260526 | Certificado de Análise | 13. Jul. 2026 | 305718 |